本发明属于藻类培养技术领域,更具体地,涉及一种礁膜合子的大量附着和培养方法。
背景技术:
礁膜是一种分布很广的海洋经济绿藻,营养丰富,含有较高的蛋白质、碳水化合物及多种维生素和矿质元素,口感好,食用价值高,并具有药用价值,能清热化痰、利水解毒、软坚散结,可用于治疗喉炎、咳嗽痰结、水肿等,从中提取的硫酸多糖更具有抗凝血,抗氧化,降血脂,抗炎活性,是一种非常有开发潜力的海洋食品、药物和化妆品资源。
礁膜在日本和韩国早已进入商业化栽培供人们食用,以产值和栽培规模计,仅次于海带、紫菜、裙带菜,列第四位。在日本栽培的绿紫菜一次加工品年产值折合人民币 12 亿元左右,韩国2004年绿紫菜产量已超过11500吨(鲜品),年产值达1000万美元。日本和韩国绿紫菜的产量还远远不能满足市场需求,需要从国外进口,是目前急需扩大栽培规模的热点种类,但迄今为止,我国对礁膜进行人工育苗栽培却停留在试验阶段,规模产业化并未很好的发展起来。
随着现代经济的发展,以及对绿藻营养价值认知程度的加深,人们对绿色食品食品需求量逐步加深,以浒苔、礁膜为代表的大型绿藻类产品的市场得以不断扩大,国际上绿藻产品已广泛应用于菜肴、食品、饲料、肥料和生化领域。目前浙江等海域已形成了一定规模的浒苔加工产业,产品不仅可供内需,而且还远销国外,但产量往往供不应求。如今浒苔的发展已小有规模,但国内针对礁膜的研究与开发利用才刚刚起步,礁膜栽培还处于试验阶段。
目前礁膜育苗方法主要是适时在野生礁膜产地进行网帘附苗,但此方法附苗效率较低不稳定,产量也不高,杂藻太多;目前,虽已开展了宽礁膜、北极礁膜的人工育苗试验,但现有技术中并没有探讨一次性大量附着合子和培养的方法,都只是小量的观察实验,远远满足不了人工育苗过程中一次性大量附着合子的需要。此外,礁膜、宽礁膜和北极礁膜又是不同的种类,因此,了解和掌握礁膜合子大量附着的方法和在此基础上的培养技术,是本技术领域中亟待开发的。
技术实现要素:
本发明的目的在于根据现有技术中的不足,提供了一种礁膜合子的大量附着和培养方法。
本发明的目的通过以下技术方案实现:
本发明提供了一种礁膜合子的大量附着和培养方法,包括如下步骤:
S1.采集礁膜作为种藻,室内阴干12~14 h;
S2. 将种藻加入海水中培养,在强光下进行充气搅拌,同时加蒸馏水,待15~25分钟后过滤,得到配子液;
S3. 在S2配子液中放置苗板,然后黑暗处理9~12h,进行合子附着,再在一定温度下进行间歇性光照培养,进行合子培养,光照周期为12 h/天;每15天换掉一半海水,培养5~7个月。
本发明适时采集成熟的种藻释放配子,使雌、雄配子结合成合子进行室内人工育苗 。
更具体地,本发明首先取成熟的经过室内阴干的礁膜配子体放入海水中给予刺激(充气搅拌+强光照射+加蒸馏水)放散配子,制备成高密度的配子液;再采用插槽式方法放置苗板,黑暗处理一定时间,使雌、雄配子接合成合子并均匀附着于苗板上,然后进行培养。
本发明可促使配子集中放散,采用插槽式的方法,可满足一次性大量附着合子和培养的需要;苗板所附着的合子密度高,且便于在光学显微镜下观察合子的附着萌发状况。
S1中,阴干时间大于14 h种藻失水量过多影响礁膜的活力,阴干时间小于12 h则刺激效果不足,均会降低配子的整体放散量。
优选地,S3中间歇性光照培养的温度为23℃~26℃。
优选地,S2中海水的盐度为25~30。
优选地,S3中间歇性光照培养的光强度为40μmol•m-2•s-1 ~100μmol•m-2•s-1。
优选地,S2中强光的光照强度为160~200 μmol•m-2•s-1。
优选地,S2中海水与蒸馏水的体积比为15~25:1。
优选地,S2中种藻在海水中培养的浓度为20~30g/L。该条件下满足人工大量育苗的需要。
优选地,S3中苗板为插槽式苗板,合子附着时苗板间隔1 cm,培养时苗板间隔2 cm;每1L配子液采用5~7块苗板进行采附合子,培养时加大间隔可使苗板上获得适宜的光照强度。
在本发明条件下,配子液的密度达106 个/ mL,苗板上合子的附着密度达104个/cm2。
优选地,S1中于3月下旬至4月中旬采集礁膜作为种藻,S3中培养时间从每年4月中旬持续至10月下旬。
与现有技术相比,本发明具有以下优点及有益效果:
本发明提供了一种新的在苗板上一次性大量附着合子和培养的方法,可稳定的一次性获得大量的纯度高的礁膜配子液并进行合子的附着与培养,所提供的方法为礁膜规模化人工繁育与栽培奠定了技术基础,在绿藻合子的获得与培养中具有推广应用前景。
附图说明
图1为提供附着基的苗板与插槽式装置。
具体实施方式
以下结合具体实施例和附图来进一步说明本发明,但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明,本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明,本发明所用试剂和材料均为市购。
实施例1:
如图1所示,本发明采用的面板线槽中,线槽长52 cm,宽10 cm,深4 cm,每隔1 cm刻槽,放40张PVC苗板(厚1 mm、长20 cm、宽10 cm),苗板线槽底板用线槽盖板刻槽捆绑加固。
本实施例中苗板为PVC苗板,即聚氯乙烯无毒透明板,苗板两面皆用砂轮打磨粗糙,并用淡水浸泡1周左右。透明便于在光学显微镜下观察合子的附着萌发状况;规格设为厚1 mm、长20 cm、宽10 cm,过大合子培养过程中易弯曲变形,过小降低育苗效率。
所述塑料插槽的间隔为1 cm,合子附着时PVC苗板间隔1 cm,培养时PVC苗板间隔加大至2 cm,使苗板上获得适宜的光照强度。
培养介质为自然海水,海水均经过滤、煮沸消毒、冷却至室温的处理,盐度范围保持在25~30。
于3月下旬至4月中旬的大潮前一天在广东省硇洲岛采集藻体边缘乃至全部都能由绿色变为黄褐色的礁膜作为种藻。
采集回的种藻用镊子拣掉石莼、浒苔等杂藻和杂物后,再用海水清洗掉泥沙。
室内阴干14 h后称取450 g的种藻,倒入半透明塑料箱中加20 L海水(盐度27、温度24.0 ℃),然后用180 μmol•m-2•s-1的强光照射,充气搅拌,同时加入1 L 60 ℃蒸馏水,20分钟后用筛绢过滤出种藻,即得到浅绿色的密度为106 个/ mL的配子液。
将插好PVC苗板的插槽全部沉入配子液中(20 L配子液一次能供120块苗板采附合子),然后黑暗处理10 h,苗板合子密度达104 个/cm2,满足生产需要。
最后在一定温度下进行间歇性光照培养,温度设为23℃~26℃,光照强度为40μmol•m-2•s-1 ~100μmol•m-2•s-1 照射,光照周期为12 h/天;每15天换掉一半海水,培养时间从每年4月中旬持续至10月下旬。