本发明涉及一种贝类遗传育种技术，具体地说，涉及一种海湾扇贝耐高温新品系的选育方法。
背景技术：
海湾扇贝，隶属于软体动物门，瓣鳃纲，异柱目，扇贝科，扇贝属，原产于美国大西洋沿岸，1982年首次引种我国，具有生长快、抗逆性强、适应范围广等优点，是我国重要的养殖经济贝类。海湾扇贝北部亚种主要养殖在渤海和黄海北部海域，最适生长温度为18-28℃，成贝壳长最大7cm；海湾扇贝南部亚种主要养殖在北部湾海域，其耐高温能力较强，最适生长温度为25-30℃，成贝壳长最大5.4cm。
随着全球气候持续变暖，极端天气频繁发生，我国扇贝高温期大规模性死亡事件时有发生，造成了巨大的经济损失，严重影响了产业的可持续发展。高温是扇贝高温期大规模死亡的一个重要原因，因此，提高海湾扇贝的耐高温能力是育种工作者亟需解决的问题。因奠基者效应和易自交的生物特性，采用传统群体选育方法，海湾扇贝的耐高温选育进展缓慢，且累代养殖后生长和抗逆性状极易发生近交衰退。回交育种技术可以打破基因连锁，综合双亲的优良性状，是海湾扇贝良种选育的有效途径。
技术实现要素：
本发明采用回交育种技术，以海湾扇贝北部亚种的新品种“中科红”核心种质群体为轮回亲本，以南部亚种的湛江养殖群体为非轮回亲本，通过亚种间杂交技术，将海湾扇贝南部亚种的耐高温性状引入海湾扇贝北部亚种；在夏季高温期进行高温胁迫实验，经连续多代回交选育，获得海湾扇贝耐高温新品系。
本发明所采用的选育步骤为：
(1)亚种间群体杂交：2月上旬从广东省湛江海区采集海湾扇贝南部亚种的养殖群体，采用低温干运法运至北方进行室内促孰，每天降温1℃，10℃后开始与北部亚种“中科红”核心种质群体同步升温促孰，每天升温0.5℃，19℃后两亚种的性腺可同步成熟。从两亚种中选择性腺成熟的个体为亲贝，分别获取北部亚种个体的卵子和南部亚种个体的精子，采用群体杂交的方式构建第一代杂交群体；
(2)高温胁迫：在夏季高温期自然海区水温25-26℃时，从杂交群体中随机取10000-20000个稚贝，在室内常温海水中暂养3天后，每天升温0.5℃，当剩余10％存活个体时，转移到养殖海区进行正常管理，获得第一代选育系；
(3)第二代选育：以总重较大且性腺成熟的标准，选择海湾扇贝北部亚种“中科红”的核心种质群体的母本和第一代选育系的父本，构建第二代杂交群体；重复上述(2)的步骤获得第二代选育系；
(4)第三代选育：以总重较大且性腺成熟的标准，选择海湾扇贝北部亚种“中科红”的核心种质群体的母本和第二代选育系的父本，构建第三代杂交群体；重复上述(2)的步骤获得第三代选育系；
(5)第四代选育：总重较大且性腺成熟的标准，选择海湾扇贝北部亚种“中科红”的核心种质群体的母本和第三代选育系的父本，构建第三代杂交群体，构建第四代杂交群体；重复上述(2)的步骤获得第四代选育系；
(6)新品系的纯化：在第四代选育系中取左右壳色均为橙黑相间的个体作为新品系的亲本，通过群体自繁培育出性状稳定的海湾扇贝耐高温新品系。
进一步地说，所述制种过程具体包括以下步骤：
A、亲贝选种：海湾扇贝北部亚种“中科红”采集时间为11月中旬，壳长5-6cm，双壳均为橙红色，第一代亲本中的海湾扇贝南部亚种左右壳分别为黑色和白色，第二代、第三代和第四代亲本中贡献精子的个体双壳均为橙黑相间。
B、杂交群体的建立：采用升温刺激的方法获得所需的精子和卵子，将受精卵放入盛有过滤海水的500L聚乙烯塑料桶中，孵化密度控制在20-30个/mL，在水温24-25℃微量充气的条件下，经22-24h孵化为D形幼虫。
C、幼体培育：将上述D形幼虫置于盛有24-25℃海水的500L的聚乙烯塑料桶中，培育密度为8-10个/mL；每次换水1/2，每天换水两次；开口饵料为球等边金藻，当壳长达到140μm时开始逐步投喂扁藻；当30％的个体出现眼点时，投放聚乙烯网片作为附着基。
D、中间培育：将稚贝置于40-50目的聚乙烯网袋，并挂到保苗池塘中进行中间培育，根据稚贝生长情况定时分苗。
E、海上养成：当壳长达到2-3cm时，将稚贝放到养成笼，每层40-45个个体。每30-40天换笼一次，并去除扇贝壳上的附着生物。
与现有技术相比，本发明采用回交育种技术，系统发掘海湾扇贝两个亚种的生物学特性，通过亚种间杂交将海湾扇贝南部亚种的耐高温性状引入海湾扇贝北部亚种，然后通过连续多代回交选育，获得稳定遗传的海湾扇贝耐高温新品系。此外采用双壳橙红色的海湾扇贝北部亚种与黑白壳色的南部亚种作为亲本，通过子代的壳色可以有效避免雌雄同体型贝类的杂交污染难题，提高了育种的效率。本发明丰富了海湾扇贝养殖群体种质的遗传多样性，改良了海湾扇贝北部亚种的耐高温性能，进一步扩大其适养海区，提高了海湾扇贝的产量和企业的经济效益，市场前景广阔。
具体实施方式
实施例1
一种海湾扇贝耐高温新品系的选育方法，其选育步骤为：
1、亲本的选择：(1)第一代选育：2011年2月，从广东湛江采集海湾扇贝南部亚种的养殖群体，采用低温干运法运回北方进行室内促孰；3月从海湾扇贝北部亚种新品种“中科红”核心种质群体和南部亚种湛江养殖群体中选择性腺成熟的个体为亲贝；(2)第二代选育：2011年11月以海湾扇贝北部亚种新品种“中科红”的核心种质群体选择总重较大的个体为母本，经过高温胁迫的第一代选育系为父本；(3)第三代选育：2012年11月，以海湾扇贝北部亚种新品种“中科红”的核心种质群体选择总重较大的个体为母本，经过高温胁迫的第二代选育系为父本；；(4)第四代选育：2013年11月，以海湾扇贝北部亚种新品种“中科红”的核心种质群体选择总重较大的个体为母本，经过高温胁迫的第三代选育系为父本；；(5)新品系的纯化：2014年11月，在第四代选育系中取左右壳色均为橙黑相间的个体作为新品系亲本。
2、杂交群体的建立：2011年-2015年，每年3月采用升温刺激的方法获得所需的精子和卵子，将受精卵放入盛有过滤海水的500L聚乙烯塑料桶中，孵化密度控制在20-30个/mL，在水温24℃微量充气的条件下，经22-24h孵化为D形幼虫。
3、幼体培育：将上述D形幼虫置于盛有24℃海水的500L的聚乙烯塑料桶中，培育密度为8-10个/mL；每次换水1/2，每天换水两次；开口饵料为球等边金藻，当壳长达到140μm时开始投喂扁藻；当30％的个体出现眼点时，投放聚乙烯网片作为附着基。
4、中间培育：将稚贝置于50目的聚乙烯网袋，并挂到保苗池塘进行中间培育，根据稚贝生长情况定时分苗。
5、海上养成：当壳长达到2-3cm时，将稚贝放到养成笼，每层40个个体。每30天换笼一次，并去除扇贝壳上的附着生物。
6、高温胁迫：2011年-2014年，每年8月自然海区水温25-26℃时，将稚贝在室内常温海水中暂养3天后，每天升温0.5℃，每2小时挑一次死亡个体，剩余10％存活个体时，放到自然海区正常管理，获得耐高温选育系。
上述仅为发明的具体实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用构思对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。