一种两高双低油菜品种的选育方法与流程

本发明具体涉及一种两高双低油菜品种的选育方法，属于油菜抗病育种技术领域。

背景技术：

我国是世界油菜籽生产大国，面积和总产量均居世界首位，油菜籽是我国食用植物油的主要来源。油酸是油菜脂肪酸的重要成份，有较高的营养价值，热稳定性较好。高油酸菜油的油酸含量高，亚油酸、亚麻酸含量低，可降低超重人群的心血管疾病和血浆中的低密度脂蛋白胆固醇含量，有效的预防动脉硬化，在高温下不易氧化变质，保质期长，在加热到较高温度时不冒烟，烹饪时间减少，损耗也较少，煎炸产品还拥有优良的香味。因此，高油酸油菜的研究受到国内外的高度关注。双低油菜指低芥酸、低硫甙含量的油菜品种，国家标准是油品中芥酸含量低于5%，饼粕中硫苷含量应低于30微摩尔/克饼。符合这两个标准的基本可称为优质油菜。芥酸关系油品质量，芥酸越低油品质量越好。菜油的营养价值取决于其中油酸、亚油酸、芥酸、亚麻酸等各种脂肪酸含量。硫甙是油菜种子中的主要有害成分，它本身并无毒，但在酶的作用下会生成有毒物质。高硫甙菜饼粕喂母鸡，不但体质下降、产蛋量减少，且发生肺出血并发症，致死亡率高达62%—88%。油菜菌核病、病毒病、白锈病是油菜得三大主要病害，中国以长江流域发生最严重，轻病年减产10%-20%，重病年减产达50%左右。一个多世纪以来，国内外在油菜病害的发生和防治等方面做了大量的工作，但仍未从根本上改变油菜病害严重危害的局面，因此，选育和利用抗病品种越来越受到人们的重视。随着我国国民经济的飞速发展，人民生活水平的不断提高，食用油的消费量与日俱增，呈现为供求缺口越来越大的局面。因此，建立高抗病高油酸含量双低油菜高效育种技术体系，依靠科技进步，不断推出和转化优质高产新品种，是促进农业产业结构调整，优化食用油品质，提高农民种植效益，缓解我国食用油紧缺矛盾的有效途径。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种两高双低油菜品种的选育方法，从而大大提高油菜品种的抗病性和油品质量。

本发明以甘蓝型油菜高油酸品种、低芥酸品种、低硫甙品种、抗油菜菌核病品种、抗油菜病毒病品种、抗油菜白锈病品种为亲本，通过杂交、复交聚合，并经多代的抗性鉴定、品质筛选，育成能同时抗3种病害、高油酸、低芥酸、低硫甙含量的油菜品种，该品种品质好、抗病性好，种植该品种可减少农药的使用量，提高产量的同时减少环境污染，增加农民收入。

为达到以上目的，本发明采用以下技术方案：

（1）亲本选择及杂交：选甘蓝型油菜高油酸品种FU003或FU012为P1（费维新，等.甘蓝型油菜高油酸材料的正反交遗传研究.安徽农业科学，2007，35(7):1927-1929），所述甘蓝型油菜高油酸材料FU003、FU012 油酸含量达80%以上），低芥酸、低硫甙品种浙大619为P2（许玲.“双高双低”油菜抗病新品种浙大619的选育与高产栽培技术研究.核农学报，2013，27(12) : 1839 - 1844），抗油菜菌核病品种中双9号为P3（王汉中，等.抗菌核病双低油菜新品种中双9号的选育.中国油料作物学报，2002，24(4)：71-73），抗油菜病毒病品种 Lingot为P4（刘忠松.油菜抗病遗传育种研究进展. 中国油料，1989(2):77-81），抗油菜白锈病品种Regent或东辐一号为P5（刘忠松.油菜抗病遗传育种研究进展. 中国油料，1989(2):77-81）；以P1作母本，作杂交P1/P2，以P3作母本，作杂交P3/P4、作杂交P3/P5，得3个杂交F₁，分别以F₁-P12、F₁-P34、F₁-P35表示；

（2）种植F₁-P12、F₁-P34、F₁-P35各10株，花期套袋自交，单株收种得F₂代种子F₂-P12、F₂-P34、F₂-P35；

（3）分别种植F₂代种子F₂-P12、F₂-P34、F₂-P35，每个组合种植150-200株，组合F₂-P34进行菌核病、病毒病抗性鉴定，组合F₂-P35进行菌核病、白锈病抗性鉴定，每个组合筛选出高抗其相应亲本所抗2种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株10个套袋自交，单株收种得F₃代种子F₃-P34、F₃-P35；组合F₂-P12套袋自交，收获的种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株10个，得上选的F₃代种子F₃-P12；

（4）种植F₃-P12、F₃-P34、F₃-P35，开花期F₃-P34、F₃-P35各选农艺性状优异的单株2株，作杂交F₃-P34/F₃-P35，得复交F₁，以F₁-P345表示；组合F₃-P12套袋自交，单株收获种子，分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₄代种子F₄-P12；

（5）种植F₁-P345、F₄-P12种子各5株，开花期作杂交F₁-P345/F₄-P12，得复交F₁，以F₁-P12345表示；

（6）种植F₁-P12345，花期套袋自交，单株收种得F₂代种子F₂-P12345；

（7）种植F₂-P12345300-360株，并进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20-30个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5-8个，得上选的F₃代种子F₃-P12345；

（8）株系种植F₃-P12345，每个株系100株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20-25个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₄代种子F₄-P12345；

（9）株系种植上选的F₄-P12345，每个株系80株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₅代种子F₅-P12345；

（10）株系种植上选的F₅-P12345，每个株系50株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₆代种子F₆-P12345；

（11）株系种植步骤（10）上选的5个F₆-P12345各100株，成熟期对5个株系的株叶形态、产量性状进行测评，选株叶形态和产量性状最优异的1株系混合收种，即育成高油酸、低芥酸、低硫甙、抗油菜菌核病、抗油菜病毒病、抗油菜白锈病的两高双低油菜品种；

本发明的有益效果：

本发明的效果在于分别把高油酸、低芥酸、低硫甙、抗油菜菌核病、油菜病毒病、油菜白锈病基因通过杂交、复交育种方法聚合导入高产油菜品种中，育成农艺和产量性状优异的抗病、高油酸、低芥酸、低硫甙的油菜品种。该两高双低油菜品种产量高、抗性好、品质佳，每亩比普通油菜品种增加产量15-20%，减少施药成本100-120元，油菜籽收购价格增加25-30%，每亩可增加经济效益350-400元，同时减少了农药对环境的污染。

具体实施方式

实施例1：

(1)选甘蓝型油菜高油酸品种FU003（P1），低芥酸、低硫甙品种浙大619（P2），抗油菜菌核病品种中双9号（P3），抗油菜病毒病品种 Lingot（P4），抗油菜白锈病品种Regent（P5）为杂交亲本，以P1作母本，作杂交P1/P2，以P3作母本，作杂交P3/P4、作杂交P3/P5，得3个杂交F₁，分别以F₁-P12、F₁-P34、F₁-P35表示；

(2)种植F₁-P12、F₁-P34、F₁-P35各10株，花期套袋自交，单株收种得F₂代种子F₂-P12、F₂-P34、F₂-P35；

(3)分别种植F₂代种子F₂-P12、F₂-P34、F₂-P35，每个组合种植150株，组合F₂-P34进行菌核病、病毒病抗性鉴定，组合F₂-P35进行菌核病、白锈病抗性鉴定，每个组合筛选出高抗其相应亲本所抗2种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株10个套袋自交，单株收种得F₃代种子F₃-P34、F₃-P35；组合F₂-P12套袋自交，收获的种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株10个，得上选的F₃代种子F₃-P12；

(4)种植F₃-P12、F₃-P34、F₃-P35，开花期F₃-P34、F₃-P35各选农艺性状优异的单株2株，作杂交F₃-P34/F₃-P35，得复交F₁，以F₁-P345表示；组合F₃-P12套袋自交，单株收获种子，分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₄代种子F₄-P12；

(5)种植F₁-P345、F₄-P12种子各5株，开花期作杂交F₁-P345/F₄-P12，得复交F₁，以F₁-P12345表示；

(6)种植F₁-P12345，花期套袋自交，单株收种得F₂代种子F₂-P12345；

(7)种植F₂-P12345 300株，并进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₃代种子F₃-P12345；

(8)株系种植F₃-P12345，每个株系100株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₄代种子F₄-P12345；

(9)株系种植上选的F₄-P12345，每个株系80株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₅代种子F₅-P12345；

(10) 株系种植上选的F₅-P12345，每个株系50株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₆代种子F₆-P12345；

(11)株系种植步骤（10）上选的5个F₆-P12345各100株，成熟期对5个株系的株叶形态、产量性状进行测评，选株叶形态和产量性状最优异的1株系混合收种，即育成高油酸、低芥酸、低硫甙、抗油菜菌核病、油菜病毒病、油菜白锈病的两高双低油菜品种“抗油1号”；

“抗油1号”产量高，平均亩产油量3098. 1 kg·hm^-2，比对照浙大619（2690.3kg·hm^-2）增加 15.15% ，抗性好，高抗油菜菌核病、病毒病和白锈病，品质佳，芥酸含量0.36%，硫甙含量18.20μmol.g^-1，含油量47.82%，油酸含量高达82%，每亩可减少施药成本100元，油菜籽收购价格增加25-30%，每亩可增加经济效益350元左右，同时减少了农药对环境的污染。

实施例2：

(1)选甘蓝型油菜高油酸品种FU012（P1），低芥酸、低硫甙品种浙大619（P2），抗油菜菌核病品种中双9号（P3），抗油菜病毒病品种 Lingot（P4），抗油菜白锈病品种东辐一号（P5）为杂交亲本，以P1作母本，作杂交P1/P2，以P3作母本，作杂交P3/P4、作杂交P3/P5，得3个杂交F₁，分别以F₁-P12、F₁-P34、F₁-P35表示；

(2)种植F₁-P12、F₁-P34、F₁-P35各10株，花期套袋自交，单株收种得F₂代种子F₂-P12、F₂-P34、F₂-P35；

(3)分别种植F₂代种子F₂-P12、F₂-P34、F₂-P35，每个组合种植200株，组合F₂-P34进行菌核病、病毒病抗性鉴定，组合F₂-P35进行菌核病、白锈病抗性鉴定，每个组合筛选出高抗其相应亲本所抗2种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株10个套袋自交，单株收种得F₃代种子F₃-P34、F₃-P35；组合F₂-P12套袋自交，收获的种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株10个，得上选的F₃代种子F₃-P12；

(4)种植F₃-P12、F₃-P34、F₃-P35，开花期F₃-P34、F₃-P35各选农艺性状优异的单株2株，作杂交F₃-P34/F₃-P35，得复交F₁，以F₁-P345表示；组合F₃-P12套袋自交，单株收获种子，分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₄代种子F₄-P12；

(5)种植F₁-P345、F₄-P12种子各5株，开花期作杂交F₁-P345/F₄-P12，得复交F₁，以F₁-P12345表示；

(6)种植F₁-P12345，花期套袋自交，单株收种得F₂代种子F₂-P12345；

(7)种植F₂-P12345 360株，并进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株30个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株8个，得上选的F₃代种子F₃-P12345；

(8)株系种植F₃-P12345，每个株系100株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株25个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₄代种子F₄-P12345；

(9)株系种植上选的F₄-P12345，每个株系80株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₅代种子F₅-P12345；

(10) 株系种植上选的F₅-P12345，每个株系50株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₆代种子F₆-P12345；

(11) 株系种植步骤（10）上选的5个F₆-P12345各100株，成熟期对5个株系的株叶形态、产量性状进行测评，选株叶形态和产量性状最优异的1株系混合收种，即育成高油酸、低芥酸、低硫甙、抗油菜菌核病、油菜病毒病、油菜白锈病的两高双低油菜品种“抗油2号”；

“抗油2号”产量高，平均亩产油量 3230. 8 kg·hm^-2，比对照浙大619（2690.3kg·hm^-2）增加 20.09%，抗性好，高抗油菜菌核病、病毒病和白锈病，品质佳，芥酸含量0.29%，硫甙含量17.45μmol.g^-1，含油量48.12%，油酸含量高达83%，每亩可减少施药成本100元，油菜籽收购价格增加25-30%，每亩可增加经济效益400元左右，同时减少了农药对环境的污染。

实施例3：

(1)选甘蓝型油菜高油酸品种FU003（P1），低芥酸、低硫甙品种浙大619（P2），抗油菜菌核病品种中双9号（P3），抗油菜病毒病品种 Lingot（P4），抗油菜白锈病品种东辐一号（P5）为杂交亲本，以P1作母本，作杂交P1/P2，以P3作母本，作杂交P3/P4、作杂交P3/P5，得3个杂交F₁，分别以F₁-P12、F₁-P34、F₁-P35表示；

(2)种植F₁-P12、F₁-P34、F₁-P35各10株，花期套袋自交，单株收种得F₂代种子F₂-P12、F₂-P34、F₂-P35；

(3)分别种植F₂代种子F₂-P12、F₂-P34、F₂-P35，每个组合种植180株，组合F₂-P34进行菌核病、病毒病抗性鉴定，组合F₂-P35进行菌核病、白锈病抗性鉴定，每个组合筛选出高抗其相应亲本所抗2种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株10个套袋自交，单株收种得F₃代种子F₃-P34、F₃-P35；组合F₂-P12套袋自交，收获的种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株10个，得上选的F₃代种子F₃-P12；

(4)种植F₃-P12、F₃-P34、F₃-P35，开花期F₃-P34、F₃-P35各选农艺性状优异的单株2株，作杂交F₃-P34/F₃-P35，得复交F₁，以F₁-P345表示；组合F₃-P12套袋自交，单株收获种子，分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₄代种子F₄-P12；

(5)种植F₁-P345、F₄-P12种子各5株，开花期作杂交F₁-P345/F₄-P12，得复交F₁，以F₁-P12345表示；

(6)种植F₁-P12345，花期套袋自交，单株收种得F₂代种子F₂-P12345；

(7)种植F₂-P12345 340株，并进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株25个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株6个，得上选的F₃代种子F₃-P12345；

(8)株系种植F₃-P12345，每个株系100株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株22个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₄代种子F₄-P12345；

(9)株系种植上选的F₄-P12345，每个株系80株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₅代种子F₅-P12345；

(10) 株系种植上选的F₅-P12345，每个株系50株，进行抗性鉴定，鉴定3个抗源亲本所抗病害种类，筛选出同时高抗3种病害、株型高大紧凑、有效分枝多、主花序长、角果较多、籽粒大的单株20个套袋自交，成熟期单株编号收种，种子分别进行油酸、芥酸、硫甙含量测定，筛选出油酸含量80%以上、芥酸含量低于0.5%、硫甙含量低于20μmol.g^-1的单株5个，得上选的F₆代种子F₆-P12345；

(11)株系种植步骤（10）上选的5个F₆-P12345各100株，成熟期对5个株系的株叶形态、产量性状进行测评，选株叶形态和产量性状最优异的1株系混合收种，即育成高油酸、低芥酸、低硫甙、抗油菜菌核病、油菜病毒病、油菜白锈病的两高双低油菜品种“抗油3号”；

“抗油3号”产量高，平均亩产油量 3178. 6 kg·hm^-2，比对照浙大619（2690.3kg·hm^-2）增加 18.15% ，抗性好，高抗油菜菌核病、病毒病和白锈病，品质佳，芥酸含量0.29%，硫甙含量17.45μmol.g^-1，含油量48.12%，油酸含量高达83%，油菜籽收购价格增加25-30%，每亩可增加经济效益380元左右，同时减少了农药对环境的污染。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。