PRRSV感染诱导的小鼠体内氧化胁迫模型的建立方法与流程

文档序号:12084835阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种PRRSV诱导的小鼠体内氧化胁迫模型的建立方法,其特征在于:采用PRRSV通过口服灌胃、滴鼻、腹腔注射三种途径联合接种小鼠,病毒浓度为TCID50是10-5.5/0.1mL的PRRSV病毒原液的100-10-1

2.根据权利要求1所述的PRRSV诱导的小鼠体内氧化胁迫模型的建立方法,其特征在于:所述接种时间为第1、2、3天,其接种剂量为0.2-0.5mL,处理时间为7-21天。

3.根据权利要求1所述的PRRSV诱导的小鼠体内氧化胁迫模型的建立方法,其特征在于包括以下步骤:

(1)将试验用昆明小鼠随机分成3组,即空白对照组、低稀释度病毒液组和高稀释度病毒液组,每组6只;将PRRSV病毒液用RPMI 1640培养液作10倍稀释,作为低稀释度病毒液组的浓度,高稀释度病毒液组用病毒原液进行接种,空白对照组选用等量的无菌RPMI 1640培养液进行接种;每天观察小鼠状况,分别于处理后7、14、21天解剖两只小鼠,检测病毒核酸;

(2)将试验用昆明小鼠随机分成2组,即空白对照组和病毒处理组,每组30只;将PRRSV病毒液用RPMI 1640培养液按(1)的实验结果进行稀释,作为病毒处理组的接种浓度,空白对照组选用等量的无菌RPMI 1640培养液进行处理;每天观察小鼠状况,分别在处理第7、14、21天后,解剖20只小鼠,每组10只,无菌分离小鼠脾脏及朐腺,称重并计算小鼠免疫器官指数;将脾脏放入加有PBS缓冲液,并贴有标签的EP管内,无菌分离小鼠脾淋巴细胞备用,用于测定表征氧化胁迫模型的相关指标。

4.根据权利要求3所述的PRRSV诱导的小鼠体内氧化胁迫模型的建立方法,其特征在于:所述昆明小鼠为SPF级。

5.根据权利要求3所述的PRRSV诱导的小鼠体内氧化胁迫模型的建立方法,其特征在于:所述理化指标包括NO、ROS、GSH、GSSG、XOD、MPO和iNOS等指标。

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