本发明涉及一种培养方法，特别是涉及一种高含量虫草素蛹虫草子实体的培养方法及技术。
背景技术：
蛹虫草又叫北冬虫夏草、北虫草，蛹虫草的功效：补肺阴、补肾阳，蛹虫草的作用是治肾虚，阳萎遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，中医认为其起扶正固本作用，对老年性慢性支气管炎、肺原性心脏病有显著疗效，能提高肝脏解毒能力，起护肝作用，提高身体抗病毒和抗辐射能力。
中医认为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳萎遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，久咳虚弱，劳咳痰血，自汗盗汗等，是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。
现有技术对蛹虫草的培养中添加了经过化学处理合成的原料，在提取蛹虫草中的虫草素时降低了虫草素的功效，同时培养过程中产量较低，满足不了市场的需求。
技术实现要素：
本发明提供一种高含量虫草素蛹虫草子实体的培养方法养技术。为实现本发明的目的，本发明的技术方案如下：
一种高含量虫草素蛹虫草子实体的培养方法，所述蛹虫草子实体的培养方法为光温胁迫法，所述光温胁迫法按照以下培养步骤进行：
1）、培养基的粉碎：采用工业粉碎机或者榨汁机将培养基粉碎成20-50目；
2）、消毒、冷却、接种：利用巴氏消毒法对粉碎后的培养基进行高温消毒，消毒后冷却至常温，在无菌条件下接入蛹虫草子的菌种；
3）、无光培养：在无光线的箱体中培养6-7天，直至培养基的表面长出菌丝；
4）、弱光、适温培养：室内大棚中光照300lx、温度20℃培养3-6天且每天保持光照16小时，完成转色，诱导菌蕾产生；
5）、中光、适温培养：室内大棚中光照300lx、温度20℃培养14天且每天保持光照12小时，促进子实体生长；
6）、强光、适温培养：室内大棚中光照1000lx、温度22℃培养7天且每天保持光照20小时，诱导虫草素生产；
7)、中光、适温培养：室内大棚中光照500lx、温度22℃培养14天且每天保持光照8小时，子实体生物量大量积累；
8)、强光、高温培养：室内大棚中光照1000lx、温度26℃培养7天且每天保持光照8小时，诱导虫草素生产；
9)、弱光、低温培养：室内大棚中光照300lx、温度18℃培养7天且每天保持光照4小时，诱导虫草素生产；
10）、强光、高温培养：室内大棚中光照1000lx、温度28℃培养7天且每天保持光照18小时，诱导虫草素生产；
11）、收获子实体。
优选的，所述培养基按照重量计，其组分为：花生仁95-105g，生黄豆95-105g，鲜红薯95-105g，大米490-510g，西红柿45-55g，蚕蛹粉45-55g，鲜牛肉45-55g，鲜土豆40-50g，蛹虫草子实体提取液45-55ml，纯净水990-1010ml。
优选的，所述蛹虫草子实体提取液的制备方法为：取新鲜蛹虫草子实体4-6g、纯净水50-60ml进行搅拌，然后用滤网进行过滤即得。
本发明提供一种高含量虫草素蛹虫草子实体的培养方法，培养过程与传统工艺相似，但是通过设定特定的温控值和光照时间，提高了蛹虫草的产量，本发明的培养基中在采用天然原料的情况下提高了蛹虫草子实体的虫草素含量，使提取出的虫草素的药用价值更高。
具体实施方式
本发明所采用的的方案是：
实施例一：
一种高含量虫草素蛹虫草子实体的培养方法，所述蛹虫草子实体的培养方法为光温胁迫法，所述光温胁迫法按照以下培养步骤进行：
1）、培养基的粉碎：采用工业粉碎机或者榨汁机将培养基粉碎成20目；
2）、消毒、冷却、接种：利用巴氏消毒法对粉碎后的培养基进行高温消毒，消毒后冷却至常温，在无菌条件下接入蛹虫草子的菌种；
3）、无光培养：在无光线的箱体中培养6天，直至培养基的表面长出菌丝；
4）、弱光、适温培养：室内大棚中光照300lx、温度20℃培养3天且每天保持光照16小时，完成转色，诱导菌蕾产生；
5）、中光、适温培养：室内大棚中光照300lx、温度20℃培养14天且每天保持光照12小时，促进子实体生长；
6）、强光、适温培养：室内大棚中光照1000lx、温度22℃培养7天且每天保持光照20小时，诱导虫草素生产；
7)、中光、适温培养：室内大棚中光照500lx、温度22℃培养14天且每天保持光照8小时，子实体生物量大量积累；
8)、强光、高温培养：室内大棚中光照1000lx、温度26℃培养7天且每天保持光照8小时，诱导虫草素生产；
9)、弱光、低温培养：室内大棚中光照300lx、温度18℃培养7天且每天保持光照4小时，诱导虫草素生产；
10）、强光、高温培养：室内大棚中光照1000lx、温度28℃培养7天且每天保持光照18小时，诱导虫草素生产；
11）、收获子实体。
在本实施例中，所述培养基按照重量计，其组分为：花生仁100g，生黄豆100g，鲜红薯100g，大米500g，西红柿50g，蚕蛹粉50g，鲜牛肉50g，鲜土豆45g，蛹虫草子实体提取液50ml，纯净水1000ml。
在本实施例中，所述蛹虫草子实体提取液的制备方法为：取新鲜蛹虫草子实体5g、纯净水55ml进行搅拌，然后用滤网进行过滤即得。
蛹虫草子实体的虫草素含量：均值3.5%，最高5.34%，最低2.46%。
实施例二：
一种高含量虫草素蛹虫草子实体的培养方法，所述蛹虫草子实体的培养方法为光温胁迫法，所述光温胁迫法按照以下培养步骤进行：
1）、培养基的粉碎：采用工业粉碎机或者榨汁机将培养基粉碎成35目；
2）、消毒、冷却、接种：利用巴氏消毒法对粉碎后的培养基进行高温消毒，消毒后冷却至常温，在无菌条件下接入蛹虫草子的菌种；
3）、无光培养：在无光线的箱体中培养7天，直至培养基的表面长出菌丝；
4）、弱光、适温培养：室内大棚中光照300lx、温度20℃培养6天且每天保持光照16小时，完成转色，诱导菌蕾产生；
5）、中光、适温培养：室内大棚中光照300lx、温度20℃培养12天且每天保持光照12小时，促进子实体生长；
6）、强光、适温培养：室内大棚中光照1000lx、温度22℃培养6天且每天保持光照20小时，诱导虫草素生产；
7)、中光、适温培养：室内大棚中光照500lx、温度22℃培养12天且每天保持光照8小时，子实体生物量大量积累；
8)、强光、高温培养：室内大棚中光照1000lx、温度26℃培养6天且每天保持光照8小时，诱导虫草素生产；
9)、弱光、低温培养：室内大棚中光照300lx、温度18℃培养6天且每天保持光照4小时，诱导虫草素生产；
10）、强光、高温培养：室内大棚中光照1000lx、温度28℃培养6天且每天保持光照18小时，诱导虫草素生产；
11）、收获子实体。
在本实施例中，所述培养基按照重量计，其组分为：其组分为：花生仁95g，生黄豆95g，鲜红薯95g，大米490g，西红柿45g，蚕蛹粉45g，鲜牛肉45g，鲜土豆40g，蛹虫草子实体提取液45ml，纯净水990ml。
在本实施例中，所述蛹虫草子实体提取液的制备方法为：取新鲜蛹虫草子实体4g、纯净水50ml进行搅拌，然后用滤网进行过滤即得。
实施例三：
一种高含量虫草素蛹虫草子实体的培养方法，所述蛹虫草子实体的培养方法为光温胁迫法，所述光温胁迫法按照以下培养步骤进行：
1）、培养基的粉碎：采用工业粉碎机或者榨汁机将培养基粉碎成50目；
2）、消毒、冷却、接种：利用巴氏消毒法对粉碎后的培养基进行高温消毒，消毒后冷却至常温，在无菌条件下接入蛹虫草子的菌种；
3）、无光培养：在无光线的箱体中培养6天，直至培养基的表面长出菌丝；
4）、弱光、适温培养：室内大棚中光照300lx、温度20℃培养5天且每天保持光照16小时，完成转色，诱导菌蕾产生；
5）、中光、适温培养：室内大棚中光照300lx、温度20℃培养14天且每天保持光照12小时，促进子实体生长；
6）、强光、适温培养：室内大棚中光照1000lx、温度22℃培养7天且每天保持光照20小时，诱导虫草素生产；
7)、中光、适温培养：室内大棚中光照500lx、温度22℃培养14天且每天保持光照8小时，子实体生物量大量积累；
8)、强光、高温培养：室内大棚中光照1000lx、温度26℃培养7天且每天保持光照8小时，诱导虫草素生产；
9)、弱光、低温培养：室内大棚中光照300lx、温度18℃培养7天且每天保持光照4小时，诱导虫草素生产；
10）、强光、高温培养：室内大棚中光照1000lx、温度28℃培养7天且每天保持光照18小时，诱导虫草素生产；
11）、收获子实体。
在本实施例中，所述培养基按照重量计，其组分为：其组分为：花生仁105g，生黄豆105g，鲜红薯105g，大米510g，西红柿55g，蚕蛹粉55g，鲜牛肉55g，鲜土豆50g，蛹虫草子实体提取液55ml，纯净水1010ml。
在本实施例中，所述蛹虫草子实体提取液的制备方法为：取新鲜蛹虫草子实体6g、纯净水60ml进行搅拌，然后用滤网进行过滤即得。
以下是本发明的方案与现有技术相比的有益效果：
1.配方为大米50g，营养液35g（营养液组分为每1000ml含蛋白胨15~20g、葡萄糖15~20g、蚕蛹粉20~30g、甘氨酸20~30g、腺嚓吟2~3g、硫酸镁1~2g、磷酸二氢钾1~2g、酵母粉4~5g，其余为纯净水）的培养基采用采用以下培养方法（1.子实体培养培养基表层形成微小子实体时,在培养基表层再次喷洒一层质量浓度为0.05-0.1%的葡萄糖酸锌溶液,喷洒量以刚好将培养基覆盖为准；2.调整温度为18-20℃,每天光照不少于12小时,照度1500-200lx，培养8-12天；3.培养至第8-12天的培养物的培养温度调至培养温度18-25℃,其它条件不变,进行常规培养）,直到收获子实体。所得子实体中的虫草素含量为0.5-1.0%。而采用本发明所述光温胁迫培养方法所得子实体中的虫草素含量为1.2-1.8%。
2.固体培养基由大米、黑蚂蚁粉和营养液组成,大米、黑蚂蚁粉和营养液的用量比例为40g：0.5g:20ml。固体培养基中的黑蚂蚁粉末是将黑蚂蚁粉碎后过20目筛，该营养液每升中含有20g蛋白胨、20g葡萄糖、1g磷酸二氢钾、0.5g硫酸镁、0.05g维生素，其余为纯净水。采用以下培养方法（1.子实体培养培养基表层形成微小子实体时,在培养基表层再次喷洒一层质量浓度为0.05-0.1%的葡萄糖酸锌溶液,喷洒量以刚好将培养基覆盖为准；2.调整温度为18-20℃,每天光照不少于12小时,照度1500-2000lx，培养8-12天；3.培养至第8-12天的培养物的培养温度调至培养温度18-25℃,其它条件不变,进行常规培养）,直到收获子实体。所得子实体中的虫草素含量为0.6-1.2%。而采用本发明所述光温胁迫培养方法所得子实体中的虫草素含量为1.5-2.5%。
本发明提供一种高含量虫草素蛹虫草子实体的培养方法，培养过程与传统工艺相似，但是通过设定特定的温控值和光照时间，提高了蛹虫草的产量，本发明的培养基中在不添加任何经过化学工艺合成的原料的情况下提高了蛹虫草子实体的虫草素含量，使提取出的虫草素的药用价值更高。
由技术常识可知，本发明可以通过其它的不脱离其精神实质或必要特征的实施方案来实现。因此，上述公开的实施方案，就各方面而言，都只是举例说明，并不是仅有的。所有在本发明范围内或在等同于本发明的范围内的改变均被本发明包含。