本发明属于农药技术领域，具体涉及一种防治梨黑斑病的杀菌组合物及其制备方法。
背景技术：
梨属于蔷薇科（Rosaceae）梨亚科(Maloideae)梨属(Pyrus)植物，为乔木落叶果树。我国是梨的起源地之一，具有丰富的梨种质资源。许多品种比如鸭梨、梨梨等以其优质而闻名国内外。梨黑斑病(Pearblackspot)，又名裂果病，由菊池链格孢Alternariaki kuchiana Tanaka引起，是梨树重要的病害之一。该病主要侵染果实，引起裂果和早期落果，直接影响梨果的产量和品质;也侵染叶片和新梢，削弱树势，严重时可以引起早期落叶和嫩梢枯死。中国主要产梨区普遍发生梨黑斑病，其中西洋梨、日本梨、雪花梨最易感病。
由于每一个病原菌能产生独特的寄主专化性毒素，因而不同的病原菌有不同的寄主范围，梨黑斑病主要危害果实、叶片和新梢。1）叶片病症表现为：幼嫩的叶片一般最早发病，开始先出现针头大、圆形黑色斑点，后斑点逐渐扩大或呈近圆形、不规则形，中心灰白色，边缘黑褐色，叶片如有多个病斑常愈合成不规则形状大斑，潮湿时，病斑表面产生黑斑，叶片畸形，严重时引起早期落叶。2）果实病症表现为：幼果受害，先在果面上产生一个至数个黑色圆形针头状斑点，随后逐渐扩大，呈圆形或椭圆形，病部略凹陷，其上有黑霉，由于病健部发育不均匀，果面常发生龟裂，有时裂口纵横交错或呈“丁”字形，在裂隙内会产生很多黑霉，病果早期掉落。成熟果受害，早期症状与幼果相似，但病斑较大，黑褐色在重病果上常数个病斑合并成大病斑，甚至使全果变成为漆黑色表面密生墨绿色至黑色的霉，随后果实软化、腐烂脱落。3）新梢病症表现为：病斑早期黑色、椭圆形，稍凹陷，后扩大为长椭圆形，凹陷更明显，淡褐色，病部与健部分界处常产生裂缝。
目前生产上对梨黑斑病的防治以化学防治、生物防治、抗病育种为主。抗病品种选育，首先要广泛搜集抗病种质资源，工作量大、耗时长。化学药剂防治梨黑斑病，一般采用石硫合剂、多菌灵、甲基托布津等，这些杀菌剂已经使用十几年甚至几十年，有些药剂的施用量已经达到最初用量的数倍，病菌抗药性问题日趋严重，同时生产中过量使用化学农药导致的环境污染也日益严重。生物防治对人畜安全、环境兼容性好、病菌不易产生抗药性，因而日益引起人们的重视，但是生物防治也存在一些不足，如田间防治效果不稳定、田间药效作用缓慢、杀菌谱较窄等。
申请号为201010567241.6的专利公开了一种高效防治金秋梨主要病虫 害 (梨木虱、梨黄粉蚜、梨二叉蚜、吸果夜蛾、梨黑斑病）的植物源农药，主要是由银杏叶，油桐的茎叶，夹竹桃叶，侧柏叶，马尾松叶，山仓子果，油茶 茶枯饼，万寿菊根，砂地柏叶经提取加工而成。所述植物源农药能高效预防和防治梨木虱、梨黄粉蚜、梨二叉蚜、吸果夜蛾等金秋梨的主要虫 害，同时能有效抑制金秋梨的梨黑斑病病原菌的生长。申请号为201610068804.4的专利公开了一种芽孢杆菌新菌株及其发酵产物的制备方法和发酵产物在防治梨黑斑病中的应用，其中，芽孢杆菌(Bacilus amyloliquefaciens) 新菌株ZG2的保藏号为CGMCC No.11868。该发明的发酵产物可以有效防治梨斑病，防治机会多，生防效果好，在梨果采收前防治，防治效果可达90%以上；在梨果采收后立即防治，防治效果可达82%以上；在梨果预冷后防治，防治效果可达65%以上；如果将不同时期结合防治，效果更好。上述公开技术给了我们防治梨黑斑病更好的思路，例如：开发植物源农药；研究新菌种等。但是目前植物源农药的开发较化学农药来说依然缓慢，用药限制因素很多，包括部分植物源农药的活性不高，用药量大，击倒力不强，药效发挥较慢，不利于突发的流行性病虫害的防控；其活性成分的种类、含量受自身遗传因子、外界环境条件如土壤、温度、光照、土壤值的影响，会有地域性和季节性等变化；并且活性成分在植物不同部分含量亦不同，特别是有些活性成分对光和热不稳定等等。而新菌种的研发到扩大应用都需要大量费用的投入，且推广难度大，由于其是新发现的微生物，对环境的适应性及潜在影响等难以进行准确预估。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明所要解决的技术问题是提供一种杀菌组合物，将植物源农药与生物菌剂进行有效组合，用于防治梨黑斑病的发生，防治效果好，药效稳定，安全环保。
为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：
一种防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活10~30份、蛇床子10~30份、苦豆子10~30份、金雀花10~30份、华细辛5~20份、叶子花5~20份、牛黄5~20份、五味子5~15份、侧柏叶3~12份、罗布麻3~12份、一枝黄花3~12份、三白草1~10份、生物菌剂1~5份，所述生物菌剂由质量百分比为50~70%枯草芽孢杆菌和30~50%球孢白僵菌组成。
优选地，所述生物菌剂由质量百分比为60%枯草芽孢杆菌和40%球孢白僵菌组成。
优选地，所述防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活15份、蛇床子15份、苦豆子15份、金雀花15份、华细辛10份、叶子花10份、牛黄10份、五味子10份、侧柏叶7份、罗布麻7份、一枝黄花7份、三白草5份、生物菌剂3份。
优选地，所述防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活22份、蛇床子25份、苦豆子25份、金雀花22份、华细辛12份、叶子花12份、牛黄12份、五味子10份、侧柏叶7份、罗布麻8份、一枝黄花9份、三白草8份、生物菌剂3份。
一种防治梨黑斑病的杀菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
1）分别称取重量份的独活10~30份、蛇床子10~30份，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅰ；分别称取重量份的苦豆子10~30份、金雀花10~30份、叶子花5~20份、牛黄5~20份、罗布麻3~12份、一枝黄花3~12份和三白草1~10份，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅱ；分别称取重量份的华细辛5~20份、五味子5~15份和侧柏叶3~12份，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅲ；
2）将所述粉碎物料Ⅰ加入到超临界CO2萃取釜中，乙醇为夹带剂进行萃取，将萃取物进行冷冻离心，除去杂质，真空干燥，得到提取物Ⅰ；
3）在所述粉碎物料Ⅱ中加入其重量4~6倍的水，浸泡15~20分钟，启动超声波发生器，加热至60~70℃，保持45~60分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅰ和药渣；待滤液Ⅰ自然冷却后，将所述滤液Ⅰ浓缩至75℃时相对密度为1.12~1.15的浸膏，在所述浸膏中加入体积分数为75~80%的乙醇溶液，温度25~30℃，保持18~24小时，然后过滤，得到滤液Ⅱ和沉淀物，将所述滤液Ⅱ减压浓缩至55℃时相对密度为1.20~1.25的膏体；
4）在所述粉碎物料Ⅲ中加入其重量3~5倍的水，加入蒸馏烧瓶中，进行蒸馏，控制蒸馏速度为每秒回流滴出溶液2~3滴，蒸馏时间为40~60分钟，蒸馏提取2~3次，将提取液合并用有机溶剂进行萃取，去下层溶液，真空旋蒸仪蒸出有机溶剂，即得蒸馏产物蒸馏产物；
5）将所述提取物Ⅰ、膏体和蒸馏产物分别干燥，粉碎，合并，得到提取物组合；
6）将所述提取物组合与1~5重量份的生物菌剂拌合均匀，即得。
优选地，步骤2）中所述萃取的压力为30~50MPa，萃取温度为40~60℃，CO2流体流量为30~50L/h，萃取时间为2~5h。
优选地，步骤2）中所述乙醇的体积分数为90~95%，加入量为400~600ml。
优选地，步骤3）中所述浸膏与所述乙醇溶液的重量体积比1g：10~20ml。
优选地，步骤4）中所述有机溶剂为二氯甲烷或氯仿。
本发明与现有技术相比，其有益效果如下：
1）本发明提供了一种防治梨黑斑病的杀菌组合物，申请人在遵循梨生长规律的基础之上，对植物源农药和生物菌剂协同防治黑斑病进行探索和研究，发现独活、蛇床子、苦豆子、金雀花、华细辛、叶子花、牛黄、五味子、侧柏叶、罗布麻、一枝黄花和三白草经科学配合后，与生物菌剂协同能够高效防治梨黑斑病，防治效果可以达到97%以上，且药效稳定，持续时间长；同时能够提高梨的产量，提高梨树的抗逆能力，对梨黑星病、梨锈病、梨木虱等也有良好的防治效果，整体上降低梨树患病几率。
2）本发明所用原料均为天然、环保，长期使用对环境无危害。独活，为伞形科植物重齿毛当归的干燥根，辛、苦，微温，祛风除湿，通痹止痛。苦豆子，为豆科槐属植物苦豆子，以种子入药，味极苦、性寒有毒，具有清热解毒，抗菌消炎、止痛杀虫等作用。金雀花，为豆科植物锦鸡儿的花，以花入药，性平，滋阴，和血，健脾。华细辛，为马兜铃科植物华细辛的全草，具有祛风散寒，通窍止痛，温肺化饮的功效。叶子花，为紫茉莉科植物光叶子花的花，苦；涩；性温，活血调经；化温止带。牛黄，为牛科动物牛干燥的胆结石，具有清心，豁痰，开窍，凉肝，息风，解毒等功效。五味子，为五味子科植物华中五味子的果实，以色红、粒大、肉厚、有油性及光泽者为佳。侧柏叶，为柏科植物侧柏的干燥枝梢和叶，凉血止血，化痰止咳，生发乌发。罗布麻，为夹竹桃科植物罗布麻的叶，甘；微苦；性凉，清热平肝；利水消肿。一枝黄花，为菊科植物一枝黄花，以全草入药，辛、苦，平；有小毒，疏风清热，解毒消肿。三白草，又称塘边藕，为三白草科植物三白草，以叶入药，性味甘，辛，寒，清热解毒，利尿消肿。枯草芽孢杆菌，具有抑制病菌生长，促进作物生长，改善土壤团粒结构等多种有益效果；球孢白僵菌具有促进作物营养吸收，增强作物抗病害能力等多种功效。上述原料经科学复配之后，相互补益，对梨树整个生长周期发生的病虫害，尤其是梨黑斑病，具有显著的防治效果，成分被作物吸收后可增产增收，且对非靶标对象没有任何危害。
具体实施方式
为了更好地理解本发明，下面结合实施例进一步清楚阐述本发明的内容，但本发明的保护内容不仅仅局限于下面的实施例。在下文的描述中，给出了大量具体的细节以便提供对本发明更为彻底的理解。然而，对于本领域技术人员来说显而易见的是，本发明可以无需一个或多个这些细节而得以实施。
实施例1：一种防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活15份、蛇床子15份、苦豆子15份、金雀花15份、华细辛10份、叶子花10份、牛黄10份、五味子10份、侧柏叶7份、罗布麻7份、一枝黄花7份、三白草5份、生物菌剂3份，所述生物菌剂由质量百分比为60%枯草芽孢杆菌和40%球孢白僵菌组成。
枯草芽孢杆菌，Bacillus subtilis，有效活菌数≥200亿个/g。球孢白僵菌，Beauveria bassiana，有效活菌数≥200亿cfu/g。本发明所用菌剂或菌种均可为市场购买获得，菌剂剂型为粉剂。
生物菌剂在使用时直接进行均匀混合，即可使用。
本实施例防治梨黑斑病的杀菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
1）分别称取上述重量份的独活、蛇床子，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅰ；分别称取上述重量份的苦豆子、金雀花、叶子花、牛黄、罗布麻、一枝黄花和三白草，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅱ；分别称取重量份的华细辛、五味子和侧柏叶，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅲ；
2）将所述粉碎物料Ⅰ加入到超临界CO2萃取釜中，乙醇为夹带剂进行萃取，将萃取物进行冷冻离心，除去杂质，真空干燥，得到提取物Ⅰ；
3）在所述粉碎物料Ⅱ中加入其重量5倍的水，浸泡18分钟，启动超声波发生器，加热至65℃，保持55分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅰ和药渣；待滤液Ⅰ自然冷却后，将所述滤液Ⅰ浓缩至75℃时相对密度为1.13的浸膏，在所述浸膏中加入体积分数为80%的乙醇溶液，温度28℃，保持20小时，然后过滤，得到滤液Ⅱ和沉淀物，将所述滤液Ⅱ减压浓缩至55℃时相对密度为1.23的膏体；
4）在所述粉碎物料Ⅲ中加入其重量4倍的水，加入蒸馏烧瓶中，进行蒸馏，控制蒸馏速度为每秒回流滴出溶液2~3滴，蒸馏时间为50分钟，蒸馏提取2次，将提取液合并用有机溶剂进行萃取，去下层溶液，真空旋蒸仪蒸出有机溶剂，即得蒸馏产物蒸馏产物；
5）将所述提取物Ⅰ、膏体和蒸馏产物分别干燥，粉碎，合并，，得到提取物组合；
6）将所述提取物组合与3重量份的生物菌剂拌合均匀，即得。
本实施例中，步骤2）中所述萃取的压力为40MPa，萃取温度为50℃，CO2流体流量为40L/h，萃取时间为3.5h。
本实施例中，步骤2）中所述乙醇的体积分数为95%，加入量为400ml。
本实施例中，步骤3）中所述浸膏与所述乙醇溶液的重量体积比1g：15ml。
本实施例中，步骤4）所述有机溶剂选择使用二氯甲烷。
本发明防治梨黑斑病的杀菌组合物的使用方法是：加入农药学上可接受的水、溶剂或助剂制备成有效成分为0.1~10%的水剂、悬浮剂或可湿性粉剂。
其中，助剂包括但不限于：分散剂，包括：木质素磺酸盐、丙烯酸钠与丙酰胺共聚物、烷基萘磺酸盐、聚羧酸盐类缩合物、脂肪酸甲酯磺酸钠中的一种或几种的混合。稳定剂，包括：2-环氧丙烷、丁基缩水甘油醚、异丙醇、正丁醇、聚乙二醇中的一种或几种的混合。湿润剂，包括：十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、丁基萘磺酸钠、石油磺酸钠、润湿渗透剂F、拉开粉BX、茶枯粉、皂角粉、无患子粉中的一种或几种的混合。
溶剂，指乙醇、异丙醇、正丁醇、乙酸乙酯、乙酸丁酯、二甲亚砜、松节油、溶剂油、N-甲基吡咯烷酮、二甲基甲酰胺等。
实施例2：一种防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活22份、蛇床子25份、苦豆子25份、金雀花22份、华细辛12份、叶子花12份、牛黄12份、五味子10份、侧柏叶7份、罗布麻8份、一枝黄花9份、三白草8份、生物菌剂3份，所述生物菌剂由质量百分比为60%枯草芽孢杆菌和40%球孢白僵菌组成。
本实施例防治梨黑斑病的杀菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
1）分别称取上述重量份的独活、蛇床子，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅰ；分别称取上述重量份的苦豆子、金雀花、叶子花、牛黄、罗布麻、一枝黄花和三白草，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅱ；分别称取重量份的华细辛、五味子和侧柏叶，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅲ；
2）将所述粉碎物料Ⅰ加入到超临界CO2萃取釜中，乙醇为夹带剂进行萃取，将萃取物进行冷冻离心，除去杂质，真空干燥，得到提取物Ⅰ；
3）在所述粉碎物料Ⅱ中加入其重量4倍的水，浸泡15分钟，启动超声波发生器，加热至60℃，保持45分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅰ和药渣；待滤液Ⅰ自然冷却后，将所述滤液Ⅰ浓缩至75℃时相对密度为1.12的浸膏，在所述浸膏中加入体积分数为75%的乙醇溶液，温度25℃，保持18小时，然后过滤，得到滤液Ⅱ和沉淀物，将所述滤液Ⅱ减压浓缩至55℃时相对密度为1.20的膏体；
4）在所述粉碎物料Ⅲ中加入其重量3倍的水，加入蒸馏烧瓶中，进行蒸馏，控制蒸馏速度为每秒回流滴出溶液2~3滴，蒸馏时间为40分钟，蒸馏提取3次，将提取液合并用有机溶剂进行萃取，去下层溶液，真空旋蒸仪蒸出有机溶剂，即得蒸馏产物蒸馏产物；
5）将所述提取物Ⅰ、膏体和蒸馏产物分别干燥，粉碎，合并，得到提取物组合；
6）将所述提取物组合与3重量份的生物菌剂拌合均匀，即得。
本实施例中，步骤2）中所述萃取的压力为30MPa，萃取温度为40℃，CO2流体流量为30L/h，萃取时间为5h。
本实施例中，步骤2）中所述乙醇的体积分数为90%，加入量为600ml。
本实施例中，步骤3）中所述浸膏与所述乙醇溶液的重量体积比1g：10ml。
本实施例中，步骤4）所述有机溶剂选择使用二氯甲烷。
所述防治梨黑斑病的杀菌组合物的使用方法同实施例1，不再赘述。
实施例3：一种防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活13份、蛇床子13份、苦豆子13份、金雀花13份、华细辛8份、叶子花8份、牛黄8份、五味子8份、侧柏叶6份、罗布麻6份、一枝黄花6份、三白草4份、生物菌剂3份，所述生物菌剂由质量百分比为60%枯草芽孢杆菌和40%球孢白僵菌组成。
本实施例防治梨黑斑病的杀菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
1）分别称取上述重量份的独活、蛇床子，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅰ；分别称取上述重量份的苦豆子、金雀花、叶子花、牛黄、罗布麻、一枝黄花和三白草，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅱ；分别称取重量份的华细辛、五味子和侧柏叶，混合，粉碎，获得粉碎物料Ⅲ；
2）将所述粉碎物料Ⅰ加入到超临界CO2萃取釜中，乙醇为夹带剂进行萃取，将萃取物进行冷冻离心，除去杂质，真空干燥，得到提取物Ⅰ；
3）在所述粉碎物料Ⅱ中加入其重量6倍的水，浸泡20分钟，启动超声波发生器，加热至70℃，保持60分钟，趁热过滤，得到滤液Ⅰ和药渣；待滤液Ⅰ自然冷却后，将所述滤液Ⅰ浓缩至75℃时相对密度为1.15的浸膏，在所述浸膏中加入体积分数为75%的乙醇溶液，温度30℃，保持24小时，然后过滤，得到滤液Ⅱ和沉淀物，将所述滤液Ⅱ减压浓缩至55℃时相对密度为1.25的膏体；
4）在所述粉碎物料Ⅲ中加入其重量5倍的水，加入蒸馏烧瓶中，进行蒸馏，控制蒸馏速度为每秒回流滴出溶液2~3滴，蒸馏时间为60分钟，蒸馏提取2次，将提取液合并用有机溶剂进行萃取，去下层溶液，真空旋蒸仪蒸出有机溶剂，即得蒸馏产物蒸馏产物；
5）将所述提取物Ⅰ、膏体和蒸馏产物分别干燥，粉碎，合并，得到提取物组合；
6）将所述提取物组合与3重量份的生物菌剂拌合均匀，即得。
本实施例中，步骤2）中所述萃取的压力为50MPa，萃取温度为60℃，CO2流体流量为50L/h，萃取时间为2h。
本实施例中，步骤2）中所述乙醇的体积分数为95%，加入量为500ml。
本实施例中，步骤3）中所述浸膏与所述乙醇溶液的重量体积比1g：20ml。
本实施例中，步骤4）所述有机溶剂选择使用氯仿。
所述防治梨黑斑病的杀菌组合物的使用方法同实施例1，不再赘述。
实施例4：一种防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活18份、蛇床子18份、苦豆子18份、金雀花18份、华细辛12份、叶子花12份、牛黄12份、五味子12份、侧柏叶8份、罗布麻8份、一枝黄花8份、三白草6份、生物菌剂2份，所述生物菌剂由质量百分比为50%枯草芽孢杆菌和50%球孢白僵菌组成。
实施例5：一种防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活20份、蛇床子20份、苦豆子20份、金雀花20份、华细辛10份、叶子花10份、牛黄10份、五味子8份、侧柏叶6份、罗布麻7份、一枝黄花7份、三白草7份、生物菌剂1份，所述生物菌剂由质量百分比为70%枯草芽孢杆菌和30%球孢白僵菌组成。
实施例6：一种防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活25份、蛇床子22份、苦豆子22份、金雀花25份、华细辛15份、叶子花15份、牛黄15份、五味子12份、侧柏叶8份、罗布麻0份、一枝黄花10份、三白草10份、生物菌剂5份，所述生物菌剂由质量百分比为55%枯草芽孢杆菌和45%球孢白僵菌组成。
实施例7：一种防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活10份、蛇床子10份、苦豆子10份、金雀花10份、华细辛5份、叶子花5份、牛黄5份、五味子5份、侧柏叶3份、罗布麻3份、一枝黄花3份、三白草1份、生物菌剂3份，所述生物菌剂由质量百分比为65%枯草芽孢杆菌和35%球孢白僵菌组成。
实施例8：一种防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活30份、蛇床子30份、苦豆子30份、金雀花30份、华细辛20份、叶子花20份、牛黄20份、五味子15份、侧柏叶12份、罗布麻12份、一枝黄花12份、三白草10份、生物菌剂2份，所述生物菌剂由质量百分比为60%枯草芽孢杆菌和40%球孢白僵菌组成。
实施例9：本实施例所描述的防治梨黑斑病的杀菌组合物，与实施例1不同的是：还包括：助剂5重量份，所述助剂是由脂肪酸甲酯磺酸钠、2-环氧丙烷、丙三醇以质量比1:1:2组成的混合物。
实施例10：本实施例所描述的防治梨黑斑病的杀菌组合物，与实施例1所不同的是：还包括：助剂3重量份，所述助剂是由脂肪酸甲酯磺酸钠、2-环氧丙烷、丙三醇以质量比1:1.5:1.5组成的混合物。
对比例1：防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：独活15份、蛇床子15份、苦豆子15份、金雀花15份、华细辛10份、叶子花10份、牛黄10份、五味子10份、侧柏叶7份、罗布麻7份、一枝黄花7份、三白草5份。制备方法参阅实施例1。
对比例2：防治梨黑斑病的杀菌组合物，由质量百分比为60%枯草芽孢杆菌和40%球孢白僵菌组成。制备方法参阅实施例1。
对比例3：防治梨黑斑病的杀菌组合物，由如下重量份的原料制备而成：苦豆子15份、金雀花15份、华细辛10份、叶子花10份、牛黄10份、五味子10份、侧柏叶7份、罗布麻7份、一枝黄花7份、三白草5份。制备方法参阅实施例1。
效果评价
1.1试验设计
田间药剂试验设计10个处理，供试药剂分别为：
实验组：A1~A6：依次为实施例1~4、9~10制备的农药；
对照组：B1~B3：依次为对比例1~3制备的农药；
B0：清水。
每处理重复3次，共计30个小区，随机排列，每个小区选择3株树，选择整体树势和树形一致的果树作为调查目标，小区内未选中的果树与本小区管理一致，边行不选取。30个小区所植梨均为同一品种。
4月20日开始喷药，每隔30天喷1次， 共喷药3次。施药量以果实稍有液滴流出为度。
1.2药效调查
果实采收前调查发病情况，从每株树树冠东、西、南、北、中5个方位随机调查2~4条新梢上的果实，分别记录总果数和梨轮纹病、梨黑星病、梨黑斑病的病果数，同时从5个方位调查2~4个枝条上的叶片，分别记录总叶数和梨黑星病、梨黑斑病的病叶数，分别计算病果率和病叶率，并按下式计算果（叶）防效；
防治效果 /% =[对照区病果（叶）率-处理病果（叶）率]/对照区病果 (叶)率×100。
1.3试验结果
表1 梨树病害的防治效果
1）对梨轮纹病的防治效果：表1可以看到，实验组A1~A6及对照组B1~B3的病果率均低于对照组B0。实验组A1~A6的防治效果均在93%以上，实验组A5的防效为96.5%，均优于其他实验组。对照组B2对梨轮纹病的防效均高于对照组B1和B3，但仍明显低于实验组。
2）对梨黑星病的防治效果：表1可以看到，实验组A1~A6及对照组B1~B3的病果率和病叶率均低于对照组B0。实验组A1~A6的果防效均在95%以上，均优于对照组B1~B3的果防效，实验组A1~A6的叶防效均在96%以上，均优于对照组B1~B3的叶防效，实验组A5的防效最优。对照组B1对梨黑星病的防效均高于对照组B2和B3，但仍明显低于实验组。
3）对梨黑斑病的防治效果：表1可以看到，实验组A1~A6及对照组B1~B3的病果率和病叶率均低于对照组B0。实验组A1~A6的果防效和叶防效均在97%以上，分别优于对照组B1~B3的果防效和叶防效，其中实验组A5的防效最优。对照组B1对梨黑星病的防效均高于对照组B2和B3，但仍明显低于实验组。
上述实验结果表明，1）本发明实验组A1~A6对梨轮纹病、梨黑星病及梨黑斑病的防治效果均明显优于对照组B1~B3，这与植物源农药与菌剂之间的协同促进关系密不可分，使综合防治效果都得到了显著的提高，可作为梨轮纹病、梨黑星病及梨黑斑病的防治农药。2）本发明实验组A5、A6的防效要优于A1~A4，这与助剂的选择使用有一定的关系，说明助剂的合理使用可以一定程度上增强本发明杀菌组合物的抗菌杀虫能力。3）本发明实验组A3、A4的防效优于A1和A2，这与原料的配比有一定的关系，说明原料之间的配比关系对其杀菌能力有一定的影响。
此外，长期实践表明，本发明除对梨轮纹病、梨黑星病及梨黑斑病具有显著的防治效果以外，对梨木虱的防效可以达到90~95%；对梨小食心虫、梨大食心虫的防效分别可以达到95~98%、92~95%；对梨黄粉蚜的防效可以达到85%以上，可整体上降低梨树病虫害的发生率为76.8~85.2%，每亩增产45~52%，单果重增加32~40%。
虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是熟悉本技术领域的技术人员应当理解，我们所描述的具体的实施例只是说明性的，而不是用于对本发明的范围的限定，熟悉本领域的技术人员在依照本发明的精神所作的等效的修饰以及变化，都应当涵盖在本发明的权利要求所保护的范围内。