雷丸的人工栽培方法
【技术领域】
[0001]本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种雷丸的人工栽培方法。
【背景技术】
[0002]雷丸是白蘑科真菌雷丸(Omphalia lapidescens Schroet.)的干燥菌核，与茯等、猪苓并列为“三苓”。雷丸又称竹苓、雷实、雷矢、竹林子、朱铃芝、木莲子等，春、秋、冬皆可采收，但以秋季为多，选择枝叶枯黄的病竹，挖取根部菌核。其子实体的寿命很短，常见者为菌核。雷丸历来为野生，系统的人工栽培研究罕见报道，并且基于以下几点原因，导致雷丸人工栽培的现有技术不足以指导生产，①原种的制作使用大米作为培养基质，菌丝生长缓慢，且不容易观察菌丝生长情况及污染情况栽培种采用椴木肩与麦麸的比例为3:1，菌丝最高生长速度仅为1.8mm/d，生长速度过慢直接使用栽培种诱导形成菌核较慢，产量极低雷丸种源稀少，使用新鲜的小雷丸作为种源进行栽培，不利于扩大规模，且对木质原料需求量大，影响生态环境。
【发明内容】
[0003]有鉴于此，本发明的目的在于提供一种雷丸的人工栽培方法，本发明所述方法解决了原种培养过程中菌丝生长缓慢的问题，提高了雷丸人工种植产量，降低了生产成本，有利于雷丸人工栽培的推广。
[0004]本发明采取的技术方案具体如下:
[0005]1、雷丸的人工栽培方法，包括如下步骤:
[0006](I)原种制备
[0007]a.原种基质制备:将玉米粒水煮，过滤，按玉米粒的质量百分比计，加入I?3%的石膏，0.05?0.2%的MgSOjP 0.1?0.3%的KH2P04，搅拌混匀，装入原种瓶中于121?126。。，103 ?115kPa 灭菌 1.5h，冷却；
[0008]b.接种:从母种试管中挑取雷丸菌种接入原种瓶内；
[0009]c.培养:将接种后的原种瓶于22?25°C条件下避光培养至雷丸菌丝长满原种瓶；
[0010]⑵栽培种制备
[0011]a.培养料制备:取柞木肩，按柞木肩重量百分比计，加入2?10%的麦麸、2?10%的玉米粉、0.5?2%的豆柏，I %的石膏，0.2%的KH2PO4^P 0.1 %的MgSO 4，混匀后加水至培养料中含水质量分数达60?80%，拌匀；
[0012]b.装袋:按300g/袋计，将拌匀后的培养料装入料袋中；
[0013]c.灭菌:将料袋置于103-115kPa下121?126°C灭菌1.5h，或常压下100?105°C灭菌10?12h ；
[0014]d.接种:从原种瓶中取2g雷丸囷种转入料袋内；
[0015]e.培养:将接种后的料袋于22?25°C条件下避光培养至雷丸菌丝长满料袋；
[0016](3)室内或室外覆土栽培
[0017]室内覆土栽培步骤为:对培养室消毒后，地上铺以5?6cm厚砂土，然后铺盖玉米杆或芭茅杆，将培养好的栽培种保持原样取出，每平方米均匀排放8包栽培种，再将玉米杆或芭茅杆盖于其上，最后覆盖5?7cm厚的砂土，浇水，培养；
[0018]室外覆土栽培步骤为:首先进行消毒，然后铺盖玉米杆或者芭茅杆，将培养好的栽培种保持原样取出，每平方米均匀排放8包栽培种，然后将玉米杆或芭茅杆盖于其上，最后覆盖5?7cm厚的砂土，饶水，培养。
[0019]优选的，所述步骤⑴中原种基质制备中，按玉米粒的质量百分比计，加入1.5?
2.5%的石膏，0.1 ?0.15%的 MgSOjP 0.2 ?0.25%的 KH2PO40
[0020]优选的，所述步骤⑴中原种基质制备中，按玉米粒的质量百分比计，加入2%的石膏，0.1 % 的 MgSOjP 0.2% 的 KH 2P04o
[0021]优选的，所述步骤(2)中培养料制备中，按柞木肩重量百分比计，加入4?8%的麦麸、2?5%的玉米粉、I?1.5%的豆柏、I %的石膏、0.2%的KH2PO4和0.1%的MgS04。
[0022]优选的，所述步骤(2)中培养料制备中，按柞木肩重量百分比计，加入6%的麦麸、5 %的玉米粉、I %的豆柏、I %的石膏，0.2 %的KH2PO4和0.1 %的MgSO 4。
[0023]优选的，所述步骤⑵培养料制备中培养料含水量为68?72%。
[0024]优选的，所述步骤(3)中室内栽培时土壤使用含水量40?60%的粗颗粒河沙，室外培养时选择山坡下背阴且疏松透气的土壤作为栽培地。
[0025]优选的，所述步骤(3)中铺盖的玉米杆或芭茅杆长度为7_8cm。
[0026]优选的，所述步骤(3)中培养时通过浇水保持玉米杆或芭茅杆和砂土湿度在40?60%之间，温度在24?26°C之间。
[0027]本发明所用母种通过采集野生雷丸菌核经常规菌种培养方法获得。
[0028]本发明优选在每年3月份种植，7月份和11月份收获两次。
[0029]本发明的有益效果在于:(1)本发明采用玉米为主要原料制备雷丸原种，解决原种培养过程中菌丝生长缓慢的问题，且不易污染，易观察菌丝生长情况。(2)本发明以柞木肩为主料，豆柏、麦麸、玉米粉为辅料，KH2PO4、石膏等为矿质元素作为栽培种，使雷丸菌丝生长速度加快，大大缩短了生产周期，降低了生产成本。(3)本发明所用的栽培材料为玉米杆和芭茅杆，均廉价、易得，成本低，减少了对木质原料的需求，对森林和生态环境不会产生破坏作用，对生态环境保护具有一定意义。(4)本发明采用雷丸袋料菌种作为人工种植的菌种源，使用覆土栽培的方式获得雷丸菌核，操作简便易行，且产量高，大大降低了劳动力成本，提高雷丸生产的经济效益。
【附图说明】
[0030]为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图:
[0031]图1大米原种培养基和玉米原种培养基培养效果对比图，其中A图为大米原种培养基培养，B图为玉米原种培养基培养；
[0032]图2栽培种培养基雷丸菌种培养效果，其中A图为实施例1中雷丸栽培种的培养，B图为实施例2中雷丸栽培种的培养；
[0033]图3室内覆土栽培图片；
[0034]图4用芭茅杆生产的雷丸图片；
[0035]图5收获的雷丸图片。
【具体实施方式】
[0036]下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。
[0037]实施例1
[0038](一)原种制备
[0039]a.原种基质制备
[0040]选择无霉烂无虫蛀的玉米粒加水煮至胚乳存一线白心，过滤，按玉米粒的质量百分比计，加入2 %的石膏，0.1 %的MgSO4,0.2 %的KH2PO4,搅拌混匀，装入650mL原种瓶中，121 °C、103-115kPa下灭菌1.5h，冷却至室温即得。
[0041 ] b.接种
[0042]接种需在洁净台上操作。接种前，接种室应进行紫外灯灭菌，先用75%酒精对双手及接种针消毒，接种针、试管口及棉塞都需用酒精灯火焰进行灭菌。选择生长旺盛、菌龄较短、菌丝层尚未出现色素分泌物的菌种进行接种，用接种针在母种试管中勾取Icm2大小的菌块转入原种瓶内。
[0043]c.培养
[0044]将接种后的原种瓶转移到避光的培养室于22?25°C温度条件下培养至雷丸菌丝长满原种瓶后即可。
[0045](二)栽培种制备
[0046]a.称料:称取主料柞木肩，然后按柞木肩重量百分比计称取下列辅料:8%的麦麸，5 %的玉米粉，I %的豆柏，I %的石膏，0.2 %的KH2PO4,0.1 %的MgS04。
[0047]b.拌料:将各料混匀后加入水至培养料中含水量达60 %，拌匀。
[0048]c.装袋:将拌匀后的培养料按300g/袋装入12cmX25cm的聚丙烯折角袋中，边装边压，至紧实，松紧需均匀，最后在菌袋口部套上套环支撑，并盖上无棉盖。
[0049]d.灭菌:将料袋置于103-115kPa、121_126°C灭菌1.5小时，灭菌后自然冷却至室温。
[0050]e.接种:于超净工作台或经杀菌后的接种箱内接种，接种前用75%消毒酒精擦拭手、枪镊，再将枪镊置于酒精灯火焰上灼烧，冷却后从原种瓶里取雷丸菌种2g转入料袋内。
[0051]f.培养:将接种后的料袋转移到避光的培养室于22?25°C温度条件下培养至