复合微生物菌群及其酶产物和在修复土壤中的应用方法_2

文档序号:8959349阅读:来源:国知局
5 %、胶冻样芽孢杆菌的活菌数为总活菌数的15 %、粉状毕赤酵母的活菌数为总活菌数 的10 %、解淀粉芽孢杆菌的活菌数为总活菌数的10 %、戊糖片球菌的活菌数为总活菌数的 15%、乳酸片球菌的活菌数为总活菌数的15% ;
[0024] 以草炭土、娃藻土、玉米粉、淀粉、凹凸棒粘土按照重量比2:3:2:2:1混合均勾,制 得微生物菌剂载体;
[0025] Q3 :以植酸酶:蛋白质水解酶:纤维素水解酶:脲酶按照重量比4 :1 :3 :2混合均 匀,加入Q2步骤得到的微生物菌剂载体和发酵混合液,混合时保持总含水量为70 %、30°C 静置培养3天,35°C通风自然干燥得到复合微生物菌酶体系粉剂。
[0026] 作为上述技术方案的优选,复合微生物菌群及其酶产物的粉剂在修复土壤中的应 用方法,其特征在于,方法步骤如下:
[0027] Ql :将复合微生物菌酶体系粉剂兑入温水中静置以激活药剂,时间为12-24小时;
[0028] Q2 :将激活后的粉剂水溶液分成3部分,一部分均匀喷淋到土表;整地,将施肥土 层翻入地表以下,以保护菌剂不受过度光照影响;
[0029] Q3 :在定植当天,将第2部分的激活后的粉剂水溶液均匀喷淋到土表;整地,将施 肥土层翻入地表以下,以保护菌剂不受过度光照影响;
[0030] Q4 :定植后第4天、第27天,施用稀释200倍的复合微生物菌酶体系粉剂的水溶 液;
[0031] Q4 :在定植后29天,将第3部分的激活后的粉剂水溶液由植株茎杆下端地膜开口 处施入。
[0032] 本发明实施例提供的复合微生物菌群及其酶产物和在修复土壤中的应用方法,与 现有技术相比,可以通过建立有益菌群、构建微生态环境来实现生物催化,提高土壤有机质 含量以及有益微生物菌群,进而来提高土壤肥力。可以显著加快土壤污染物的生物化学降 解速率,可以加速污染物的消解和生物降解,至最终惰性产物,如二氧化碳、水、氮气等;并 可以快速去除在生物化学降解过程中产生的有毒中间体,除臭及减少有机挥发物(VOC)的 释放。
[0033] 本发明的有益效果:
[0034] (1)本发明所开发的复合微生物菌群及其酶产物为多种微生物菌肥的开发提供基 础,为多样化菌肥生产提供了可能。
[0035] (2)本发明所开发的复合微生物菌群及其酶产物具有多重效果,可为作物提供多 重防护,可减少农用化学品的施用量。
[0036] (3)本发明所开发的复合微生物菌群及其酶产物为100%纯天然有机制剂,对人 体无害,不污染环境,可以解决农用人工化学品污染带来的环境问题。
[0037] 本发明所述的复合微生物菌群及其酶产物施入土壤后可以定植存活,修复土壤环 境,对促进作物生长具有积极的作用。
【附图说明】
[0038] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本 发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可 以根据这些附图获得其他的附图。
[0039] 图1为本发明实施例的复合微生物菌群及其酶产物和在修复土壤中的应用的不 同浓度的复合微生物菌群及其酶产物对农药的降解效果示意图。
[0040] 图2为本发明实施例2的复合微生物菌群及其酶产物制成菌肥后修复土壤中对 2,4_D的降解效果图。
【具体实施方式】
[0041] 下面对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本 发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在 没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
[0042] 在本发明的一个实施例中,所述枯草芽孢杆菌、所述胶冻样芽孢杆菌、所述粉状毕 赤酵母、所述解淀粉芽孢杆、所述戊糖片球菌和所述乳酸片球菌可以以活细胞的发酵液、被 培养的活细胞、细胞培养物的滤液或细胞与滤液的混合物的形式存在。
[0043] 枯草芽孢杆菌具体可选取普通菌种,也可选取中国普通微生物保藏管理中心 的保藏菌种等,例如编号为CGMCC No. 1.1630的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis); 胶冻样芽孢杆菌具体可为编号为CGMCC No. 1. 232的胶冻样芽孢杆菌(Bacillus 11111(^1&8111〇81^);解淀粉芽孢杆菌具体可为编号为061〇:如.8341的解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus amyloliquefacicns);戊糖片球菌具体可为编号为CGMCC No. 7049的戊糖片球 菌(Pediococcus pentosaceus);乳酸片球菌具体可为编号为CGMCC No. 9441的乳酸片球 菌(Pediococcus acidilactici);粉状毕赤酵母具体可为编号为CGMCC No. 4008的粉状毕 赤酉孝母(Pichia farinosa) 〇
[0044] cfu为菌落形成单位。
[0045] 实施例1复合微生物菌群及其酶产物的粉剂的制备
[0046] 1、菌的活化与扩大培养
[0047] 活化:将枯草芽孢杆菌接种在1号培养基上,置于28°C培养箱培养5天,得到活化 的枯草芽孢杆菌;1号培养基为玉米琼脂培养基;例如中国普通微生物菌种保藏管理中心 (简称CGMCC)的培养基编号为2006的玉米琼脂培养基;
[0048] 将胶冻样芽孢杆菌接种在2号培养基上,置于28°C培养箱培养5天,得到活化的胶 冻样芽孢杆菌;2号培养基为阿氏无氮培养基,例如中国普通微生物菌种保藏管理中心(简 称CGMCC)的培养基编号为0073的阿氏无氮培养基;
[0049] 将粉状毕赤酵母接种在3号培养基上,置于28°C培养箱培养5天,得到活化的粉状 毕赤酵母;3号培养基为LB培养基,例如中国普通微生物菌种保藏管理中心(简称CGMCC) 的培养基编号为0033的LB培养基;
[0050] 将解淀粉芽孢杆菌接种在1号培养基上,置于28°C培养箱培养5天,得到活化的解 淀粉芽孢杆菌;1号培养基为玉米琼脂培养基,例如中国普通微生物菌种保藏管理中心(简 称CGMCC)的培养基编号为2006的玉米琼脂培养基;
[0051 ] 将戊糖片球菌接种在4号培养基上,置于28°C培养箱培养5天,得到活化的戊糖片 球菌;将乳酸片球菌接种在4号培养基上,置于28°C培养箱培养5天,得到活化的乳酸片球 菌。4号培养基为MRS培养基,例如中国普通微生物菌种保藏管理中心(简称CGMCC)的培 养基编号为0006的MRS培养基。
[0052] 扩大培养:将上述活化的枯草芽孢杆菌、活化的胶冻样芽孢杆菌、活化的粉状毕 赤酵母、活化的解淀粉芽孢杆菌、活化的戊糖片球菌、活化的乳酸片球菌分别接入6个装 有相对应培养基的发酵罐,均在28°C进行静止逐级扩大培养,扩大培养过程中接种量为 5%-10% (体积百分比含量),分别得到枯草芽孢杆菌发酵液(IX 10scfu/g)、胶冻样芽 孢杆菌的发酵液(lX10scfu/g)、粉状毕赤酵母的发酵液(lX10scfU/g)、解淀粉芽孢杆 菌的发酵液(I X l〇scfu/g)、戊糖片球菌的发酵液(I X 10
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