以内，所以供试品溶液在24小时内稳定。
[0255] 实施例13~15
[0256] 取二对甲苯磺酸缘生替尼原料药用甲醇:水= 70:30(V/v)配制待测溶液，用甲醇： 水= 70:30(v/v)配制二对甲苯磺酸缘生替尼的样品溶液为对照计算主成分含量。以本发明 提供的方法对各待测溶液进行检测，检测方法为：
[0257] 仪器:安捷伦高效液相色谱仪配备紫外检测器
[0258] 色谱柱：Waters Symmetry C18柱，250*4.6mm，5ym
[0259] 流动相：甲醇-0 · 01mol/L乙酸铵；时间：0-2〇43〇450min;
[0260] 甲醇：30-73-73-80 % 梯度洗脱
[0261] 检测波长：240nm
[0262] 流速：1.0mL/min
[0263] 进样量:10yL
[0264] 运行时间：25min
[0265] 实施例13~15的柱温条件及结果如表24所示：
[0266] 表24实施例13~15的柱温条件及结果
[0267]
[0268] 实施例16~18
[0269] 取二对甲苯磺酸缘生替尼原料药用甲醇:水= 70:30(V/v)配制待测溶液，用甲醇： 水= 70:30(v/v)配制二对甲苯磺酸缘生替尼的样品溶液为对照计算主成分含量。以本发明 提供的方法对各待测溶液进行检测，检测方法为：
[0270] 仪器:安捷伦高效液相色谱仪配备紫外检测器 [0271 ]色谱柱：Waters Symmetry C18柱，250*4.6mm，5ym
[0272] 流动相：甲醇-0 · 01mol/L乙酸铵；时间：0-2〇43〇450min;
[0273] 甲醇：30473473480% 梯度洗脱
[0274] 检测波长：240nm [0275]柱温：40°C
[0276] 进样量:10yL
[0277] 运行时间：25min
[0278] 实施例16~18的流速条件及结果如表25所示：
[0279] 表25实施例16~18的流速条件及结果
[0280]
[0281] 实施例19~21
[0282] 取二对甲苯磺酸缘生替尼原料药用甲醇:水= 70:30(V/v)配制待测溶液，用甲醇： 水= 70:30(v/v)配制二对甲苯磺酸缘生替尼的样品溶液为对照计算主成分含量。以本发明 提供的方法对各待测溶液进行检测，检测方法为：
[0283] 仪器:安捷伦高效液相色谱仪配备紫外检测器
[0284] 色谱柱：Waters Symmetry C18柱，250*4.6mm，5ym
[0285] 流动相：甲醇-乙酸铵；时间：〇420-3〇450min;
[0286] 甲醇：30-73-73-80 % 梯度洗脱
[0287] 检测波长：240nm [0288]柱温：40°C
[0289] 流速：1.0ml/min
[0290] 进样量:10yL
[0291] 运行时间：25min
[0292] 实施例19~21的乙酸铵浓度及结果如表26所示：
[0293] 表26实施例19~21的乙酸铵浓度及结果
[0294]
[0295] 实施例22~24
[0296] 取二对甲苯磺酸缘生替尼原料药用甲醇:水= 70:30(V/v)配制待测溶液，用甲醇： 水= 70:30(v/v)配制二对甲苯磺酸缘生替尼的样品溶液为对照计算主成分含量。以本发明 提供的方法对各待测溶液进行检测，检测方法为：
[0297] 仪器:安捷伦高效液相色谱仪配备紫外检测器
[0298] 色谱柱:Waters Symmetry C18柱，250*4.6mm，5ym
[0299] 流动相：甲醇-0 · 01mol/L乙酸铵;时间：0-2〇43〇450min;梯度洗脱流
[0300] 检测波长：240nm
[0301] 柱温：40 Γ
[0302] 流速：1.0ml/min
[0303] 进样量：10yL
[0304] 运行时间：25min
[0305] 实施例22~24的甲醇梯度及结果如表27所示：
[0306]表27实施例22~24的甲醇梯度及结果
[0307]
[0308] 实施例25~27
[0309] 取二对甲苯磺酸缘生替尼原料药用甲醇:水= 70:30(V/v)配制待测溶液，用甲醇： 水= 70:30(v/v)配制二对甲苯磺酸缘生替尼的样品溶液为对照计算主成分含量。以本发明 提供的方法对各待测溶液进行检测，检测方法为：
[0310] 仪器:安捷伦高效液相色谱仪配备紫外检测器
[0311] 色谱柱:Waters Symmetry C18柱，250*4.6mm，5ym
[0312] 流动相：甲醇-0 · 01mol/L乙酸铵；时间：0-2〇43〇450min;
[0313]甲醇：30473^73^80 % 梯度洗脱
[0314]柱温：4(TC [0315]流速：1.0ml/min [0316]进样量：l〇yL
[0317] 运行时间：25min
[0318] 实施例25~27的检测波长及结果如表28所示：
[0319]表28实施例25~27的检测波长及结果
[0320]
[0321] 实施例28~30
[0322] 取二对甲苯磺酸缘生替尼原料药用甲醇:水= 70:30(V/v)配制待测溶液，用甲醇： 水= 70:30(v/v)配制二对甲苯磺酸缘生替尼的样品溶液为对照计算主成分含量。以本发明 提供的方法对各待测溶液进行检测，检测方法为：
[0323] 仪器:安捷伦高效液相色谱仪配备紫外检测器
[0324] 流动相：甲醇-0.01mol/L乙酸铵；时间：0-2〇43〇450min;
[0325] 甲醇：30-73-73-80 % 梯度洗脱 [0326]柱温：40°C
[0327] 流速：1.0ml/min
[0328] 进样量：10yL
[0329] 运行时间：25min
[0330] 实施例28~30的色谱柱及结果如表29所示：
[0331] 表29实施例28~30的色谱柱梯度及结果
[0332]
[0333] 根据上述实施例，经分析:本发明提供的方法检测二对甲苯磺酸缘生替尼原料药 中有关物质效果如表30所示：
[0334] 表30有关物质检测效果
[0335]
[0336] 以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来 说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为 本发明的保护范围。
【主权项】
1. 二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质的检测方法，其特征在于，将二对甲苯磺 酸缘生替尼原料药溶解，以甲醇为流动相A，以乙酸铵的水溶液为流动相B，以高效液相色谱 检测获得色谱图，根据所述色谱图获得二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质的含量。2. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱的洗脱程序为:0~ 20min，甲醇体积分数由30% ±2%至73% ±2% ;20min~30min，甲醇体积分数为73% 土 2% ;30min~40min，甲醇体积分数由73% ±2%至80% ±2% ;40min~50min，甲醇体积分数 为 80%±2%。3. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述乙酸铵水溶液中乙酸铵的浓度为 0·005mol/L~0·015mol/L。4. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.9 m L / m i η~ 1·lmL/min〇5. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的柱温为35°C ~45。。。6. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的波长为 238nm~242nm。7. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的色谱柱为 Waters Symmetry C18柱。8. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述溶解的溶剂为体积分数为70 %的 甲醇水溶液。9. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的进样量为10 yL〇10. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述二对甲苯磺酸缘生替尼原料药 中有关物质的含量的获得采用外标法。
【专利摘要】本发明涉及分析化学技术领域，尤其涉及二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中个有关物质检测方法。该方法将二对甲苯磺酸缘生替尼原料药溶解，以甲醇为流动相A，以乙酸铵的水溶液为流动相B，以高效液相色谱检测获得色谱图，根据色谱图获得二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有关物质的含量。采用本发明提供的方法，二对甲苯磺酸缘生替尼与最近的未知杂质B的分离度为5.8，已知杂质A与未知杂质1的分离度为2.4。对杂质A、B、C的检出限为0.001％，对杂质A、B的定量限为0.005％，对杂质C的定量限是0.025％。6次测定的杂质峰数目一致，杂质之和的绝对偏差为0.02％，12次测定的杂质峰数目一致，杂质之和的绝对偏差为0.02％。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105606717
【申请号】CN201510769902
【发明人】萧伟, 仲艳, 李家春, 陈保来, 王志霞, 刘利, 黄文哲, 王振中
【申请人】江苏康缘药业股份有限公司
【公开日】2016年5月25日
【申请日】2015年11月11日