录VIB薄层扫描法)进行扫描;波长:As = 540nm，XR = 640nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算每570mg大青叶药材所得制剂中的靛玉红(C16H10N202)含量，以此来表征制剂中的大青叶含量。
[0099]试验例2:稳定性
[0100]将上文制得的各实施例制剂(固体制剂用铝塑料复合膜袋密封包装)，置于40°C恒温箱中放置6个月，测定各样品在O月时和6月时制剂中的靛玉红含量;对于每一个制剂，计算其6月时靛玉红含量相对于O月时靛玉红含量的百分数，即:[6月时靛玉红含量+ 0月时靛玉红含量]X 100%，其在本发明中可称为制剂中靛玉红的残余含量。本领域技术人员公知，制剂中的活性成分含量通常要求在40°C放置6月的经典加速试验中，活性成分残余含量要求大于90%。
[0101 ] 试验例3:生物学试验性
[0102] 照CN101322810B说明书
[0018]至
[0121]段所载方法测定本发明实施例4和实施例5所得颗粒剂的生物学效果，实施例4和实施例5颗粒剂用量设计为与CN101322810B所载“疏清颗粒”用量相同，即用实施例4和实施例5颗粒剂代替CN101322810B所载“疏清颗粒”进行试验，并且平行地设置空白对照组或阳性对照组等组别；例如在CN101322810B说明书[0031 ]段第2行所载试药疏清颗粒组灌胃疏清颗粒5.4g/kg改为实施例4或实施例5所得5.4g/kg。
【主权项】
1.一种检测中药组合物的方法，所述中药组合物是由大青叶、石膏、桑叶、芦根、甘草以及任选的药用辅料制成，该方法包括使用高效液相色谱法测定所述中药组合物中靛玉红的含量。2.根据权利要求1的方法，其中所述高效液相色谱法参照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录36页“附录VID高效液相色谱法”所载方法测定，或者参照《中华人民共和国药典》2015年版四部第59页“0512高效液相色谱法”所载方法测定，并且该方法包括以下测定过程或测定项目: 色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以甲醇一乙睛一 0.4%磷酸溶液(体积比30?35: 30?35: 33)为流动相;检测波长为289nm;理论板数按靛玉红峰计算应不低于4000 ； 对照品溶液的制备:精密称取靛玉红对照品适量，加少量三氯甲烷溶解，再加甲醇制成每Iml约含10?20yg(例如15yg)的溶液，即得； 供试品溶液的制备:取所述中药组合物，研细，取1.5g，精密称定，置10ml锥形瓶中，加8 %盐酸溶液30ml，再加三氯甲烷30ml，加热回流提取I小时，冷却，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷提取2次，每次20ml，合并三氯甲烷液，60°C以下挥去溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至1ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勾，用微孔滤膜(例如0.22μπι或0.45μπι)滤过，取续滤液，即得； 测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，计算中药组合物中的靛玉红含量。3.根据权利要求1-2的方法，其特征在于: 还进一步包括将所述靛玉红含量折算为每570mg大青叶药材投料所得制剂中的靛玉红含量； 所述色谱柱例如是规格为250 X 4.6mm且填充剂粒径为5μπι的C18色谱柱;和/或 所述流动相中甲醇:乙睛:0.4 %磷酸溶液三者的体积比为33.5:33.5:33。4.根据权利要求1-3的方法，其特征在于: 制备所述中药组合物所用药材比例为:大青叶570g、石膏900-1000重量份、桑叶500-650重量份、芦根500-650重量份、甘草150-250重量份； 制备所述中药组合物所用药材比例为:大青叶570g、石膏950重量份、桑叶570重量份、芦根570重量份、甘草190重量份； 制备所述中药组合物所用药材比例为:大青叶570g、石膏1000重量份、桑叶650重量份、芦根500重量份、甘草150重量份;和/或 制备所述中药组合物所用药材比例为:大青叶570g、石膏900重量份、桑叶500重量份、芦根650重量份、甘草250重量份。5.根据权利要求1-4的方法，其特征在于: 所述中药组合物是通过将所述五味药材一起提取得到提取物制备得到的； 所述中药组合物是通过包括如下步骤的方法制备得到的:将大青叶、芦根、桑叶、甘草四味药材一起经渗漉法经浸渍、浓缩制得第一清膏;将渗漉法所得浸渣与石膏(其任选地预先加水煎煮)经煎煮、煎煮所得滤液浓缩制得第二清膏;将第一清膏和第二清膏混合，任选地添加药用辅料，制成中药组合物(例如中药制剂，例如颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液等)；和/或 所述中药组合物是通过包括如下步骤的方法制备得到的:取大青叶、芦根、桑叶、甘草，照流浸膏剂项下渗漉法(例如，参见《中华人民共和国药典》2015年版四部第29页“0189流浸膏剂与浸膏剂”)，加60?85%乙醇浸渍50-100小时，以80-120ml/分钟流速渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇，并浓缩至相对密度1.25?1.45(75°C)的清膏；再取石膏加水先煎煮10-30分钟后，加入渗漉法所得浸渣，继续煎煮30-60分钟，共煎煮1-3次，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.25?1.45(75°C)的清膏;合并两清膏，混合，任选地添加药用辅料，制成中药组合物(例如中药制剂，例如颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液等)。6.—种中药组合物，其是由大青叶、石膏、桑叶、芦根、甘草以及任选的药用辅料制成。7.根据权利要求6的中药组合物，其特征在于: 所述药材比例为:大青叶570g、石霄900-1000重量份、桑叶500-650重量份、芦根500-650重量份、甘草150-250重量份； 所述药材比例为:大青叶570g、石膏950重量份、桑叶570重量份、芦根570重量份、甘草190重量份； 所述药材比例为:大青叶570g、石膏1000重量份、桑叶650重量份、芦根500重量份、甘草150重量份;和/或 所述药材比例为:大青叶570g、石膏900重量份、桑叶500重量份、芦根650重量份、甘草250重量份。8.根据权利要求6-7的中药组合物，其特征在于: 其是通过将所述五味药材一起提取得到提取物制备得到的； 其是通过包括如下步骤的方法制备得到的:将大青叶、芦根、桑叶、甘草四味药材一起经渗漉法经浸渍、浓缩制得第一清膏;将渗漉法所得浸渣与石膏(其任选地预先加水煎煮)经煎煮、煎煮所得滤液浓缩制得第二清膏;将第一清膏和第二清膏混合，任选地添加药用辅料，制成中药组合物(例如中药制剂，例如颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液等);和/或 其是通过包括如下步骤的方法制备得到的:取大青叶、芦根、桑叶、甘草，照流浸膏剂项下渗漉法(例如，参见《中华人民共和国药典》2015年版四部第29页“0189流浸膏剂与浸膏剂”)，加60?85%乙醇浸渍50-100小时，以80-120ml/分钟流速渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇，并浓缩至相对密度1.25?1.45(75°C)的清膏;再取石膏加水先煎煮10-30分钟后，加入浸渣，继续煎煮30-60分钟，共煎煮1-3次，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.25?1.45(75 °C)的清膏;合并两清膏，混合，任选地添加药用辅料，制成中药组合物(例如中药制剂，例如颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液等)。9.权利要求6-8的任一项的中药组合物在制备用于治疗上呼吸道感染的药物中的用途。10.权利要求6-8的任一项的中药组合物在制备用于解热镇痛、抗病毒、抗感染的药物中的用途;或者，权利要求6-8的任一项的中药组合物在制备用于清热解毒、宣泄肺胃的药物中的用途;或者，权利要求6-8的任一项的中药组合物在制备用于小儿急性上呼吸道感染属风热证(例如，症见:发热、鼻塞、咽痛、流涕、口渴、咳嗽、汗出、舌红或苔薄黄)的药物中的用途。
【专利摘要】本发明涉及检测中药组合物疏清颗粒的方法。具体地说，本发明涉及一种检测中药组合物的方法，所述中药组合物是由大青叶、石膏、桑叶、芦根、甘草以及任选的药用辅料制成，该方法包括使用高效液相色谱法测定所述中药组合物中靛玉红的含量。
【IPC分类】A61K36/899, A61K33/06, A61P11/00, A61P31/00, A61P29/00, G01N30/02, A61P31/12
【公开号】CN105572262
【申请号】CN201610083866
【发明人】李兴惠
【申请人】李兴惠
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2016年2月10日