一种秦岭岩白菜的无性繁殖方法与流程

技术领域：

本发明属于生物学领域，涉及秦岭岩白菜，具体来说是一种秦岭岩白菜的无性繁殖方法。

背景技术：
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秦岭岩白菜(bergeniascopulosat.p.wang)为虎耳草科岩白菜属多年生草本，该属植物全世界有10种，我国产7种，秦岭岩白菜其根状茎在陕西眉县及秦岭山区称为盘龙七，不仅是我国3个特有种之一，而且为本属最原始的种。国内野生种多分布于陕西、四川及甘肃东南部，进人冬季，在原产地多枯萎落叶，但开花较早，花朵粉色，观赏价值高。全草含有岩白菜素，根茎含药量比较高，已被《中华本草》和《陕西中草药》所收载，是陕西民间常用药，涩、味苦、平；具有补脾健胃，收涩固肠，除湿利水，活血的功效；主治急慢性肠胃炎、浮肿、秃疮、疥癣等，是治疗呼吸系统疾病的特效药。近些年，学者们对其开花特性、传粉适应性及繁殖系统进行了分析研究，认为其存在自交退化现象，故自然结实率极低，种子萌发率不高，生长缓慢。

课题组于2012年建立了秦岭岩白菜快繁技术体系，并率先在国内实现了标准化生产，保护了野生资源，生产出的优质种苗在新疆、河南、福建、浙江等地进行了示范种植，收到了良好的社会效益与生态效益。近几年材料费、人工费持续高涨，使得组培生产种苗的费用也居高不下，为了节约生产成本，又能提供优质种苗的目的，课题组就秦岭岩白菜进行了系统栽培，并统计了一年生组培苗的分株芽苗数，利用分株芽苗培育生根及带芽根茎扦插等无性繁殖方式，使大面积人工栽培和产业化开发成为可能。

技术实现要素：
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本发明的目的在于提供一种秦岭岩白菜的无性繁殖方法，所述的这种秦岭岩白菜的无性繁殖方法要解决现有技术中野生秦岭岩白菜繁殖率低的技术问题，又降低组培生产中费用过高的现状，使大面积人工栽培和产业化开发成为可能。

本发明提供了一种秦岭岩白菜的无性繁殖方法，包括一个选择芽苗的步骤，如果所述的芽苗高度超过5cm，则保留0.1～1cm的根茎基部并修切平整，根茎基部用0.1～2.0mg·l^-1iba浸泡15～50s后，再种植于混合基质中进行培育；如果芽苗的高度低于5cm，保留于原根茎上，进行根茎穗条扦插，将根茎穗条的长度修切为1～6cm，于3～7月或者9～11月扦插于混合基质中；所述的混合基质由珍珠岩、草炭土和腐殖质组成，种前先浇透水，然后用塑料薄膜搭拱棚封闭保湿，保持光照度在20001x～30001x，每天10～14h光照时间，棚内温度为20～28℃，施以肥水管理，培育2～3个月。。

进一步的，芽苗根茎基部可以保留0.1～1cm区间的任一长度；iba可以为0.1～2.0mg·l^-1区间的任一浓度；iba浸泡时间可以为15～50s区间的任一时间。

进一步的，根茎穗条的长度可以修切为1～6cm区间的任一长度；可以在3～7月或者9～11月区间任一月份里进行扦插。

进一步的，混合基质使用前，先用水浇透，种植后后浇一遍1500x的多菌灵，种后缓苗前补水，缓苗后干透浇透，并延长光照来培育健壮种苗，浇肥原则是两遍肥水之间加一遍清水，其ec控制在250～500um/cm之间，5～7天施一遍杀菌药。

进一步的，所述的肥料由肥料宝力丰和铵钙镁组成，所述的宝力丰和铵钙镁的质量为7:3。

进一步的，所述的拱棚内光照度可以保持在20001x～30001x区间之间的任一强度；光照时间可以保持在10～14h区间之间的任一时间，温度可以保持在20～128℃区间之间的任一温度。

进一步的，当种苗根部形成土球，高度为10cm时，移植入口径为8cm的小钵中进行再次培育。

本发明和已有技术相比，其技术进步是积极和明显的。生根培育中，生根率最高可达100％。扦插培育中，成活率最高可达90％。本发明利用芽苗培育生根或者根茎穗条扦插等无性繁殖方式培育秦岭岩白菜，种苗成本降低，使大面积人工栽培和产业化开发成为可能，保护了野生资源。

附图说明：

图1为秦岭岩白菜10棵一年生组培苗芽苗总数的照片。

图2为秦岭岩白菜芽苗生根情况的照片。

图3为秦岭岩白菜根茎的照片。

图4为秦岭岩白菜根茎扦插的照片。

图5为秦岭岩白菜根茎扦插成活种苗的照片。

具体实施方式：

下述实施方式统计数据时，每种处理调查20个，每种处理重复3次。统计芽苗生根率、根茎扦插成活率。芽苗生根率＝生根株数/接种数，根茎扦插成活率＝成活数/扦插数。

采用excel2003和dps14.5数据处理系统对数据进行统计分析。采用完全随机单因素试验统计法和lsd法进行方差分析和多重比较(α＝0.05)

实施例1

芽苗生根培育

1.1梯度设计

芽苗生根培育时，采用naa和iba处理，设置为0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0计6种浓度梯度；浸泡时间设置为10s、15s、20s、30s、40s、50s六个梯度；芽苗基部修切为0.1、0.2、0.5、0.8、1.0cm五种长度。

1.2培养条件

芽苗生根培育时，在温室里进行，操作后浇透水，然后用塑料薄膜搭拱棚封闭保湿，适时加盖草帘或遮阳网遮阴降温，保持光照度在20001x～30001x，每天10～14h光照时间，棚内温度为20～28℃。

1.3芽苗培育

表1不同生长激素及其浓度对芽苗生根的影响

*表中数据为平均值±标准误差(n＝3)，同列数字后不同的字母表示0.05水平差异显著性(p﹤0.05)，下同。

高度超过5cm的芽苗进行生根培育，保留1cm的基部并修切平整，用不同浓度生长素处理20s后，再种植于配制好的混合基质中，施以肥水管理，一个月后统计生根率，不同激素及其浓度对芽苗生根的影响差异显著(表1)。不管是采用naa还是iba处理，随着激素浓度的升高，生根率也随着提高，当浓度为1.0mg·l^-1时，生根率达到最高，分别为65％、75％，之后生长素浓度升高，反而对生根有抑制效果，生根率下降。筛选iba1.0mg·l^-1做为最佳处理浓度，与其它处理比较，差异显著。

采用1.0mg·l^-1iba浸泡芽苗基部，浸泡时间设置为10s、15s、20s、30s、40s、50s六个梯度。结果显示，浸泡时间对生根率影响显著，短时速浸，生根率不高，随着浸泡时间延长，生根率快速提高，浸泡时间为30s时，生根率达最高95％(表2)，与其它处理比较，差异显著。综合激素种类、浓度以及浸泡时间，筛选出1.0mg·l^-1iba浸泡30s为最佳处理方式。

表2不同浸泡时间对芽苗生根的影响

采用1.0mg·l^-1iba浸泡芽苗基部30s，芽苗基部修切为0.1、0.2、0.5、0.8、1.0cm五种长度。结果显示，芽苗基部根茎越长，生根率越高，当长度为0.5cm时，生根率达到最高100％，与低于0.5cm的两种处理比较，差异显著(表3)。根据试验结果以及节约根茎药材考虑，芽苗基部的最佳保留长度为0.5cm。

表3不同芽苗基部长度对芽苗生根的影响

实施例2根茎扦插

高度低于5cm的芽苗，单独切割下来不容易生根成活，宜保留于原根茎上，进行根茎扦插，才能成活。

2.1试验设计

根茎扦插时，修切为1cm、2cm、3cm、4cm、5cm、6cm六种长度；扦插时间设置为1～12月等不同月份。

2.2培养条件

根茎扦插时，在温室里进行，操作后浇透水，然后用塑料薄膜搭拱棚封闭保湿，适时加盖草帘或遮阳网遮阴降温，保持光照度在2000～30001x左右，10～14h光照时间，棚内温度为20～28℃左右。

2.3根茎扦插

根茎修切为1cm、2cm、3cm、4cm、5cm、6cm六种长度，发现根茎长度低于4cm时，对于扦插影响显著(表4)。当根茎长度为1cm时，扦插成活率仅为15％，而当根茎长度达到4cm及以上时，扦插成活率可以达到100％，这与根茎积累营养多少紧密相关。为了降低种植成本提高药材产量，根茎扦插时取4cm即可。

表4不同根茎长度对扦插成活率的影响

取4cm根茎扦插时，季节不同，成活率也有差异，不同月份扦插发现(表5)，3～7月、9～11月，扦插成活率在90％以上，与其它月份比较，差异显著；而8月份雨水比较多的时候，根茎出现部分腐烂现象，影响成活率略低为85％；而在12月至明年的2月期间，成活率甚至降低到55％，这与温度低，根茎发新根慢有直接关系。

表5不同月份扦插对成活率的影响

实施例3基质及管理

秦岭岩白菜芽苗生根培养和根茎穗条扦插都采用透气性良好的进口草炭，草炭长度2mm左右，以珍珠岩:草炭土:腐殖质＝2:1:1的比例调制成混合基质，种植前2d浇透，种后浇一遍1500x的多菌灵。种后缓苗前补小水，哪里干补哪里，以当天蒸发完为佳；缓苗后干透浇透，并适当延长光照来培育健壮种苗。浇肥原则是两遍肥水之间加一遍清水，其ec控制在250～500um/cm之间，肥料按宝力丰：铵钙镁＝7:3的比例混合。5～7d施一遍杀菌药，及时防治根蛆。养护至2个月时，不论是芽苗还是根茎扦插苗，根部已经形成土球，高度为10cm，此时可以作为成品苗发售。2个月以上的生根苗需要移植入口径直径为8cm的小钵中，以利于后期生长。

结论:

岩白菜芽苗生根培养或者根茎扦插成本低，管理较为简单，这样就形成了通过组培来生产前期母本苗，后期通过芽苗生根培养或者根茎扦插繁殖的生产链条，为大规模种植开发提供了保障和前提。