一种药品中亚锡含量的测定方法
【技术领域】
[0001]本发明属于金属元素含量测定领域，具体涉及一种药品中亚锡含量的测定方法。
【背景技术】
[0002]锡是一种略带蓝色的白色光泽的低熔点金属元素，在化合物内呈二价或四价，不会被空气氧化。锡是人体不可缺少的微量元素之一，其主要的生理功能表现在抗肿瘤方面，而人体中过量锡的摄入会引起中枢神经系统的损害。其中，氯化亚锡常被用作还原剂，如放射性锝[99mTc]标记冻干药品中一般包括标记配体、还原剂、辅料等，用于制备放射性锝[99mTc]标记注射液，在使用时，将新鲜淋洗的高锝[99mTc]酸盐注射液加入冻干品中，+7价的高锝[99mTc]被还原剂还原成低价态而具有标记活性，与标记配体结合，形成放射性锝[99mTc]标记注射液，用于临床治疗，所使用的还原剂一般选用氯化亚锡。中国药典2015版收载的此类放射性锝[99mTc]标记冻干药品共6个品种，具体品种如下:注射用亚锡焦磷酸钠、注射用亚锡亚甲基二膦酸盐、注射用亚锡植酸钠、注射用亚锡喷替酸、注射用亚锡依替菲宁和注射用亚锡聚合白蛋白，上述品种的冻干药品全部采用氯化亚锡为还原剂。
[0003]氯化亚锡用于还原高价锝[99mTc]至低价锝[99mTc]，其含量是放射性锝[99mTc]标记反应顺利进行的关键，锝[99mTc]标记率的高低决定临床使用的效果，通过中国药典2015版中的氧化还原电位滴定法的半定量方法控制上述放射性锝[99mTc]标记冻干药品中的亚锡量。但是，由于每瓶放射性锝[99mTc]标记冻干药品中所含氯化亚锡的量极少，往往少于lmg，采用氧化还原电位滴定法的半定量方法测定氯化亚锡的量误差较大，结果不精确，无法精确测定亚锡量，操作步骤也相对繁琐。
[0004]另外有报道用示波极谱法测定亚锡量，但需用汞试液，且仪器设备要求高，国内极少用到。如文献《分光光度法测定地质样品中的微量锡》(操立新，资源环境与工程，2012年6月，第26卷2期)中公开了当锡含量低时可以采用光度法测定，其中介绍了如苯基荧光酮法，橡黄素法，苏木素法，孔雀绿-硫氰酸盐法，二硫酚法和钼蓝法等可对锡含量进行测定。苯基荧光酮法、橡黄素法需用毒性的有机溶剂萃取测定。苏木素法中影响因素较多，测定条件严格。在0.6-lmol.L—1的硫酸介质中，锡能与硫氰酸盐及碱性染料生成三元有色配合物，可用有机试剂萃取或在分散剂存在下于水相中进行光度法测定，钨、钼、锌和钴对测定有严重干扰。上述方法仅用于+4价锡而不适用于+2价亚锡。二硫酚在酸性溶液中与二价锡生成红色沉淀，以十二烷基硫酸钠为分散剂用光度法测定;钼蓝法利用二价锡的还原作用，将磷钼酸还原产生的蓝色进行光度法测定，上述这些方法干扰元素多，已经很少使用。而该文献中公开的方案是在0.5-2.5mol.L—1的硫酸介质中，在溴化十六烷基三甲胺存在下，锡与水杨基荧光酮形成稳定的红色配合物，在分光光度计上，以实际空白溶液作参比，于510nm波长处测定吸光度，该方法具有较高的灵敏度。然而上述方案中仍然存在对于锡含量少于Img的放射性锝[99mTc]标记冻干药品中的氯化亚锡的含量测定不精确，误差较大，且存在测定步骤中使用的试剂种类过多，步骤繁琐等问题。
【发明内容】
[0005]为此，本发明所要解决的技术问题在于现有技术中亚锡含量的测定方法不精确、误差大和步骤繁琐等问题，进而提供一种精确的、步骤简单的药品中亚锡含量的测定方法。
[0006]为解决上述技术问题，本发明提供了一种药品中亚锡含量的测定方法，包括如下步骤:
[0007](I)供试品溶液的制备:取供试品，加入按洗脱比例混合的流动相A和流动相B溶液溶解并稀释，得到亚锡量浓度为0.0lmg/mL-0.5mg/mL的样品溶液，即得；
[0008](2)对照品溶液的制备:取氯化亚锡(SnCl2.2H20)100mg，精密称定，置于1mL量瓶中，加0.03mol/L-0.05mol/L稀盐酸溶解并稀释至刻度，得到氯化亚锡溶液，精密量取所述氯化亚锡溶液0.05mL-0.15mL置于1mL量瓶中，加入按洗脱比例混合的流动相A和流动相B溶液稀释至刻度，即得；
[0009]色谱条件与系统适用性试验:照高相液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以浓度为5g/L-8g//L的磷酸盐溶液为流动相A，所述流动相A中含2.8g/L_3.5g/L离子对试剂和0.7g/L-l.lg/L金属络合剂，以色谱纯甲醇为流动相B，按照流动相A:流动相B的体积比为78-92:22-8进行洗脱;控制流动相的流速为0.8mL/min-l.2mL/min；控制柱温20°C-30°C ;检测波长为248nm-252nm;
[0010]测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2yL-20yL注入液相色谱仪，测定并计算。
[0011]所述的药品中亚锡含量的测定方法，包括如下步骤:
[0012](I)供试品溶液的制备:取供试品，加入按洗脱比例混合的流动相A和流动相B溶液溶解并稀释，得到亚锡量浓度为0.0lmg/mL-0.5mg/mL的样品溶液，即得；
[0013](2)对照品溶液的制备:取氯化亚锡(SnCl2.2H20)100mg，精密称定，置1mL量瓶中，加0.04mol/L稀盐酸使溶解并稀释至刻度，精密量取该氯化亚锡溶液0.1mL置1mL量瓶中，加入按洗脱比例混合的流动相A和流动相B溶液稀释至刻度，即得；
[0014]色谱条件与系统适用性试验:照高相液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以浓度为6.5g/L的磷酸盐溶液为流动相A，所述流动相A中含3.2g/L离子对试剂和0.9g/L金属络合剂，以色谱纯甲醇为流动相B，按照流动相A:流动相B的体积比为85:15进行洗脱;控制流动相的流速为lmL/min;控制柱温25°C ；检测波长为250nm;
[0015]测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2yL-20yL注入液相色谱仪，测定并计算。
[0016]所述的测定药品中亚锡含量的测定方法，所述离子对试剂包括硫酸氢四丁基铵、十六烷基硫酸胺、四丁基氢氧化铵、四丁基溴化铵和/或十二烷基三甲基氯化铵。
[0017]所述的测定药品中亚锡含量的测定方法，所述离子对试剂为硫酸氢四丁基铵。
[0018]所述的测定药品中亚锡含量的测定方法，所述金属络合剂包括乙二胺四乙酸二钠、二乙基二硫代氨基甲酸钠、氨基三乙酸和/或二亚乙基三胺五乙酸。
[0019]所述的测定药品中亚锡含量的测定方法，所述金属络合剂为乙二胺四乙酸二钠。
[0020]所述的测定药品中亚锡含量的测定方法，所述磷酸盐溶液包括磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和/或磷酸钠缓冲溶液。
[0021]本发明提供了一种上述的药品中亚锡含量的测定方法在金属离子含量测定领域中的用途。
[0022]本发明提供了一种上述的药品中亚锡含量的测定方法在放射性锝[99mTc]标记冻干药品中亚锡含量测定领域中的用途。
[0023]所述放射性锝[99mTc]标记冻干药品包括注射用亚锡焦磷酸钠、注射用亚锡亚甲基二膦酸盐、注射用亚锡植酸钠、注射用亚锡喷替酸、注射用亚锡依替菲宁、注射用亚锡葡庚糖酸钠、注射用亚锡替曲膦和注射用亚锡二巯丁二酸。
[0024]本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点，
[0025](I)本发明所述的一种药品中亚锡含量的测定方法，通过严格控制高效液相色谱的条件，选择合适的流动相组成，有力的克服了对于锡含量少于Img的冻干药品中的氯化亚锡的含量测定不精确，误差较大，且在测定步骤中使用的试剂种类过多，步骤繁琐等缺陷，可以对亚锡量浓度为0.01-0.5mg/mL内的样品溶液中的锡含量进行精确测定，步骤简单；
[0026](2)本发明所述的一种药品中亚锡含量的测定方法，通过选择合适的流动相组成，以浓度为6.5g/L的磷酸盐溶液为流动相A，所述流动相A中含3.2g/L离子对试剂和0.9g/L金属络合剂，以色谱纯甲醇为流动相B，按照流动相A:流动相B的体积比为85:15，以及其他的色谱条件，进一步提高了对锡含量少于Img的冻干药品中氯化亚锡的含量的精确测定；
[0027](3)本发明所述的一种药品中亚锡含量的测定方法，通过选择硫酸氢四丁基铵、十六烷基硫酸胺、四丁基氢氧化铵、四丁基溴化铵和/或十二烷基三甲基氯化铵作为流动相A中的离子对试剂，亚锡可以与上述离子对试剂形成离子对，延长亚锡在色谱柱中的保留时间，提高了对锡含量少于Img的冻干药品中氯化亚锡的含量的精确测定，测定结果可靠、稳定；
[0028](4)本发明所述的一种药品中亚锡含量的测定方法，通过选择乙二胺四乙酸二钠、二乙基二硫代氨基甲酸钠、氨基三乙酸和/或二亚乙基三胺五乙酸作为流动相A中的金属络合剂，亚锡可以与上述金属络合剂形成稳定的络合物，然后可以与离子对试剂形成离子对，进一步延长亚锡在色谱柱中的保留时间，提高了对锡含量少于Img的冻干药品中氯化亚锡的含量的精确测定，测定结果可靠、稳定；
[0029](5)本发明所述的一种药品中亚锡含量的测定方法在放射性锝[99mTc]标记冻干药品中亚锡含量测定领域中的用途，尤其适用于注射用亚锡焦磷酸钠、注射用亚锡亚甲基二膦酸盐、注射用亚锡植酸钠、注射用亚锡喷替酸、注射用亚锡依替菲宁和注射用亚锡葡庚糖酸钠、注射用亚锡替曲膦和注射用亚锡二巯丁二酸等含有微量亚锡的冻干药品的锡含量的精确测定。
[0030]实验例
[0031]通过以下方法考察本发明所述的药品中亚锡含量的测定方法
[0032]1.线性考察
[0033]取氯化亚锡(SnCl2.2H20)100mg，精密称定，至1mL量瓶中，加0.04mol/L盐酸使溶解并稀释至刻度，即为氯化亚锡对照品贮备液。
[0034]分别精密量取氯化亚锡对照品贮备液0.05mL、0.075mL、0.1mL、0.125mL、0.15mL至1mL量瓶中，加入按洗脱比例混合的流动相A和流动相B溶液稀释至刻度，按实施例17的方法进彳T试验。
[0035]以对照峰面积为纵坐标(Y)，进样量(yg)为横坐标(X)进行线性回归，求得回归方程式为:丫 = 5.1646\104父+2.1316\1044 = 0.9984。
[0036]结果表明:当氯化亚锡(SnCl2.2H20)的进样