本发明属于水产养殖领域，涉及一种中大型海洋贝类苗种繁育方法，具体涉及一种中国南海砗磲的一种人工诱导产卵方法。
背景技术：
砗磲，俗称大蚵，是软体动物门瓣鳃纲砗磲科生物的统称，有1科2属9种,广泛分布于从西太平洋到印度洋非洲东海岸的热带海域。在我国有分布并且较为常见的砗磲有6种，主要分布于台湾、海南、西沙群岛及其它南海岛屿。
砗磲与其他的双壳贝类相同，成熟年龄为3～5年。砗磲是双壳类软体动物中最大的生物，被称为“贝王”。其中大砗磲有记录的最大个体壳长达1.3m，年龄超过60岁，重达500kg。
砗磲经济价值很高，主要包括食用价值、观赏价值、药用价值和生态价值，是“佛教七宝”之一，目前市场需求较大，逐渐成为新的重点养殖及捕捞贝类。
近年来，由于各地的过量捕捞及砗磲生长环境的破坏，砗磲资源量大幅下降，砗磲已经列入濒危物种红色名录和一级国家保护海洋生物。因此砗磲人工繁育已经迫在眉睫，人工养殖砗磲不仅可以保护砗磲生物资源，保护海洋生态环境，而且可以满足巨大的市场需求。但砗磲由于生长缓慢和自然繁殖困难的限制，砗磲人工养殖一直不能大面积推广。
目前诱导砗磲产卵的方法主要以太阳暴晒热应力诱导及砗磲性腺萃取液诱导为主，虽然比自然状态下产卵率有所提高，但砗磲死亡率偏高，在实际推广过程中仍有一系列问题。例如，在太阳暴晒热应力诱导方法中暴晒容易造成砗磲损伤，并且光照强度不稳定会导致砗磲诱导效率不高，据报道该方法的诱导率约为35%；在砗磲性腺萃取液诱导方法中，虽然诱导效率比第一种方法有显著提高，诱导率约为65%，但制作砗磲性腺萃取液需要解剖性成熟砗磲，成本较高，无法大面积推广，不利于砗磲养殖行业长远发展。
技术实现要素：
本发明的目的是提供了一种可以促进砗磲性腺成熟，延长砗磲排卵期，对砗磲损伤较小，不会影响砗磲生长，并且砗磲在排卵后可以短时间内恢复到自然状态，并且诱导率高的砗磲的人工诱导产卵方法。
为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种砗磲的人工诱导产卵方法，包括以下步骤：
（1）繁殖时间：在每年7～9月的满月或新月，砗磲的性腺容易发育达到成熟；达到性成熟的砗磲在凌晨最容易排出成熟的配子；
（2）砗磲的筛选：观察砗磲进、出水孔周围外套膜的颜色，发现呈较深的橘色时，即代表砗磲将要排放出配子，再结合砗磲繁殖季节的新月或者满月时间，挑选性成熟个体在凌晨诱导产卵；
（3）诱导产卵用海水主要指标：水温在28～30℃，盐度在33～35‰，溶解氧在6mg/L以上，pH值在8.1～8.5，透明度在15m以上，用500目筛网过滤后作为诱导产卵用海水；
（4）诱导产卵步骤：在7～9月砗磲繁殖季节的满月或新月的凌晨，挑选性腺发育成熟的砗磲，使用注射器向性腺注射浓度20μmol/L的五羟色胺溶液2mL，将砗磲置于500目筛网过滤海水中，使水位高出砗磲2～3cm，小量充氧；砗磲是雌雄同体，首先排精，排精后15～60min内产卵，在产卵前用500目筛网过滤海水冲洗外壳，将排出的精子和卵子按1：200的体积比混匀后受精。
所述浓度20μmol/L的五羟色胺溶液的配制方法如下：秤取五羟色胺后，取砗磲生长环境的海水用200μm的微孔滤膜过滤后配成终浓度为20μmol/L五羟色胺溶液，为防止五羟色胺失效，整个配制过程要求低温、快速操作。
本发明砗磲的人工诱导产卵方法具有以下的有益效果：
1、本发明砗磲的人工诱导产卵方法对砗磲损伤较小，不会影响砗磲生长，并且砗磲在排卵后可以短时间内恢复到自然状态。
2、操作过程简单，处理时间较短，技术要求不高，利于推广。
3、五羟色胺又名血清素，是一种神经递质，经过本发明方法验证，五羟色胺对砗磲诱导产卵具有微量高效性。
4、五羟色胺广泛存在于哺乳动物组织中，诱导液制作过程不会伤害砗磲，可以大面积推广，对砗磲人工养殖行业具有明显的推进作用。
5、由于受环境因素的影响，自然状态下砗磲性腺成熟周期较长，只有完全成熟的砗磲才可以排卵，浓度20μmol/L的五羟色胺溶液可以促进砗磲性腺成熟，而且可以延长砗磲排卵期，对于砗磲人工育苗有很好的促进作用。
6、自然状态砗磲性腺成熟不同步，不能同时产卵，本发明提供的砗磲人工诱导产卵方法可以促进砗磲同步排卵，可以进行砗磲大规模人工育苗。
7、本发明通过对砗磲生长规律的研究，人为干预砗磲生长，突破了砗磲自然繁殖困难的瓶颈，解决了限制砗磲人工养殖多年的问题，实现砗磲资源的保护和可持续开发的平衡。
具体实施方式
实施例1
（1）挑选100个25cm以上的性成熟的砗磲在养殖池进行人工驯养，水质基本指标要求：水温28℃，盐度33‰，溶解氧6mg/L，pH值8.1，透明度15m；
（2）准备100个100L白色水桶，水桶中加入500目筛网过滤海水30L，放入小量气石充气；
（3）选40个生长状态较好的砗磲，使用注射器向每个性腺注射浓度20μmol/L的五羟色胺溶液2mL，注射器从出水口垂直插入性腺1cm，避免操作失误伤害砗磲，影响产卵，将诱导过的砗磲分别置于40个白色水桶中，水位高出砗磲3cm，注意观察砗磲产卵情况；
（4）在五羟色胺溶液诱导处理后砗磲会相继开始排出精子，在排精结束后将砗磲用500目筛网过滤海水冲洗外壳后置于新的水桶中，排精后15～60min内，砗磲会开始排出卵子，将排出的精子和卵子按1：200的体积比混匀后受精。
实施例2
（1）挑选100个25cm以上的性成熟的砗磲在养殖池进行人工驯养，水质基本指标要求：水温29℃，盐度34‰，溶解氧7mg/L，pH值8.2，透明度16m；
（2）准备100个100L白色水桶，水桶中加入500目筛网过滤海水30L，放入气石小量充气；
（3）选40个生长状态较好的砗磲，使用注射器向每个性腺注射浓度20μmol/L的五羟色胺溶液2mL，注射器从出水口垂直插入性腺2cm，避免操作失误伤害砗磲，影响产卵，将诱导过的砗磲分别置于40个白色水桶中，水位高出砗磲3cm，注意观察砗磲产卵情况；
（4）在五羟色胺溶液诱导处理后砗磲会相继开始排出精子，在排精结束后将砗磲用500目筛网过滤海水冲洗外壳后置于新的水桶中，排精后15～60min内，砗磲会开始排出卵子，将排出的精子和卵子按1：200的体积比混匀后受精。
实施例3
（1）挑选100个25cm以上的性成熟的砗磲在养殖池进行人工驯养，水质基本指标要求：水温30℃，盐度35‰，溶解氧8mg/L，pH值8.3，透明度17m；
（2）准备100个100L白色水桶，水桶中加入500目筛网过滤海水30L，放入小量气石充气；
（3）选40个生长状态较好的砗磲，使用注射器向每个性腺注射浓度20μmol/L的五羟色胺溶液2mL，注射器从出水口垂直插入性腺1cm，避免操作失误伤害砗磲，影响产卵，将诱导过的砗磲分别置于40个白色水桶中，水位高出砗磲3cm，注意观察砗磲产卵情况；
（4）在五羟色胺溶液诱导处理后砗磲会相继开始排出精子，在排精结束后将砗磲用500目筛网过滤海水冲洗外壳后置于新的水桶中，排精后15～60min内，砗磲会开始排出卵子，将排出的精子和卵子按1：200的体积比混匀后受精。
实施例4
（1）挑选100个25cm以上的性成熟的砗磲在养殖池进行人工驯养，水质基本指标要求：水温在29℃，盐度在33‰，溶解氧9mg/L，pH值8.4，透明度18m；
（2）准备100个100L白色水桶，水桶中加入500目筛网过滤海水30L，放入小量气石充气；
（3）选40个生长状态较好的砗磲，使用注射器向每个性腺注射浓度20μmol/L的五羟色胺溶液2mL，注射器从出水口垂直插入性腺2cm，避免操作失误伤害砗磲，影响产卵，将诱导过的砗磲分别置于40个白色水桶中，水位高出砗磲2cm，注意观察砗磲产卵情况；
（4）在五羟色胺溶液诱导处理后砗磲会相继开始排出精子，在排精结束后将砗磲用500目筛网过滤海水冲洗外壳后置于新的水桶中，排精后15～60min内，砗磲会开始排出卵子，将排出的精子和卵子按1：200的体积比混匀后受精。
实施例5
（1）挑选100个25cm以上的性成熟的砗磲在养殖池进行人工驯养，水质基本指标要求：水温28℃，盐度35‰，溶解氧10mg/L，pH值8.5，透明度19m；
（2）准备100个100L白色水桶，水桶中加入500目筛网过滤海水30L，放入气石小量充气；
（3）选40个生长状态较好的砗磲，使用注射器向每个性腺注射浓度20μmol/L的五羟色胺溶液2mL，注射器从出水口垂直插入性腺1cm，避免操作失误伤害砗磲，影响产卵，将诱导过的砗磲分别置于40个白色水桶中，水位高出砗磲3cm，注意观察砗磲产卵情况；
（4）在五羟色胺溶液诱导处理后砗磲会相继开始排出精子，在排精结束后将砗磲用500目筛网过滤海水冲洗外壳后置于新的水桶中，排精后15～60min内，砗磲会开始排出卵子，将排出的精子和卵子按1：200的体积比混匀后受精。
实施例6
（1）挑选100个25cm以上的性成熟的砗磲在养殖池进行人工驯养，水质基本指标要求：水温30℃，盐度33‰，溶解氧8mg/L，pH值8.4，透明度20m；
（2）准备100个100L白色水桶，水桶中加入500目筛网过滤海水30L，放入小量气石充气；
（3）选40个生长状态较好的砗磲，使用注射器向每个性腺注射浓度20μmol/L的五羟色胺溶液2mL，注射器从出水口垂直插入性腺2cm，避免操作失误伤害砗磲，影响产卵，将诱导过的砗磲分别置于40个白色水桶中，水位高出砗磲2cm，注意观察砗磲产卵情况；
（4）在五羟色胺溶液诱导处理后砗磲会相继开始排出精子，在排精结束后将砗磲用500目筛网过滤海水冲洗外壳后置于新的水桶中，排精后15～60min内，砗磲会开始排出卵子，将排出的精子和卵子按1：200的体积比混匀后受精。
本发明六个实施例的砗磲产卵数据如以下表一所示：
表一浓度20μmol/L五羟色胺溶液诱导砗磲产卵率
从表一统计结果表明：本发明采用海水配制的五羟色胺溶液诱导砗磲产卵率为80%～85%，精子和卵子形态学完整，活力较好，可以进行受精。
不同浓度的五羟色胺溶液对砗磲产卵率的试验：
按照本发明实施例1的步骤方法做试验，在相同的条件下，把浓度20μmol/L的五羟色胺溶液分别换成浓度15μmol/L的五羟色胺溶液、浓度17.5μmol/L的五羟色胺溶液、浓度22.5μmol/L的五羟色胺溶液、浓度25μmol/L的五羟色胺溶液，浓度27.5μmol/L的五羟色胺溶液、浓度30μmol/L的五羟色胺溶液；不同浓度的五羟色胺溶液诱导剂对砗磲诱导后产卵结果如表二所示：
表二不同浓度的五羟色胺溶液诱导砗磲产卵率
从表二统计结果表明：本发明采用海水配制的不同浓度五羟色胺溶液诱导砗磲产卵率均不同，低于浓度20μmol/L或高于浓度20μmol/L的五羟色胺溶液诱导率均低于75%，而采用浓度20μmol/L的五羟色胺溶液诱导率高达82.5%，因此本发明采用浓度20μmol/L的五羟色胺溶液对砗磲进行诱导后，诱导率高，精子和卵子形态学完整，活力较好，可以进行受精。
以上所揭露的仅为本发明的较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于本发明所涵盖的范围。