具有人源化的增殖诱导配体基因的非人动物的制作方法

文档序号:13215595阅读:来源:国知局
技术特征:
1.一种表达April多肽的非人动物,所述April多肽包含连接至非人April蛋白的细胞内部分的人APRIL蛋白的细胞外部分。2.权利要求1的非人动物,其中所述人APRIL蛋白的细胞外部分由人APRIL基因的外显子2至6编码。3.权利要求2的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少50%的同一性。4.权利要求2的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少60%的同一性。5.权利要求2的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少70%的同一性。6.权利要求2的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少80%的同一性。7.权利要求2的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少90%的同一性。8.权利要求2的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6相同。9.前述权利要求的任一项的非人动物,其中所述非人动物不以可检测方式表达全长内源April蛋白。10.前述权利要求的任一项的非人动物,其中所述April多肽从内源April基因座上的人源化April基因表达。11.权利要求10的非人动物,其中所述人源化April基因包含非人April外显子1。12.权利要求11的非人动物,其中所述人源化April基因还包含完整或部分的非人April外显子6。13.一种包含人源化April基因的非人动物,所述人源化April基因包含可操作地连接至APRIL启动子的人APRIL基因的一个或多个外显子。14.权利要求13的非人动物,其中所述APRIL启动子为非人April启动子。15.权利要求13的非人动物,其中所述APRIL启动子为人APRIL启动子。16.权利要求13-15的任一项的非人动物,其中所述人源化April基因包含人APRIL基因的外显子2至6。17.权利要求16的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少50%的同一性。18.权利要求16的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少60%的同一性。19.权利要求16的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少70%的同一性。20.权利要求16的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少80%的同一性。21.权利要求16的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少90%的同一性。22.权利要求16的非人动物,其中所述人APRIL基因的外显子2至6与表3中所示的人APRIL基因的外显子2至6相同。23.权利要求13-22的任一项的非人动物,其中所述人源化April基因包含非人April外显子1。24.权利要求23的非人动物,其中所述人源化April基因还包含完整的或部分的非人April外显子6。25.前述权利要求的任一项的非人动物,其中所述非人动物为啮齿动物。26.一种人源化April基因,其包含可操作地连接至人APRIL基因的一个或多个外显子的非人April基因的一个或多个外显子。27.权利要求26的人源化April基因,其中所述人源化APRIL基因包含可操作地连接至人APRIL外显子2至6的非人April外显子1。28.权利要求27的人源化April基因,其中所述人源化APRIL基因还包含侧翼连接所述非人April外显子1和所述人APRIL外显子6的5’和3’非人非翻译区。29.一种April多肽,其由权利要求26-28的任一项的人源化April基因编码。30.一种分离的细胞或组织,其是权利要求1-25的任一项的非人动物的分离的细胞或组织。31.一种分离的细胞,其包含权利要求26-28的任一项的人源化April基因。32.一种小鼠胚胎干细胞,其包含权利要求26-28的任一项的人源化April基因。33.一种小鼠胚胎干细胞,其基因组包含编码连接至非人April蛋白的细胞内部分的人APRIL蛋白的细胞外部分的人源化April基因。34.权利要求33的ES细胞,其中所述人源化April基因包含人APRIL基因的外显子2至6。35.权利要求32、33或34的小鼠ES细胞用于产生小鼠的用途。36.一种小鼠胚胎,其产生自从权利要求32、33或34的胚胎干细胞。37.一种产生从内源April基因座表达April蛋白的非人动物的方法,其中所述April蛋白包含人序列,所述方法包括以下步骤:(a)用包含编码完整或部分的人APRIL蛋白的人核苷酸序列的基因组片段靶向非人ES细胞中的内源April基因座上的内源April基因;(b)获得在内源April基因座上包含含有(a)的人序列的人源化April基因的经修饰的非人ES细胞;和(c)使用(b)的经修饰的ES细胞产生非人动物。38.权利要求37的方法,其中所述人核苷酸序列包含人APRIL基因的外显子2至6。39.权利要求37的方法,其中所述人核苷酸序列编码人APRIL蛋白的氨基酸残基87至250。40.权利要求37-39的任一项的方法,其中所述非人动物为小鼠或大鼠。41.一种小鼠或大鼠,其可从权利要求37-40的任一项的方法获得。42.一种提供小鼠的方法,所述小鼠的基因组包含编码连接至小鼠April蛋白的细胞内部分的人APRIL蛋白的细胞外部分的人源化April基因,所述方法包括:修饰小鼠的基因组,以使得其含有编码连接至小鼠April蛋白的细胞内部分的人APRIL蛋白的细胞外部分的人源化April基因,由此提供所述小鼠。43.权利要求42的方法,其中所述人源化April基因包含人APRIL基因的外显子2至6。44.一种将人细胞移植入小鼠的方法,所述方法包括以下步骤:(a)提供其基因组包含编码连接至小鼠April蛋白的细胞内部分的人APRIL蛋白的细胞外部分的人源化April基因的小鼠;和(b)将一个或多个人细胞移植入所述小鼠。45.权利要求44的方法,其还包括以下步骤:(c)测定所述小鼠中的一个或多个人细胞的植入。46.权利要求45的方法,其中测定的步骤包括:将所述一个或多个人细胞的植入与在一个或多个野生型小鼠中或在一个或多个其基因组不包含编码连接至小鼠April蛋白的细胞内部分的人APRIL蛋白的细胞外部分的人源化April基因的小鼠中的植入进行比较。47.权利要求44-46的任一项的方法,其中所述人源化April基因包含人APRIL基因的外显子2至6。48.权利要求44-46的任一项的方法,其中所述人APRIL蛋白的细胞外部分包含对应于表3中所示的人APRIL蛋白的残基87至250的氨基酸。49.权利要求44-48的任一项的方法,其中所述人细胞是造血干细胞。50.权利要求44-49的任一项的方法,其中静脉内移植所述人细胞。51.权利要求44-49的任一项的方法,其中腹膜内移植所述人细胞。52.权利要求44-49的任一项的方法,其中皮下移植所述人细胞。
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