本发明涉及一种用于培育铁皮石斛的培养基及其制作方法，特别是一种组培苗生长好的铁皮石斛培养基及其制作方法。
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铁皮石斛别称铁皮兰、吊兰、云南铁皮、铁皮吊兰，是兰科石斛属多年生草本植物，铁皮石斛是石斛类药材的上品，素有“中华仙草-药中黄金”之美称，以茎入药，含有多糖、石斛碱、生物碱等有效成分，具有滋阴清热、生津益胃、润喉明目等功效，在抗肿瘤、提高人体免疫力、治疗胃肠道疾病、抗衰老、抗氧化、抗血小板聚集、降低血糖、治疗白内障等方面均有良好疗效。铁皮石斛大多生长在炎热潮湿的热带、亚热带的岩石缝隙中，繁殖率很低，自然野生状态下繁殖率只有10％-17％；果实为蒴果，种子小而多，种内胚发育不全或不成熟，胚胎少胚乳,自然结实率低于5％，在自然条件下须与兰菌共生才能萌发，因此无法在大田或苗床上播种，很难生产足够的实生苗用于栽培。铁皮石斛对生长环境要求苛刻，成苗困难，采用传统的分株、扦插等人工繁殖方法进行繁殖，增殖速度非常低，目前组织培养是铁皮石斛增殖扩繁的主要方法。关于铁皮石斛的组织培养已有相关报道，但还存在组培苗质量难以保证等问题，极大地制约了铁皮石斛生产规模的扩大。技术实现要素：本发明的目的，是提供一种铁皮石斛培养基及其制作方法，用本发明培养基培养铁皮石斛时，组培苗生长好，组培苗质量易保证，且生长值和增殖率高,且培养基中不含激素。本发明是这样实现的。一种促进生长的铁皮石斛培养基，按重量份计算，由下述原料组成，前述的铁皮石斛培养基，按重量份计算，由下述原料组成，前述的铁皮石斛培养基，按重量份计算，由下述原料组成，前述的铁皮石斛培养基的制备方法，包括下述步骤：(1)取马铃薯蒸熟，剁成土豆泥，得a品；(2)将蔗糖、硫酸锌、钼酸铵和硫酸亚铁在室温下加入2-3倍量水混匀，得b品；(3)将香蕉捣碎后加入a品中混匀，得c品；(4)将琼脂加水直至其完全溶解，得d品；(5)将椰子粉加2-5倍水溶解，得e品(6)将b、c、d和e品装于组培瓶中混匀，在高温蒸汽下灭菌20-30min，冷却即得。前述的铁皮石斛培养基的制备方法中，所述的步骤(6)为：将b、c、d和e品装于组培瓶中混匀，之后在高温蒸汽下灭菌20-30min，所述的蒸汽温度120-130℃。申请人对本发明进行了大量的实验研究，部分实验如下：实验例1生长和增殖考察.1材料与方法1.1材料1.1.1铁皮石斛t4品种(原种采自于云南广南县)组培苗。1.1.2本发明培养基：按实施例1进行制作；1.1.3对比培养基：培养基原料中不含椰子粉、钼酸铵、硫酸锌和硫酸亚铁，其余制作方法同实施例1。2方法2.1培养试验取轻度黄花扭曲的组培苗，去掉根兜后，每个培养基接种8瓶，每瓶接种12株，30天后观察，统计组培苗的生长情况。2.2培养条件各试验组在白天温度(21士2)℃、夜间温度(16±2)℃、光照1800-2000lx、光照时间12h/d及通风良好的组培培养室中培养。2.3统计方法生长值(cm)＝统计时平均株高-继代时平均株高；增殖率(％)＝(统计时苗总数一继代时苗总数)/初始苗总数×100％。3结果3.1对铁皮石斛组培苗生长的影响经50d培养后的生长情况见表1。表1对组培苗生长的影响培养基生长值/cm增殖率/％对比培养基1.20186.2本发明培养基1.55226.3由表可知，本发明培养基组生长值和增值率均高于对比培养基组。实施例2.壮苗生根及移栽成活率考察1材料与方法1.1材料1.1.1铁皮石斛t4品种(原种采自于云南广南县)组培苗。1.1.2本发明培养基：按实施例1进行制作；1.1.3对比培养基：培养基原料中不含椿皮、琥珀、黄芩、杜仲和肉苁蓉，其余制作方法同实施例1。2方法2.1以上述培养基设2个处理，及本发明培养基组和对比培养基组，每处理接种25瓶，置于培养温度为(25±2)℃、光照度为1500lx、光照时间15h/d条件下培养。培养6周后，统计组培苗的生根数、根长、株高等。2.2选取在壮苗生根培养基中生长状况良好、株高4-5cm、根长4cm、具有5条长根的组培苗移栽。首先将组培苗移至室外通风处炼苗1周左右，炼苗温度为22-25℃，将组培瓶盖逐日拧松，移栽前1d揭盖，使组培苗逐渐适应自然环境。将培养基与小苗一起取出，用水洗净。设2个处理，及本发明培养基组和对比培养基组，移栽后1周、6周分别统计组培苗的成活率。3结果3.1组培苗的生根数、根长、株高结果见表2。表26周后组培苗的生长情况培养基株高/cm生根率/％根长/cm根数/条生长情况对比培养基3.2932.22.5++++本发明培养基4.01003.44.5+++++注：“++++”表示组培苗生长状况较好，交瘦弱，新根少但根长，叶片细长，呈浅绿色；“+++++”表示组培苗生长状况优良，交粗壮，根较粗且长，根较多，有部分气生根长出，叶片厚大，呈深绿色。由表可知，接种6周后，对照组处理下组培苗平均根长为2.2cm，平均根数为2.5条，平均株高为3.2cm。本发明组处理下培苗平均根长为3.4m，平均根数为4.5条，平均株高为4.0cm，丛生芽较少且生根率较高，组培苗叶片增大，呈长椭圆形，叶片变厚，呈深绿色，部分组培苗还长出较长的气生根。由此可见，两种培养基中，组培苗在本发明培养基中生长状态最佳，生根率可达100％，根长、根数、叶片形态更适于移栽。与现有技术相比，用本发明培养基培养铁皮石斛时，组培苗生长好，组培苗质量易保证，且生长值和增殖率高,且培养基中不含激素。具体实施方式实施例1配方：马铃薯100kg、蔗糖12kg、椰子粉24kg、琼脂26kg、钼酸铵15kg、硫酸锌3kg、硫酸亚铁7kg、香蕉30kg。制作工艺：(1)取马铃薯蒸熟，剁成土豆泥，得a品；(2)将蔗糖、硫酸锌、钼酸铵和硫酸亚铁在室温下加入2-3倍量水混匀，得b品；(3)将香蕉捣碎后加入a品中混匀，得c品；(4)将琼脂加水直至其完全溶解，得d品；(5)将椰子粉加2-5倍水溶解，得e品(6)将b、c、d和e品装于组培瓶中混匀，之后在高温蒸汽下灭菌20-30min，所述的蒸汽温度120-130℃。实施例2配方：马铃薯90kg、蔗糖8kg、椰子粉20kg、琼脂20kg、钼酸铵12kg、硫酸锌1kg、硫酸亚铁5kg、香蕉25kg。制作工艺：(1)取马铃薯蒸熟，剁成土豆泥，得a品；(2)将蔗糖、硫酸锌、钼酸铵和硫酸亚铁在室温下加入2-3倍量水混匀，得b品；(3)将香蕉捣碎后加入a品中混匀，得c品；(4)将琼脂加水直至其完全溶解，得d品；(5)将椰子粉加2-5倍水溶解，得e品(6)将b、c、d和e品装于组培瓶中混匀，在高温蒸汽下灭菌20-30min，冷却即得。实施例3配方：马铃薯110kg、蔗糖18kg、椰子粉30kg、琼脂30kg、钼酸铵18kg、硫酸锌5kg、硫酸亚铁10kg、香蕉35kg。制作工艺：(1)取马铃薯蒸熟，剁成土豆泥，得a品；(2)将蔗糖、硫酸锌、钼酸铵和硫酸亚铁在室温下加入2-3倍量水混匀，得b品；(3)将香蕉捣碎后加入a品中混匀，得c品；(4)将琼脂加水直至其完全溶解，得d品；(5)将椰子粉加2-5倍水溶解，得e品(6)将b、c、d和e品装于组培瓶中混匀，在高温蒸汽下灭菌20-30min，冷却即得。当前第1页12