本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种月季愈伤组织的诱导培养基及其诱导方法。
背景技术：
月季是我国最重要的景观植物，在鲜切花生产与应用中占有重要位置，组织培养技术是在人为创造的无菌条件下将植物的离体器官（如根、茎、叶、茎段、原生质体）、组织或细胞置于培养基内，并放在适宜的环境中，进行连续培养以获得细胞、组织或个体的技术。转基因技术是向植物基因片段中导入目的基因培育出转基因新品系，转基因技术为获得抗逆性强、花色特异的月季新品系提供了可能，而进行转基因的前提是诱导出适宜的愈伤组织，然而在愈伤组织的诱导与继代过程中，现有的诱导方法对愈伤组织的诱导率低，诱导的愈伤组织数量少，质地不理想，生长势弱，在继代过程中会逐渐死亡，无法诱导月季外植体产生愈伤组织，因此现有技术需要进一步的改进。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种诱导率高，诱导效果好的月季愈伤组织的诱导培养基及其诱导方法。
基于上述目的，本发明采取如下技术方案：
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素2,4-d、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素2,4-d2.4-2.6mg/l，蔗糖18-32g/l和琼脂6-8g/l。
进一步的，所述的诱导培养基中还添加激素6-ba，所述的6-ba为0.9-1.1mg/l。
进一步的，所述的诱导培养基中还添加激素tdz，所述的tdz为0.4-0.6mg/l。
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素naa、激素kt、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素naa1.9-2.1mg/l，激素kt1.4-1.6mg/l，蔗糖18-32g/l和琼脂6-8g/l。
进一步的，使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，并对其进行常规预处理；
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度24-26℃、光照强度2000-3000lx、光照11-13h/d、ph为5.7-5.9，培养25-30d后产生初始愈伤组织，45-50d后产生大量胚性愈伤组织。
进一步的，所述的选取月季的茎段为1.5-2cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.25-0.5cm2。
进一步的，所述的月季外植体的预处理为：将选取的月季外植体，先使用流水冲洗1-2h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒28-32s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒7-9min，再使用无菌水冲洗3-4次。
进一步的，所述的乙醇的质量浓度为70%-75%，所述的hgcl2的质量浓度为0.05-0.15%。
采用本发明所述方法，可快速获得大量月季愈伤组织，相对于现有的诱导方法，其诱导率高，诱导的愈伤组织数量多，质地好，生长旺盛。
具体实施方式
实施例1
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素2,4-d、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素2,4-d2.4mg/l，蔗糖18g/l和琼脂6g/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为1.5cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.25cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗1h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒28s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒7min，再使用无菌水冲洗3次，所述的乙醇的质量浓度为70%%，所述的hgcl2的质量浓度为0.05%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度24℃、光照强度2000lx、光照11h/d、ph为5.7，培养25d后产生初始愈伤组织，45d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例2
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素2,4-d、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素2,4-d2.5mg/l，蔗糖30g/l和琼脂7g/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为1.75cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.375cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗1h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒30s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒8min，再使用无菌水冲洗3次，所述的乙醇的质量浓度为72.5%，所述的hgcl2的质量浓度为0.1%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度25℃、光照强度2500lx、光照12h/d、ph为5.83，培养27.5d后产生初始愈伤组织，47.5d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例3
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素2,4-d、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素2,4-d2.6mg/l，蔗糖32g/l和琼脂8g/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为2cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.5cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗2h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒32s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒9min，再使用无菌水冲洗4次，所述的乙醇的质量浓度为75%，所述的hgcl2的质量浓度为0.15%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度26℃、光照强度3000lx、光照13h/d、ph为5.9，培养30d后产生初始愈伤组织，50d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例4：
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素2,4-d、蔗糖、6-ba和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素2,4-d2.4mg/l，蔗糖18g/l、琼脂6g/l，激素6-ba0.9mg/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为1.5cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.25cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗1h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒28s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒7min，再使用无菌水冲洗3次，所述的乙醇的质量浓度为70%%，所述的hgcl2的质量浓度为0.05%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度24℃、光照强度2000lx、光照11h/d、ph为5.7，培养25d后产生初始愈伤组织，45d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例5：
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素2,4-d、蔗糖、6-ba和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素2,4-d2.5mg/l，蔗糖30g/l、琼脂7g/l，激素6-ba1.0mg/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为1.75cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.375cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗1h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒30s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒8min，再使用无菌水冲洗3次，所述的乙醇的质量浓度为72.5%，所述的hgcl2的质量浓度为0.1%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度25℃、光照强度2500lx、光照12h/d、ph为5.83，培养27.5d后产生初始愈伤组织，47.5d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例6:
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素2,4-d、蔗糖、6-ba和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素2,4-d2.6mg/l，蔗糖32g/l、琼脂8g/l，激素6-ba1.1mg/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为2cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.5cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗2h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒32s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒9min，再使用无菌水冲洗4次，所述的乙醇的质量浓度为75%，所述的hgcl2的质量浓度为0.15%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度26℃、光照强度3000lx、光照13h/d、ph为5.9，培养30d后产生初始愈伤组织，50d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例7：
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素2,4-d、激素tdz、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素2,4-d2.4mg/l，蔗糖18g/l、tdz为0.4mg/l和琼脂6g/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为1.5cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.25cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗1h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒28s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒7min，再使用无菌水冲洗3次，所述的乙醇的质量浓度为70%%，所述的hgcl2的质量浓度为0.05%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度24℃、光照强度2000lx、光照11h/d、ph为5.7，培养25d后产生初始愈伤组织，45d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例8：
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素2,4-d、激素tdz、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素2,4-d2.5mg/l，蔗糖30g/l、tdz为0.5mg/l和琼脂7g/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为1.75cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.375cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗1h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒30s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒8min，再使用无菌水冲洗3次，所述的乙醇的质量浓度为72.5%，所述的hgcl2的质量浓度为0.1%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度25℃、光照强度2500lx、光照12h/d、ph为5.83，培养27.5d后产生初始愈伤组织，47.5d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例9：
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素2,4-d、激素tdz、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素2,4-d2.6mg/l，蔗糖32g/l、tdz为0.6mg/l和琼脂8g/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为2cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.5cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗2h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒32s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒9min，再使用无菌水冲洗4次，所述的乙醇的质量浓度为75%，所述的hgcl2的质量浓度为0.15%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度26℃、光照强度3000lx、光照13h/d、ph为5.9，培养30d后产生初始愈伤组织，50d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例10：
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素naa、激素kt、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素naa1.9mg/l，激素kt1.4mg/l，蔗糖18g/l和琼脂6g/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为1.5cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.25cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗1h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒28s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒7min，再使用无菌水冲洗3次，所述的乙醇的质量浓度为70%%，所述的hgcl2的质量浓度为0.05%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度24℃、光照强度2000lx、光照11h/d、ph为5.7，培养25d后产生初始愈伤组织，45d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例11：
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素naa、激素kt、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素naa2.0mg/l，激素kt1.5mg/l，蔗糖30g/l和琼脂7g/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为1.75cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.375cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗1h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒30s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒8min，再使用无菌水冲洗3次，所述的乙醇的质量浓度为72.5%，所述的hgcl2的质量浓度为0.1%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度25℃、光照强度2500lx、光照12h/d、ph为5.83，培养27.5d后产生初始愈伤组织，47.5d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例12：
一种月季愈伤组织的诱导培养基，所述诱导培养基由ms、激素naa、激素kt、蔗糖和琼脂制成，其中各组分的含量为：激素naa2.1mg/l，激素kt1.6mg/l，蔗糖32g/l和琼脂8g/l。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法，包括以下步骤：
（1）月季外植体的选取与预处理：选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片，所述的选取月季的茎段为2cm，所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.5cm2；并将选取的月季外植体，先使用流水冲洗2h，再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒32s，再转入hgcl2溶液中搅拌消毒9min，再使用无菌水冲洗4次，所述的乙醇的质量浓度为75%，所述的hgcl2的质量浓度为0.15%。
（2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养，培养条件为：温度26℃、光照强度3000lx、光照13h/d、ph为5.9，培养30d后产生初始愈伤组织，50d后产生大量胚性愈伤组织。
试验例1：
月季愈伤组织的诱导培养基及其诱导方法所得的愈伤组织，对其愈伤诱导率、褐化率、愈伤发生量及外部特征进行观察，其中编号1为实施例1，编号2为实施例4，编号3为实施例7，编号4为实施例10，使用相同浓度和相同的用量的编号1、编号2、编号3、编号4的诱导培养基及其诱导方法对露地月季和无菌试管苗进行诱导，其中“＋表示产生的愈伤组织较少”，“＋＋表示产生的愈伤组织较多”，“＋＋＋表示产生的愈伤组织非常多”，“＋＋＋＋表示产生的愈伤组织最多”，检测结果如下表1：
表1为不同诱导培养基对露地月季或无菌试管月季苗所诱导的愈伤组织
由上表1可知，编号2、编号3、编号4对露地月季或无菌试管月季苗均具有诱导作用，编号1还对露地月季具有诱导作用，由于浅黄色疏松状愈伤组织比浅绿色致密愈伤组织具有更高的胚性诱导率，量越大，褐化率越低，愈伤质量越高，因此编号1对露地月季的诱导效果优于编号2、编号3和编号4，编号2和编号3的对无菌试管月底苗的诱导作用优于编号1和编号4。
试验例2：
使用实施例2、实施例5、实施例8和实施例11月季愈伤组织的诱导培养基及其诱导方法所得的愈伤组织，对露地未展开叶、露地刚展开叶、露地完全展开叶、露地茎段、无菌苗未展开叶、无菌苗展开叶进行诱导，所述的诱导率=（诱导出愈伤的外植体个数/接种的外植体总个数）×100%；褐化率=（愈伤褐化个数/诱导出愈伤的外植体个数）×100%，其中a露地未展开叶、b露地刚展开叶、c露地完全展开叶、d露地茎段、a无菌苗未展开叶、b无菌苗展开叶；“＋表示产生的愈伤组织较少”，“＋＋表示产生的愈伤组织较多”，“＋＋＋表示产生的愈伤组织非常多，＋＋＋＋表示产生的愈伤组织最多”，其检测结果如下表2：
表2是实施例2、实施例4、实施例6、实施例8对露地未展开叶、露地刚展开叶、露地完全展开叶、露地茎段、无菌苗未展开叶、无菌苗展开叶的诱导情况
由上可知，ms+2,4-d2.5mg/l和ms+naa2.5mg/l+1.5mg/lkt利于露地茎段愈伤组织诱导培养；ms+2,4-d2.5mg/l和ms+2,4-d2.5mg/l+1.0mg/l6-ba利于露地完全展开叶愈伤组织诱导培养；ms+2,4-d2.5mg/l+0.5mg/ltdz利于露地刚展开叶愈伤组织诱导培养；ms+2,4-d2.5mg/l、ms+2,4-d2.5mg/l+1.0mg/l6-ba和ms+2,4-d2.5mg/l+0.5mg/ltdz利于露地未展开叶愈伤组织诱导培养；ms+2,4-d2.5mg/l+0.5mg/ltdz利于无菌苗未展开叶愈伤组织诱导培养；ms+2,4-d2.5mg/l+1.0mg/l6-ba利于无菌苗展开叶愈伤组织诱导培养。