本发明属于育种技术领域，尤其涉及一种优质强健家蚕品种的选育方法。
背景技术：
过去蚕桑品种选育的要求是优质高产，随着农业产业结构的调整和供给侧改革的不断深化，农业劳动力结构和生产经营模式发生了变化，尤其在农业生态环境受到严重影响和气候恶化没有得到根本解决的条件下，单一强调高产的育种目标受到了质疑和挑战，原来选育的蚕桑品种已不能充分满足蚕桑生产的需要，而提高蚕桑品种的综合抗性，保证蚕桑品种的优质高抗，成为对蚕桑品种的基本要求。以往，在家蚕育种方法上，主要以杂交、回交等常规育种方法为主，通过整基因组杂交、独立分配和重组获得有利的重组体，依据表型性状、10多个世代的选择才有可能获得优良的品种。而随着分子生物学和分子遗传学技术的快速发展，传统的育种方法已不能完全满足蚕业生产发展的需求，探索和发展新的育种手段，创新家蚕种质资源已经显得越来越迫切。
传统家蚕品种选育的方法选择的周期长，可靠性差，工作量大，特别是对于抗性品种的选育，选择的周期更长。通过在特定的培育条件下，利用半定量rt-pcr技术检测热激蛋白基因bmshsp27.4在家蚕体内的表达，可有效保证家蚕抗逆性状，提高选择效率，缩短育种年限；同时利用活蛹缫丝技术加强丝质选择，可提高对家蚕品种丝质的选择效率，保证目标性状不丢失。
技术实现要素：
解决的技术问题：本发明的目的是为了解决采用半定量rt-pcr技术和活蛹缫丝辅助选择技术选育优质强健家蚕品种的技术问题，提供了一种优质强健家蚕品种的选育方法。
本发明是这样实现的，一种优质强健家蚕品种的选育方法包括如下步骤：
步骤一、以强健性中系品种“eh新”(从湖南省蚕桑科学研究所引进)为母本，茧丝质优良春用中系品种“苏春”(从中国农业科学院蚕业研究所引进)为父本杂交，获得中系目标材料“e苏”；以湖北省2008年审定通过的家蚕新品种飞·鹤×祥·云中的“祥”(9902)为育种材料，经定向培育、系统选择获得日系目标材料“9902b”；将“e苏”和“9902b”在人为设置的特殊培育环境中进行系统选择，对每一个世代在饲育过程中进行农艺性状的选择，采用半定量rt-pcr技术检测热激蛋白基因bmshsp27.4在家蚕体内的表达，选择bmshsp27.4基因高量表达的个体留种继代，获得具有抗高温多湿性状的个体；
步骤二、中系目标材料“z83”是从中国农业科学院蚕业研究所引进的茧丝质优的春用多丝量品种873，经系统分离、高温多湿环境定向选育而成。日系目标材料“z84”是从中国农业科学院蚕业研究所引进的茧丝质优的春用多丝量品种874，经系统分离、高温多湿环境定向选育而成；对中系目标材料“z83”和日系目标材料“z84”按照常规方法进行饲育，对每一个世代在饲育过程中进行农艺性状的选择，留种个体采用活蛹缫丝的方法选择茧丝质，获得具有茧丝质优良的个体；
步骤三、对步骤一所得的材料“e苏”与步骤二所得的材料“z83”杂交获得中系互交原种，将步骤一所得的材料“9902b”与步骤二所得的材料“z84”杂交获得日系互交原种；
步骤四、将中系互交原种和日系互交原种杂交，获得的四元杂交种e苏·z83×9902b·z84，即优质抗逆家蚕品种。
进一步，所述中系目标材料采用中系二化四眠品种，所述日系目标材料采用日系二化四眠品种。
进一步，所述优质强健家蚕品种的选育方法在人为设置的环境条件下，采用半定量rt-pcr技术检测bmshsp27.4基因的表达，选择高量表达的个体进行留种继代；
扩增序列引物如下：
上游引物：5’-ttggttccaaaacacgaactgccac-3’，
下游引物：5’-ttcctgattttgccagcgtgcgttg-3’。
本发明的优点及积极效果为：
家蚕品种选育所花的时间少，通过rt-pcr技术的应用，可使选择效率提高70％-80％，活蛹缫丝技术的运用，可使茧丝质选择效率提高30％-40％，大大缩短了家蚕品种选育的周期。同时由于选育周期的缩短，减少了品种选育过程中的人力及物力消耗。可在3-4年内快速高效的培育出体质强健、茧丝质优良并具有抗高温多湿能力的家蚕新品种，满足蚕桑生产对省力化、耐粗放饲养的家蚕品种的需要，为茧丝企业提供优良原材料。
附图说明
图1是本发明实施例提供的优质强健家蚕品种鄂蚕的选育方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
蚕品种鄂蚕6号的选育方法包括如下步骤：
s101、以强健性中系品种“eh新”(从湖南省蚕桑科学研究所引进)为母本，茧丝质优良春用中系品种“苏春”(从中国农业科学院蚕业研究所引进)为父本杂交，获得中系目标材料“e苏”；以湖北省2008年审定通过的家蚕新品种飞·鹤×祥·云中的“祥”(9902)为育种材料，经定向培育、系统选择获得日系目标材料“9902b”；将“e苏”和“9902b”在人为设置的特殊培育环境中进行系统选择，对每一个世代在饲育过程中进行农艺性状的选择，采用半定量rt-pcr技术检测热激蛋白基因bmshsp27.4在家蚕体内的表达，选择bmshsp27.4基因高量表达的个体留种继代，获得具有抗高温多湿性状的个体。
不同的世代设置的特殊培育环境及选育方法如下表1所示：
表1“e苏”和“9902b”不同的世代设置的特殊培育环境及选育方法
s102、中系目标材料“z83”是从中国农业科学院蚕业研究所引进的茧丝质优的春用多丝量品种873，经系统分离、高温多湿环境定向选育而成。日系目标材料“z84”是从中国农业科学院蚕业研究所引进的茧丝质优的春用多丝量品种874，经系统分离、高温多湿环境定向选育而成；对中系目标材料“z83”和日系目标材料“z84”按照常规方法进行饲育，对每一个世代在饲育过程中进行农艺性状的选择，留种个体采用活蛹缫丝的方法选择茧丝质，获得具有茧丝质优良的个体。
s103、对s101所得的材料“e苏”与s102所得的材料“z83”杂交获得中系互交原种，将s101所得的材料“9902b”与s102所得的材料“z84”杂交获得日系互交原种。
s104、将中系互交原种和日系互交原种杂交，获得的四元杂交种e苏·z83×9902b·z84，命名为鄂蚕6号，即优质抗逆家蚕品种。
本发明通过rt-pcr技术选择抗逆性亲本的目标性状，利用活蛹缫丝选择亲本的丝质性状，可在3-4年内高效培育出优质抗逆的家蚕新品种。
本发明育成的中系目标材料：
主要特征为：中系二化四眠品种。稚蚕有趋密性、趋光性。各龄发育整齐，眠性快，眠起齐一；大蚕食桑速度快，体型粗壮，体色青白，素斑；老熟齐涌，营茧快，营上层茧。茧形短椭，茧色洁白，缩皱中等。发蛾齐，蛾白色，展翅，交配制种性能优。产卵稍慢，产附良好，不受精卵少，卵量多，春季繁育单蛾产卵566粒左右。春季催青经过10天，幼虫期24天左右，蛹期16天，全期50天。与日系目标材料对交，宜推迟1天出库催青。
本发明育成的日系目标材料：
主要特征为：日系二化四眠品种。稚蚕有趋密性、趋光性。各龄幼虫发育整齐，眠性快，眠起齐一；大蚕食桑速度较快，体型粗壮，体色青白，普通斑；老熟齐涌，营茧快，营上层茧。茧形长椭较浅束腰，茧色洁白，缩皱中等。发蛾齐，蛾白色，展翅。易交配，产卵快，产附好，春季繁育单蛾产卵530粒左右。春季催青经过10天，幼虫期24天12小时，蛹期16天12小时，全期51天。与中系目标材料对交，宜提早1d出库催青。
以下结合实施实例详细描述本发明的优质强健家蚕品种的选育方法及技术处理过程。
1、采用材料的说明
已有的研究结果表明，家蚕体内存在的热激蛋白在家蚕的生长发育过程中起重要作用，能被一些非生物和生物因素诱导表达。家蚕bmshsp27.4基因在常温下不表达或表达水平极低，在高温冲击下该基因的表达水平迅速上升，表明该基因属热敏感基因，且该基因高表达是蚕体适应高温产生的应激反应，以保护机体免受高温损伤。(金鑫等，高温(34℃)条件下家蚕热激蛋白基因bmshsp27.4的表达变化，蚕业科学，2014，40(4):0620－0626)。本发明在人为设置的环境条件下，采用半定量rt-pcr技术检测家蚕体内bmshsp27.4基因的表达，选择高量表达的个体进行留种继代。到目前为主，还没有该类技术应用于家蚕育种辅助选择，加速家蚕育种进程的相关报道。
扩增序列引物如下：
上游引物：5’-ttggttccaaaacacgaactgccac-3’，
下游引物：5’-ttcctgattttgccagcgtgcgttg-3’
2、具体的实施步骤：
(1)选择合适亲本按照“多丝量×强健性”性状互补原则，配制“中×中”、“日×日”的杂交原种组合，以强健性中系品种“eh新”为母本，茧丝质优良春用中系品种“苏春”为父本杂交，获得中系材料“e苏”，以湖北省2008年审定通过的家蚕新品种飞·鹤×祥·云中的“祥”(9902)为育种材料，经定向培育、系统选择获得日系目标材料“9902b”；从“e苏”和“9902b”的f1代开始，进行连续多代的高温多湿，密闭，少回育的环境条件培育，f1-f5代全龄温度为29℃-32℃，1-4龄为全防干育，5龄为半防干育，全龄每日2回给桑，桑叶不选择。f5代以后则每年春期常温偏高温度28℃-29℃的条件培育，以供茧丝质选择，夏秋期均用29℃-30℃高温培育，以加强抗高温的能力。f1-f3代进行混合蚁量育，着重个体选择，f4代采用单蛾育同蛾区交配，以强健性为重点，区选为主结合个体选择。在人为设置的特殊培育环境中进行系统选择，对每一个世代在饲育过程中进行农艺性状的选择，采用半定量rt-pcr技术检测热激蛋白基因bmshsp27.4在家蚕体内的表达，选择bmshsp27.4基因高量表达的个体留种继代，获得具有抗高温多湿性状的个体。
(2)对中系目标材料“z83”和日系目标材料“z84”按照常规方法进行饲育，对每一个世代在饲育过程中进行农艺性状的选择，留种个体采用活蛹缫丝的方法加强茧丝质的选择，获得具有茧丝质优良的个体。
(3)对步骤(1)所得的材料“e苏”与步骤(2)所得的材料“z83”杂交获得中系互交原种，将(1)所得的材料“9902b”与步骤(2)所得的材料“z84”杂交获得日系互交原种。
(4)将中系互交原种和日系互交原种杂交，获得的四元杂交种e苏·z83×9902b·z84，命名为鄂蚕6号，即优质强健的家蚕品种。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110>湖北省农业科学院经济作物研究所
<120>一种优质强健家蚕品种的选育方法
<130>2017
<160>2
<170>siposequencelisting1.0
<210>1
<211>25
<212>dna
<213>人工序列(bombyxmori)
<400>1
ttggttccaaaacacgaactgccac25
<210>2
<211>25
<212>dna
<213>人工序列(bombyxmori)
<400>2
ttcctgattttgccagcgtgcgttg25