本发明涉及植物繁育方法，更具体的说明涉及嘉定白蒜的繁育体系。
背景技术：
嘉定大白蒜为全国四大名蒜之一，蒜头肥硕结实，蒜瓣大而匀称，色泽洁白，味道辛香，尤以辛辣味浓重而成为白蒜之最，是深受人们喜爱的香辣蔬菜。嘉定白蒜种植历史极其悠久。相传嘉定白蒜始种于南宋，明末清初就外销南洋各地。1979年，为发展嘉定白蒜生产，嘉定区建立了大蒜试验站，1983年嘉定区被定为国家大蒜出口基地，荣获国家“出口产品荣誉证书”，嘉定白蒜品质享誉海内外。但是，嘉定白蒜由于无性繁殖，病毒连年累计，造成嘉定白蒜种源退化，产量降低，品质下降，因此需要通过茎尖脱毒技术进行种源提纯复壮。但茎尖脱毒形成的脱毒苗成活率低，远达不到大规模工厂化生产的标准。
中国专利公开号cn1775003公开了一种大蒜茎尖培养结合冷处理生产脱毒种苗的方法，该方法以ms培养基为基础辅以6ba.naa.iba等进行生产脱毒种苗，但脱毒种苗移栽成活率并未有详细描述。组培苗移栽成活率在30%-40%之间，技术难以突破。
中国专利公开号cn1238122公开了一种大蒜脱毒种苗快速繁殖的方法，是以未熟蒜薹为外植体通过对不同培养基.培养时间选择上利用水杨酸获得大量试管苗，然后诱导试管鳞茎形成，并未涉及到形成脱毒鳞茎所需要形成的标准。
技术实现要素：
本发明的目的是：提供一种嘉定白蒜茎尖脱毒苗形成脱毒小鳞茎的方法，以克服大蒜茎尖脱毒苗移栽成活率低，难以实现大规模工厂化生产的问题。
本发明目的通过下述技术方案实现：一种嘉定白蒜茎尖脱毒苗形成脱毒小鳞茎的方法，采用标准鳞茎的控制方法，包括以下步骤：
（1）按分级标准获取嘉定白蒜脱毒蒜苗：获取嘉定白蒜脱毒鳞茎无菌材料，取经病毒检测通过的继代培养形成的主芽和腋芽形成的完整植株脱毒苗，去除最外层老叶，切割分株形成单株脱毒蒜苗，将合适作为生根培养的脱毒蒜苗按茎粗分株分级进行生根培养，将没有形成完整植株的脱毒蒜苗或低于1.0mm和大于2.5mm的脱毒苗剔除；
（2）对脱毒蒜苗进行生根培养60~80天，其生根培养基为：1/2ms改良培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-ba)0.5-2.0mg/l+萘乙酸（naa）0.2-1.0mg/l+6-糠基氨基嘌呤（kt)0.1-0.5mg/l，或者，1/2ms改良培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-ba)0.2~1.0mg/l+萘乙酸（naa)0.01~0.4mg/l；
（3）嘉定白蒜生根培养形成脱毒小鳞茎的环境条件是：每天连续16h光照，光照强度为3000-4000ix,培养温度为26℃，至生根苗形成休眠小鳞茎，即脱毒蒜苗琼脂以上部分休眠枯萎，根部膨大形成脱毒小鳞茎，获得的无菌小鳞茎在96%以上；
（4）嘉定白蒜脱毒小鳞茎的控制标准；夏季6-7月，统一标准条件控制脱毒小鳞茎培养；
（5）生根培养形成的脱毒小鳞茎进行清洗、储藏和打破休眠以及10月份进行温室炼苗。
本发明形成了能稳定控制脱毒小鳞茎形成的标准，克服脱毒蒜种苗难以实现工厂化的问题，提供了一种脱毒小鳞茎形成的标准化生产方法。
在上述方案基础上，所述的按茎粗分株分级是指中根据增殖出的不同大小的脱毒蒜苗分为三级，其中，三级苗茎粗1.0-1.5mm,二级苗茎粗1.5-2.0mm,一级苗茎粗2.0-2.5mm，去除脱毒蒜苗基部根系，保留完整植株接种至生根培养基中，每瓶接种10株。
在上述方案基础上，生根培养的脱毒蒜苗的培养基中包括:
大量元素：nh4no3825mg/l、kno3850mg/l、kh2po485mg/l、mgso4·7h2o185mg/l和caci2·2h2o220mg/l；
微量元素：feso4·7h2o27.8mg/l、na2·edta·2h2o37.3mg/l、ki0.83mg/l、h3bo36.2mg/l、mnso4·h2o22.3mg/l、znso4·7h2o8.6mg/l、na2moo4·2h2o0.25mg/l、coci2·6h2o0.025mg/l和cuso4·5h2o0.025mg/l；
有机物质：肌醇50-60mg/l、烟酸0.25mg/l、盐酸吡哆醇0.25mg/l、盐酸硫胺素0.15mg/l和甘氨酸1.0mg/l；
90-120g/l蔗糖、0.5-1.0g/l活性炭粉、7g/l琼脂，ph值6.0。
生根培养至形成休眠小鳞茎培养时间为70天左右为宜。
夏季6-7月，选取叶色正常，健壮的植株，保留完整植株进行生根培养，级别越高形成的脱毒鳞茎也就越大；统一标准控制脱毒小鳞茎形成的时间在70天。
生根培养70天左右形成的脱毒小鳞茎进行清洗、储藏和打破休眠以及秋季9-10月份进行温室炼苗，一级苗形成的脱毒小鳞茎标准控制在400-500mg,二级苗形成的脱毒小鳞茎控制在300-400mg,三级苗形成的脱毒小鳞茎控制在200-300mg。
本发明的有益效果：本发明突破了嘉定白蒜茎尖脱毒苗成活率低以及工厂化生产困难等难题，使用本发明方法控制脱毒小鳞茎形成的整齐度和大小差异等问题，生根培养60-80天，发根率为98%；嘉定白蒜增殖系数在3-3.5，苗的整齐度好，形成的脱毒小鳞茎质量优，形成脱毒小鳞茎蒜种率在96%以上；炼苗驯化成活率在95%以上，出苗整齐，便于管理，可实现大规模工厂化生产。为大规模生产脱毒嘉定白蒜种源提供技术支撑，提高出口经济效益，满足市场需要。
附图说明
附图1，1.0～1.5mm脱毒蒜苗三级苗分级控制标准；
附图2，1.5～2.0mm脱毒蒜苗二级苗分级控制标准；
附图3，2.0～2.5mm脱毒苗一级苗分级控制标准；
附图4，200～300mg脱毒鳞茎三级控制标准控制；
附图5，300～400mg脱毒鳞茎二级控制标准控制；
附图6，400～500mg脱毒鳞茎一级控制标准控制；
附图7，脱毒苗分级植株控制标准规格，1.0～1.5mm三级实例照片；
附图8，脱毒苗分级植株控制标准规格，1.5～2.0mm二级实例照片；
附图9，脱毒苗分级植株控制标准规格，2.0～2.5mm一级实例照片；
附图10，脱毒鳞茎分级控制标准规格，200-300mg三级实例照片；
附图11，脱毒鳞茎分级控制标准规格，300～400mg二级实例照片；
附图12，脱毒鳞茎分级控制标准规格，400～500mg一级实例脱毒鳞茎直径2.0～2.5mm照片。
脱毒苗分级可控标准。
具体实施方式
以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。
实施例1
一种嘉定白蒜茎尖脱毒苗形成脱毒小鳞茎的方法，包括以下步骤：
1.嘉定白蒜脱毒鳞茎无菌材料的获得；
取经病毒检测通过的继代培养中形成的脱毒蒜苗，去除最外层老叶，切割分株形成单个植株的脱毒蒜苗；根据增殖出的不同大小的脱毒蒜苗按茎粗分级，分级成1.0-1.5mm,1.5-2.0mm,2.0-2.5mm的脱毒蒜苗，如图1至3所示；去除脱毒蒜苗基部根系，保留完整植株接种至生根培养基中，每瓶接种10株，获得的无菌脱毒小鳞茎率在93%以上。附图7，脱毒苗分级植株控制标准规格，1.0～1.5mm三级实例照片；附图8，脱毒苗分级植株控制标准规格，1.5～2.0mm二级实例照片；附图9，脱毒苗分级植株控制标准规格，2.0～2.5mm一级实例照片。
如图1，1.0～1.5mm脱毒苗三级苗分级控制标准控制，株号与茎粗见表1：
如图2，1.5～2.0mm脱毒苗二级苗分级控制标准控制，株号与茎粗见表2：
如3，2.0～2.5mm脱毒苗一级苗分级控制标准控制，株号与茎粗见表3：
2.嘉定白蒜生根培养基条件；
生根培养基为1/2ms改良培养基，培养基中包括:
大量元素：nh4no3825mg/l、kno3850mg/l、kh2po485mg/l、mgso4·7h2o185mg/l和caci2·2h2o220mg/l;
微量元素：feso4·7h2o27.8mg/l、na2·edta·2h2o37.3mg/l、ki0.83mg/l、h3bo36.2mg/l、mnso4·h2o22.3mg/l、znso4·7h2o8.6mg/l、na2moo4·2h2o0.25mg/l、coci2·6h2o0.025mg/l和cuso4·5h2o0.025mg/l；
有机物质：肌醇50-60mg/l、烟酸0.25mg/l、盐酸吡哆醇0.25mg/l、盐酸硫胺素0.15mg/l和甘氨酸1.0mg/l；
90-120g/l蔗糖、0.5-1.0g/l活性炭粉、7g/l琼脂，ph值6.0。
生根培养基为1/2ms改良培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-ba)0.5-2.0mg/l+萘乙酸（naa）0.2-1.0mg/l+6-糠基氨基嘌呤（kt)0.1-0.5mg/l，或者，1/2ms改良培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-ba)0.2-1.0mg/l+萘乙酸（naa)0.01-0.4mg/l。
3.嘉定白蒜脱毒苗生根培养形成小鳞茎的条件：
嘉定白蒜脱毒苗生根培养形成小鳞茎的条件为：选取继代增殖培养的主芽和腋芽形成的完整植株持续光照培养，光照培养条件为每天连续16h光照，光照强度为3000-3500ix,培养温度为27℃；生根培养至形成休眠小鳞茎，培养时间为60-65天，脱毒蒜苗琼脂以上部分休眠枯萎，根部膨大形成脱毒小鳞茎。
4.嘉定白蒜脱毒小鳞茎的控制标准；
夏季6-7月，将合适作为生根培养的脱毒苗分株分级进行生根培养，生根60-65天的生根苗就会形成休眠小鳞茎，选取叶色正常，健壮的植株，保留完整植株进行生根培养；不同粗细的脱毒苗形成的小鳞茎大小也不一样，一般将不同粗细的脱毒苗按茎粗分为三级，2.0-2.5mm的脱毒苗为一级苗，1.5-2.0mm的脱毒苗为二级苗，1.0-1.5mm的脱毒苗为三级苗，级别越高形成的脱毒鳞茎也就越大；将没有形成完整植株的脱毒苗或低于1mm的脱毒苗去除，大于2.5mm以上的剔除，统一标准控制脱毒鳞茎形成的时间在60-65天为宜。如图4至6所示。附图10，脱毒鳞茎分级控制标准规格，200-300mg三级实例照片；附图11，脱毒鳞茎分级控制标准规格，300～400mg二级实例照片；附图12，脱毒鳞茎分级控制标准规格，400～500mg一级实例脱毒鳞茎直径2.0～2.5mm照片。
5.嘉定白蒜形成的小鳞茎控制标准；
秋季9~10月，生根培养60~80天形成的鳞茎可进行清洗，储藏和打破休眠以及10月份进行温室炼苗。脱毒小鳞茎以鳞茎表皮完整，鳞茎肉质紧实，包裹在生长点上，根系生长良好均匀为佳；剔除玻璃化鳞茎以及生长不良的植株；形成的脱毒鳞茎按重量分级，一级苗形成的脱毒鳞茎标准控制在430-500mg,二级苗形成的脱毒鳞茎控制在350-400mg,三级苗形成的脱毒鳞茎控制在200-300mg。
如图4，.200～300mg脱毒鳞茎三级控制标准控制，株号与脱毒鳞茎的重量，见表4：
如图5，300～400mg脱毒鳞茎二级控制标准控制，见株号与重量见表5：
如图6，400～500mg脱毒鳞茎一级控制标准控制，株号与重量见表6：
实施例2
一种嘉定白蒜茎尖脱毒苗形成脱毒小鳞茎的方法，包括以下步骤：
1.嘉定白蒜脱毒鳞茎无菌材料的获得；
取经病毒检测通过的继代培养中形成的脱毒蒜苗，去除最外层老叶，切割分株形成单株脱毒蒜苗；根据增殖出的不同大小的脱毒蒜苗按茎粗分级，分级成1.0-1.5mm,1.5-2.0mm,2.0-2.5mm的三级脱毒蒜苗；去除脱毒蒜苗基部根系，保留完整植株接种至生根培养基中，每瓶接种10株，获得的无菌小鳞茎在98%以上。
2.嘉定白蒜生根培养基条件；
生根培养基为1/2ms改良培养基，培养基中包括:
大量元素：nh4no3825mg/l.kno3850mg/l.kh2po485mg/l.mgso4·7h2o185mg/l.caci2·2h2o220mg/l;
微量元素：feso4·7h2o27.8mg/l、na2·edta·2h2o37.3mg/l、ki0.83mg/l、h3bo36.2mg/l、mnso4·h2o22.3mg/l、znso4·7h2o8.6mg/l、na2moo4·2h2o0.25mg/l、coci2·6h2o0.025mg/l和cuso4·5h2o0.025mg/l；
有机物质：肌醇50-60mg/l、烟酸0.25mg/l、盐酸吡哆醇0.25mg/l、盐酸硫胺素0.15mg/l和甘氨酸1.0mg/l；
90-120g/l蔗糖、0.5-1.0g/l活性炭粉和7g/l琼脂，ph值6.0。
生根培养基为1/2ms改良培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-ba)0.5-2.0mg/l+萘乙酸（naa）0.2-1.0mg/l+6-糠基氨基嘌呤（kt)0.1-0.5mg/l.或者1/2ms改良培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-ba)0.2-1.0mg/l+萘乙酸（naa)0.01-0.4mg/l。
3.嘉定白蒜脱毒苗生根培养形成小鳞茎的条件；
嘉定白蒜脱毒苗生根培养形成小鳞茎的条件为：选取继代增殖培养的主芽和腋芽形成的完整植株持续光照培养，光照培养条件为连续16h光照，光照强度为3500~4000ix,培养温度为22℃；生根培养至形成休眠小鳞茎培养时间为70~80天，脱毒蒜苗琼脂以上部分休眠枯萎，根部膨大形成脱毒小鳞茎。
4.嘉定白蒜脱毒小鳞茎的控制标准；
夏季6-7月，将合适作为生根培养的脱毒苗分株分级进行生根培养，生根70-80天的生根苗就会形成休眠小鳞茎，选取叶色正常，健壮的植株，保留完整植株进行生根培养；不同粗细的脱毒苗形成的小鳞茎大小也不一样，一般将不同粗细的脱毒苗按茎粗分为三级，2.0-2.5mm的脱毒苗为一级苗，1.5-2.0mm的脱毒苗为二级苗，1.0-1.5mm的脱毒苗为三级苗，级别越高形成的脱毒鳞茎也就越大；将没有形成完整植株的脱毒苗或低于1mm的脱毒苗去除，大于2.5mm以上的剔除，统一标准控制脱毒鳞茎形成的时间在70-80天为宜。
5.嘉定白蒜形成的小鳞茎控制标准；
秋季9-10月，生根培养70-80天形成的鳞茎可进行清洗，储藏和打破休眠以及10月份进行温室炼苗。脱毒小鳞茎以鳞茎表皮完整，鳞茎肉质紧实，包裹在生长点上，根系生长良好均匀为佳；剔除玻璃化鳞茎以及生长不良的植株；形成的脱毒鳞茎按重量分级，一级苗形成的脱毒鳞茎标准控制在400-520mg,二级苗形成的脱毒鳞茎控制在320-400mg,三级苗形成的脱毒鳞茎控制在200-310mg。
以上对本发明的具体实施方式进行了说明，但本发明并不以此为限，只要不脱离本发明的宗旨，本发明还可以有多种变化。