本发明涉及天然抗菌物质的提取，具体地说，涉及一种适合医用抹布的天然抗菌提取物及其制备方法和应用。
背景技术：
：抹布是日常生活中擦拭器物用的布，在家庭、宾馆、办公场所和医院、电影院等公共场所，抹布的使用无处不在。抹布的主要作用就是去除器物表面的灰尘、污渍等，因此会沾染大量的细菌等病原微生物，如得不到彻底清洁，抹布内的病原微生物则会大量繁殖，使抹布成为传染源，在再次使用过程中造成交叉传播，十分不利于人体健康。尤其在医院这样的场所，本身就有大量携带病菌的患者，且人流量很大，座椅、电梯扶手等界面都存在大量致病菌，尤其要注意保持抹布的清洁卫生，预防交叉传播，还要注意对这些界面进行经常性的消毒处理，及时清除病源，防止进一步传播。因此，如果能在抹布上涂敷或浸入抗菌药液等，则既能起到对抹布进行消毒的作用，还能在使用过程中对擦拭的表面进行消毒。目前医院常规使用的消毒剂，如84消毒液，对人的呼吸道、皮肤等存在刺激性，并不适合在擦拭过程中广泛使用。动植物中存在大量的天然抗菌物质，如茶多酚、甘草多糖等。动植物天然提取物中往往药效成分种类多，不同药效成分能发挥协同等交互作用，在较小剂量下就可获得满意的抗菌效果，尤其是动植物天然抗菌物质安全性好，对人体和环境不存在危害或副作用极小，因此安全环保。专利文献cn101085795a，公开日2007.12.12，公开了从中药金银花或其基源植物忍冬或同属其他植物中制备植物提取物的方法，以及由该方法制备的金银花提取物，和含有该提取物的药物组合物，所述组合物的有效成分为开联番木鳖苷酸及其衍生物类化合物，该方法包括水或醇提取，提取物经沉淀和色谱方法精制，如果需要还可用凝胶柱色谱进一步纯化，得到的提取物中开联番木鳖苷酸及其衍生物的含量在50％以上，优选70％以上，用该发明的制备方法得到的金银花提取物具有解热、镇痛、消炎、抗菌和抗病毒的活性，可用于治疗高热症、疼痛和感染性疾病，尤其是病毒性肺炎、病毒性感冒和艾滋病等疾病。专利文献cn102727611a，公开日2012.10.17，公开了一种具有抗菌止痒修复功效的外用中药组合物、制剂及制备方法，所述组合物由下述重量份配比的原料药组成：丁香20～50重量份、丹参20～50重量份、艾叶20～50重量份、山楂10～20重量份、沙棘10～20重量份、白蒺藜10～20重量份、青蒿10～20重量份、虎杖10～20重量份，制备方法具体步骤如下：(1)按照所述重量份配比称取各原料药；(2)其中丁香、丹参、山楂和沙棘混合，加入体积百分比为80％-95％的乙醇，料液比g/ml为1∶20～1∶30；提取温度为40～70℃，提取时间为0.5～3h得醇提液；艾叶、白蒺藜、青蒿和虎杖混合，加水提取，料液比为1∶20～1∶30；提取温度为50～90℃，提取时间为1～4h得水提液；(3)将步骤(2)得到的醇提液和水提液分别过滤，然后两种提取液混合均匀浓缩至1～5g/ml得浓缩液；(4)浓缩液与甘油混合得混合液，浓缩液与甘油的体积比为1∶1～2∶1；(5)将混合液过滤，得活性提取物。然而，研制更多的天然抗菌提取物仍然是十分必要的，尤其还未见适于在医用抹布上使用，抗菌效果突出，便于制备、成本低的天然抗菌提取物。技术实现要素：本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种适合医用抹布的天然抗菌提取物。本发明的再一的目的是，提供所述的天然抗菌提取物的制备方法。本发明的另一的目的是，提供所述的天然抗菌提取物的用途。本发明的第四个目的是，提供一种医用抹布。为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：一种适合医用抹布的天然抗菌提取物，所述的天然抗菌提取物的制备方法包括以下步骤：a)原料预处理：将以下原料洗净，晾干，制成8-10cm小块：金银花、黄花蒿、薄荷、柏树叶；b)低温蒸馏：称取原料残渣，加入去离子水浸泡3-5h，60-80℃加热蒸馏提取1-3h；c)回收：蒸馏完毕后，以乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至400-600毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为35-40℃，同时进行旋转，速度为50～160转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物。优选地，步骤a)中各原料的重量份配比为：金银花15-25份、黄花蒿15-25份、薄荷4-6份、柏树叶4-6份。更优选地，步骤a)中各原料的重量份配比为：金银花20份、黄花蒿20份、薄荷5份、柏树叶5份。优选地，步骤b)中所述的去离子水与原料残渣的料液比为10-40g:250-300ml。为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：所述的天然抗菌提取物的制备方法，包括以下步骤：a)原料预处理：将以下原料洗净，晾干，制成8-10cm小块：金银花、黄花蒿、薄荷、柏树叶；b)低温蒸馏：称取原料残渣，加入去离子水浸泡3-5h，60-80℃加热蒸馏提取1-3h；c)回收：蒸馏完毕后，以乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至400-600毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为35-40℃，同时进行旋转，速度为50～160转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物。优选地，步骤a)中各原料的重量份配比为：金银花15-25份、黄花蒿15-25份、薄荷4-6份、柏树叶4-6份。更优选地，步骤a)中各原料的重量份配比为：金银花20份、黄花蒿20份、薄荷5份、柏树叶5份。优选地，步骤b)中所述的去离子水与原料残渣的料液比为10-40g:250-300ml。为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：如上任一所述的天然抗菌提取物在制备抗菌药物中的应用。作为一个具体例，所述的抗菌药物是抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或白色念珠菌的药物。作为一个具体例，所述的抗菌药物是作用于人体的药物或作用于环境中以除菌的药物，所述作用于人体的药物包括外用药物和内服药物。为实现上述第四个目的，本发明采取的技术方案是：一种医用抹布，所述的医用抹布含有如上任一所述的天然抗菌提取物。作为一个具体例，所述的医用抹布可以是棉质纱布、亚麻布、无纺布材质，但不仅限于此。本文中，所述的金银花又名忍冬，学名：lonicerajaponica；所述的黄花蒿，学名：artemisiaannualinn.，是菊科蒿属一年生草本植物；所述的薄荷学名menthahaplocalyxbriq.，所述的柏树叶学名platycladusorientalis(l.)francoptmxjjkmsc，为柏科侧柏属的一种常绿乔木，以其叶和细枝入药。本发明优点在于：1、本发明从金银花、黄花蒿、薄荷、柏树叶中提取得到具有抗菌活性的物质，抑菌实验结果表明，该天然抗菌提取物的抑菌率在90.0％以上，效果十分突出；2、各原料均种植范围大，来源广泛，价格低，因此本发明的天然抗菌提取物成本低；3、本发明天然抗菌提取物的制备方法采用低温蒸馏，步骤简单，对设备要求低，使用的溶剂少，污染小；4、本发明将提取的天然抗菌提取物用在医用抹布上，适于在医院场合使用，不仅能对抹布进行杀菌消毒，还可在抹布使用过程中对擦拭的界面进行杀菌消毒，有效减少医院场合病菌的繁殖和传播，具有重要的实际意义。附图说明附图1是实施例2的天然抗菌提取物气相色谱-质谱联用谱图。具体实施方式下面结合附图对本发明提供的具体实施方式作详细说明。实施例1本发明天然抗菌提取物(一)a)植物材料预处理：将以下重量份配比新鲜植物材料，用去离子水洗净，置于阴凉处晾干，用剪子剪成8-10cm小块：金银花25份、黄花蒿15份、薄荷6份、柏树叶4份；b)低温蒸馏：称取剪碎的植物残渣10g，放于500ml圆底烧瓶中，加入去离子水300ml浸泡3h，60℃加热蒸馏提取1h；c)回收：蒸馏完毕后，以少量乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至600毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为40℃，同时进行旋转，速度为160转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物，精密定量，4℃冰箱保存备用。实施例2本发明天然抗菌提取物(二)a)植物材料预处理：将以下重量份配比新鲜植物材料，用去离子水洗净，置于阴凉处晾干，用剪子剪成8-10cm小块：金银花20份、黄花蒿20份、薄荷5份、柏树叶5份；b)低温蒸馏：称取剪碎的植物残渣10g，放于500ml圆底烧瓶中，加入去离子水300ml浸泡4h，70℃加热蒸馏提取2h；c)回收：蒸馏完毕后，以少量乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至500毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为35℃，同时进行旋转，速度为100转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物，精密定量，4℃冰箱保存备用。实施例3本发明天然抗菌提取物(三)a)植物材料预处理：将以下重量份配比新鲜植物材料，用去离子水洗净，置于阴凉处晾干，用剪子剪成8-10cm小块：金银花15份、黄花蒿25份、薄荷4份、柏树叶6份；b)低温蒸馏：称取剪碎的植物残渣10g，放于500ml圆底烧瓶中，加入去离子水250ml浸泡5h，80℃加热蒸馏提取3h；c)回收：蒸馏完毕后，以少量乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至400毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为35℃，同时进行旋转，速度为50转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物，精密定量，4℃冰箱保存备用。实施例4本发明天然抗菌提取物(四)a)植物材料预处理：将以下重量份配比新鲜植物材料，用去离子水洗净，置于阴凉处晾干，用剪子剪成8-10cm小块：金银花20份、黄花蒿20份、薄荷5份、柏树叶5份；b)低温蒸馏：称取剪碎的植物残渣40g，放于500ml圆底烧瓶中，加入去离子水300ml浸泡3h，60℃加热蒸馏提取1h；c)回收：蒸馏完毕后，以少量乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至600毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为40℃，同时进行旋转，速度为160转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物，精密定量，4℃冰箱保存备用。实施例5本发明天然抗菌提取物(五)a)植物材料预处理：将以下重量份配比新鲜植物材料，用去离子水洗净，置于阴凉处晾干，用剪子剪成8-10cm小块：金银花15份、黄花蒿25份、薄荷4份、柏树叶6份；b)低温蒸馏：称取剪碎的植物残渣40g，放于500ml圆底烧瓶中，加入去离子水300ml浸泡3h，60℃加热蒸馏提取2h；c)回收：蒸馏完毕后，以少量乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至600毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为40℃，同时进行旋转，速度为160转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物，精密定量，4℃冰箱保存备用。实施例6本发明天然抗菌提取物(六)a)植物材料预处理：将以下重量份配比新鲜植物材料，用去离子水洗净，置于阴凉处晾干，用剪子剪成8-10cm小块：金银花15份、黄花蒿25份、薄荷4份、柏树叶6份；b)低温蒸馏：称取剪碎的植物残渣40g，放于500ml圆底烧瓶中，加入去离子水300ml浸泡4h，70℃加热蒸馏提取3h；c)回收：蒸馏完毕后，以少量乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至500毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为35℃，同时进行旋转，速度为100转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物，精密定量，4℃冰箱保存备用。对比例1a)植物材料预处理：将以下重量份配比新鲜植物材料，用去离子水洗净，置于阴凉处晾干，用剪子剪成8-10cm小块：金银花25份、黄花蒿4份、薄荷6份、柏树叶15份；b)低温蒸馏：称取剪碎的植物残渣10g，放于500ml圆底烧瓶中，加入去离子水300ml浸泡3h，60℃加热蒸馏提取1h；c)回收：蒸馏完毕后，以少量乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至600毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为40℃，同时进行旋转，速度为160转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物，精密定量，4℃冰箱保存备用。对比例2a)植物材料预处理：将以下重量份配比新鲜植物材料，用去离子水洗净，置于阴凉处晾干，用剪子剪成8-10cm小块：金银花20份、艾草20份、薄荷5份、柏树叶5份；b)低温蒸馏：称取剪碎的植物残渣10g，放于500ml圆底烧瓶中，加入去离子水300ml浸泡4h，70℃加热蒸馏提取2h；c)回收：蒸馏完毕后，以少量乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至500毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为35℃，同时进行旋转，速度为100转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物，精密定量，4℃冰箱保存备用。对比例3a)植物材料预处理：将以下重量份配比新鲜植物材料，用去离子水洗净，置于阴凉处晾干，用剪子剪成8-10cm小块：金银花25份、黄花蒿15份、薄荷6份、柏树叶4份；b)低温蒸馏：称取剪碎的植物残渣10g，放于500ml圆底烧瓶中，加入去离子水300ml浸泡3h，60℃加热蒸馏提取1h；c)回收：蒸馏完毕后，以少量乙醚冲洗冷凝管，待充分分层后，收集乙醚层，采用旋转蒸发仪，减压至600毫米汞柱，用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度为45℃，同时进行旋转，速度为160转/分，挥干乙醚得黄色油状物即为所述的天然抗菌提取物，精密定量，4℃冰箱保存备用。实施例7各天然抗菌提取物的抗菌效果验证使用奎因法检测抗菌织物的抗菌效果。1实验材料实施例1-6和对比例1-3的天然抗菌提取物。菌株：大肠杆菌atcc8739、金黄色葡萄球菌atcc25923、白色念珠菌atcc10231，购于上海研生实业有限公司。2实验方法2.1准备抗菌材料分别取实施例1-6和对比例1-3的天然抗菌提取物1ml，滴在高温消毒后抹布(棉质纱布)上(尺寸：2.5cm*2.5cm)，另外取空白抹布(棉质纱布)和标准空白试样(滤纸)，尺寸同上。2.2接种在空白培养皿里，铺好抗菌抹布、空白抹布、标准空白试样，将标准菌液(1*105cfu/ml)100-200μl滴在抹布上或空白试样上；放置于生化培养箱中干燥；将干燥的式样取出，放置于琼脂培养基上，贴好，再倒置半固体培养基均匀覆盖式样。2.3培养计数在培养箱中放置48小时，37℃左右误差不超过1℃，计数菌落数，计算抑菌率。上述实验设立3次平行实验，取平均值，以免实验误差。3实验结果实施例1-6和对比例1-3制备的天然抗菌提取物对各菌株的抗菌效果见表1-3。从结果可以看出，实施例1-6制备的天然抗菌提取物对常见的易于接触传染的致病菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌有显著的抑制作用，抑菌率均在90.0％以上。对比例1-3制备的天然抗菌提取物对各菌株的抗菌效果均显著弱于实施例1-6(p<0.05)，表明植物材料的选择和提取步骤中去除乙醚的温度设置对于抗菌活性物质的种类和活性有一定的影响。表1各天然抗菌提取物对大肠杆菌的抗菌作用组别标准空白菌落空白抹布菌落*抑菌抹布菌落抑菌率(％)实施例1>200>2001294.0实施例2>200>200896.0实施例3>200>2002090.0实施例4>200>2001592.5实施例5>200>2001294.0实施例6>200>2001194.5对比例1>200>2007761.5对比例2>200>2008358.5对比例3>200>2006567.5表2各天然抗菌提取物对金黄色葡萄球菌的抗菌作用组别标准空白菌落空白抹布菌落*抑菌抹布菌落抑菌率(％)实施例1>200>200796.5实施例2>200>200896.0实施例3>200>200597.5实施例4>200>200995.5实施例5>200>200995.5实施例6>200>2001095.0对比例1>200>2008557.5对比例2>200>2007662.0对比例3>200>2007363.5表3各天然抗菌提取物对白色念珠菌的抗菌作用注：以上菌落数为每平方厘米菌落数量，当菌落数大于200时，抑菌率计算中，空白抹布菌落数以200计。实施例8天然抗菌提取物的化学成分检测检测方法：美国安捷伦公司7890a-5975c气相色谱-质谱联用仪(gc-ms)；色谱柱：db-wax(30m×0.25mm×0.25μm)；进样量：250ml；进样温度：260℃；分流比：无分流；载气：氦气(99.999％)；流量：1ml/min；柱温：40℃保持5min，以5℃/min升至250℃，保持5min；接口温度：260℃；离子源温度：230℃；四级杆温度：150℃；电离方式：ei+，70ev；检测器电压：2200v；扫描方式：全扫描；质量范围：20～400；nist2011谱库。检测结果：实施例2制备的天然抗菌提取物中各主要成分及其相对含量和出峰时间见表4。表4天然抗菌提取物中主要成分及其相对含量和出峰时间主要成分相对含量(％)出峰时间(min)环己烷单萜衍生物(樟脑)13.5121桃金娘烯醇5.98275,5-二甲基-1,3-己二烯11.5921环戊烯基团4.6125冰片烯3.5523桉油精5.5212庚二烯3.9118以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。当前第1页12