本发明涉及植物组织培养技术,具体涉及一种弹簧草的组培繁殖方法。
背景技术
弹簧草也称螺旋草,因叶片扭曲盘旋,形似弹簧得名,其为多年生鳞茎类多肉植物,植株为圆形或不规则形鳞茎,鳞茎由一层层肥厚的肉质鳞片组成,地下部分的表皮呈黄白色,露出土面的部分经日晒后呈绿色。弹簧草形态独特,鳞茎古朴,叶片根据种类的不同,或像弹簧,或像水中飘逸的海带,或像卷曲的长发,其线条流畅飘逸,富于变化,花色淡雅清新,适合用小盆栽种,点缀于窗台、书桌等处。
在自然条件下弹簧草生长缓慢,繁殖率较低,无法满足市场需求,而组培繁殖可以快速繁育,可以在短期内获得大量与母株遗传背景一致的优质种苗,这对于满足弹簧草的市场需求具有重要意义。
技术实现要素:
本发明所要解决的技术问题是:提供一种繁殖速度快、产量高、成活率高的弹簧草的组培繁殖方法。
为了解决上述技术问题,本发明采用的技术方案为:一种弹簧草的组培繁殖方法,包括以下步骤:
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料,进行消毒处理后接种至增殖培养基内培养23~30d,培养温度为15~20℃,光照强度为800~1000lux,光照时间为11~13h/d,外植体诱导分化出丛生芽;
所述增殖培养基包括如下组分:
ms、吡效隆0.1~0.3mg/l,naa0.05~0.07mg/l,多效唑0.01~0.03mg/l、蔗糖28~32g/l和卡拉胶5~7g/l;
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中,培养时间为25~28d,光照强度为1200~1800lux,光照时间13~14h/d,培育出弹簧草幼苗;
所述生根壮苗培养基包括如下组分:
1/2ms、iba1~2mg/l,多效唑0.01~0.03mg/l、ac0.5~0.8g/l、蔗糖25~30g/l和卡拉胶5~7g/l。
本发明的有益效果在于:本发明采用弹簧草的球茎鳞片作为外植体,外植体消毒后通过增殖培养基,其中增殖培养基中各组分的协同作用诱导产生大量丛芽,在经过生根壮苗培养基培养成独立完整的健壮植株。本发明通过增殖培养基、生根壮苗培养基的配方改进,及光照强度和时间的改进,通过组织培养获得弹簧草幼苗,上述繁殖方法相比于传统的弹簧草的有性生殖培养方法,具有繁殖速度快、产量高、幼苗健壮及成活率高的优点。
具体实施方式
为详细说明本发明的技术内容、所实现目的及效果,以下结合实施方式予以说明。
本发明最关键的构思在于:采用弹簧草的球茎鳞片作为外植体,外植体消毒后通过增殖培养基,增殖培养基中各组分的协同作用诱导产生大量丛芽,在经过生根壮苗培养基培养成独立完整的健壮植株,成活率高。
本发明提供一种弹簧草的组培繁殖方法,包括以下步骤:
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料,进行消毒处理后接种至增殖培养基内培养23~30d,培养温度为15~20℃,光照强度为800~1000lux,光照时间为11~13h/d,外植体诱导分化出丛生芽;
所述增殖培养基包括如下组分:
ms、吡效隆0.1~0.3mg/l,naa0.05~0.07mg/l,多效唑0.01~0.03mg/l、蔗糖28~32g/l和卡拉胶5~7g/l;
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中,培养时间为25~28d,光照强度为1200~1800lux,光照时间13~14h/d,培育出弹簧草幼苗;
所述生根壮苗培养基包括如下组分:
1/2ms、iba1~2mg/l,多效唑0.01~0.03mg/l、ac0.5~0.8g/l、蔗糖25~30g/l和卡拉胶5~7g/l。
弹簧草培养基的原理说明:通过在增殖培养基内加入吡效隆0.1~0.3mg/l和多效唑0.01~0.03mg/l,并通过光照800~1000lux的光照培养,促进外植体诱导分化出大量的丛芽,大大提高弹簧草的产量,在生根壮苗培养基中加入iba1~2mg/l、多效唑0.01~0.03mg/l,并通过1200~1800lux的光照培养,能够促进丛芽发育成完成的植株。
从上述描述可知,本发明的有益效果在于:本发明采用弹簧草的球茎鳞片作为外植体,外植体消毒后通过增殖培养基,其中增殖培养基中各组分的协同作用诱导产生大量丛芽,在经过生根壮苗培养基培养成独立完整的健壮植株。本发明通过增殖培养基、生根壮苗培养基的配方改进,及光照强度和时间的改进,通过组织培养获得弹簧草幼苗,上述繁殖方法相比于传统的弹簧草的有性生殖培养方法,具有繁殖速度快、产量高、幼苗健壮及成活率高的优点。
进一步的,所述增殖培养基的ph为6.0。
进一步的,所述生根壮苗培养基的ph为5.8。
进一步的,所述增殖培养基包括如下组分:ms、吡效隆0.1mg/l,naa0.05mg/l,多效唑0.01mg/l、蔗糖30g/l和卡拉胶5g/l。
进一步的,所述生根壮苗培养基包括如下组分:1/2ms、iba1mg/l,多效唑0.01mg/l、ac0.5g/l、蔗糖25g/l和卡拉胶5g/l。
进一步的,步骤1中,所述培养温度为15℃,光照强度为1000lux,光照时间为13h/d。
进一步的,步骤2中,所述光照强度为1800lux,光照时间13h/d。
进一步的,步骤1中,所述“消毒处理”具体为:将外植体使用1%的升汞浸泡消毒10~15min。
进一步的,所述消毒处理后,再用无菌水清洗2~3遍。
进一步的,具体包括以下步骤:
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料,将外植体使用1%的升汞浸泡消毒10~15min,再用无菌水清洗2~3遍后接种至增殖培养基内培养23~30d,培养温度为15℃,光照强度为1000lux,光照时间为13h/d,外植体诱导分化出丛生芽;
所述增殖培养基包括如下组分:
ms、吡效隆0.1mg/l,naa0.05mg/l,多效唑0.01mg/l、蔗糖30g/l和卡拉胶5g/l,所述增殖培养基的ph为6.0;
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中,培养时间为25~28d,光照强度为1800lux,光照时间13h/d,培育出弹簧草幼苗;
所述生根壮苗培养基包括如下组分:
1/2ms、iba1mg/l,多效唑0.01mg/l、ac0.5g/l、蔗糖25g/l和卡拉胶5g/l,所述生根壮苗培养基的ph为5.8。
实施例1
一种弹簧草的组培繁殖方法,包括以下步骤:
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料,将外植体使用1%的升汞浸泡消毒10min,再用无菌水清洗2~3遍后接种至增殖培养基内培养23d,培养温度为15℃,光照强度为800lux,光照时间为13h/d,外植体诱导分化出丛生芽;
所述增殖培养基包括如下组分:
ms、吡效隆0.1mg/l,naa0.05mg/l,多效唑0.01mg/l、蔗糖30g/l和卡拉胶5g/l,所述增殖培养基的ph为6.0;
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中,培养时间为25d,光照强度为1200lux,光照时间14h/d,培育出弹簧草幼苗;
所述生根壮苗培养基包括如下组分:
1/2ms、iba1mg/l,多效唑0.01mg/l、ac0.5g/l、蔗糖25g/l和卡拉胶5g/l,所述生根壮苗培养基的ph为5.8。
实施例2
一种弹簧草的组培繁殖方法,包括以下步骤:
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料,将外植体使用1%的升汞浸泡消毒15min,再用无菌水清洗2~3遍后接种至增殖培养基内培养26d,培养温度为18℃,光照强度为900lux,光照时间为12h/d,外植体诱导分化出丛生芽;
所述增殖培养基包括如下组分:
ms、吡效隆0.2mg/l,naa0.06mg/l,多效唑0.02mg/l、蔗糖28g/l和卡拉胶6g/l,所述增殖培养基的ph为6.0;
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中,培养时间为27d,光照强度为1500lux,光照时间13h/d,培育出弹簧草幼苗;
所述生根壮苗培养基包括如下组分:
1/2ms、iba1.5mg/l,多效唑0.02mg/l、ac0.6g/l、蔗糖28g/l和卡拉胶6g/l,所述生根壮苗培养基的ph为5.8。
实施例3
一种弹簧草的组培繁殖方法,包括以下步骤:
步骤1、取弹簧草的球茎鳞片作为外植体材料,将外植体使用1%的升汞浸泡消毒15min,再用无菌水清洗2~3遍后接种至增殖培养基内培养30d,培养温度为20℃,光照强度为1000lux,光照时间为11h/d,外植体诱导分化出丛生芽;
所述增殖培养基包括如下组分:
ms、吡效隆0.3mg/l,naa0.07mg/l,多效唑0.01~0.03mg/l、蔗糖32g/l和卡拉胶7g/l,所述增殖培养基的ph为6.0;
步骤2、将步骤1得到的丛生芽接种至生根壮苗培养基中,培养时间为28d,光照强度为1800lux,光照时间13h/d,培育出弹簧草幼苗;
所述生根壮苗培养基包括如下组分:
1/2ms、iba2mg/l,多效唑0.03mg/l、ac0.8g/l、蔗糖30g/l和卡拉胶7g/l,所述生根壮苗培养基的ph为5.8。
将实施例1~实施例3的弹簧草幼苗移栽至基质土中培养,存活率均能到达93%以上,其中实施例1的存活率达到了95%,实验数据表明,增殖培养基配方为ms、吡效隆0.1mg/l,naa0.05mg/l,多效唑0.01mg/l、蔗糖30g/l和卡拉胶5g/l,所述增殖培养基的ph为6.0,生根壮苗培养基配方为1/2ms、iba1mg/l,多效唑0.01mg/l、ac0.5g/l、蔗糖25g/l和卡拉胶5g/l,所述生根壮苗培养基的ph为5.8时,弹簧草幼苗移栽的存活率最高。
综上所述,本发明提供的弹簧草的组培繁殖方法,采用弹簧草的球茎鳞片作为外植体,外植体消毒后通过增殖培养基,其中增殖培养基中各组分的协同作用诱导产生大量丛芽,在经过生根壮苗培养基培养成独立完整的健壮植株。
本发明通过在增殖培养基内加入吡效隆0.1~0.3mg/l和多效唑0.01~0.03mg/l,并通过光照800~1000lux的光照培养,促进外植体诱导分化出大量的丛芽,大大提高弹簧草的产量,在生根壮苗培养基中加入iba1~2mg/l、多效唑0.01~0.03mg/l,并通过1200~1800lux的光照培养,能够促进丛芽发育成完成的植株。上述繁殖方法相比于传统的弹簧草的有性生殖培养方法,具有繁殖速度快、产量高、幼苗健壮及成活率高的优点。
以上所述仅为本发明的实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是利用本发明说明书内容所作的等同变换,或直接或间接运用在相关的技术领域,均同理包括在本发明的专利保护范围内。