一种利用绣球菌液体菌种和周转袋制备栽培菌棒的方法与流程

本发明涉及食用菌栽培技术，特别涉及一种利用绣球菌液体菌种和周转袋制备栽培菌棒的方法。

背景技术：

利用液体菌种进行食用菌的栽培生产可以有效缩短栽培周期、提高发菌和出菇的整齐度，有效降低杂菌污染率、便于栽培管理。因此，利用液体菌种进行食用菌的栽培生产已在多个食用菌品种的栽培中使用，诸如：香菇、木耳、白灵菇、杏鲍菇、金针菇等，但使用液体菌种生产绣球菌菌棒，特别是使用液体菌种结合周转袋制作绣球菌菌棒未见报道。

绣球菌是我国人工栽培食用菌中的新成员，口感和风味独特；但绣球菌主要利用松木屑培养基进行栽培，栽培周期长，成功率低。同时，伴随着绣球菌产业的发展和我国劳动力价格的持续增长，绣球菌菌棒的工厂化生产逐渐替代人工装袋的生产模式。但绣球菌液体菌种的使用一直是一个瓶颈，主要问题在于绣球菌菌丝生长缓慢，这就要求液体菌种的菌丝生物量必须达到相当高的水平才能使用，否则容易造成菌丝定植缓慢或根本无法定植，传统方法制备的绣球菌栽培菌棒发菌时间约90-120天才能长满菌丝。

传统方式接种液体菌种，因为菌棒中含水量已经很高，培养料中不能再接入过多的液体菌种，一般每个接种穴接液体菌种20-40ml，否则会因为含水量过多不萌发；如果配置原料时降低含水量，就会造成因培养料含水量低绣球菌菌丝难以生长。

近年来研发的固体发酵罐及其自动冷却和接种成套设备要求精密度高、造价昂贵，一般食用菌专业户难以配置，而且固体发酵罐成套设备用于食用菌菌棒制作尚处于实验研发阶段，成功范例还未见报道。制约绣球菌菌棒制作的因素包括：（1）液体菌种制作技术是近十年刚发展起来的技术，需要具备微生物菌种液体培养的专业知识和无菌操作技能，目前还没有在专业户中得到广泛应用；（2）固体发酵罐设备昂贵、而且现有固体发酵罐中的发酵过程较长，体积庞大,容易造成杂菌污染。

技术实现要素：

本发明的目的正是针对上述现有技术中所存在的不足之处而提供一种利用绣球菌液体菌种和周转袋制备栽培菌棒的方法。利用本发明的方法制备的菌棒栽培绣球菌能够有效缩短栽培周期，减少杂菌污染。另外，利用本发明的方法不增加过多的设备投资,非常适合普通专业户应用。

本发明的目的可通过下述技术措施来实现：

本发明的利用绣球菌液体菌种和周转袋制备栽培菌棒的方法包括下述步骤：

a、液体菌种的制备：将绣球菌(sparassislatifolia)制成液体菌种（因液体菌种的制作属于常规技术，一般多采用试管母种——三角瓶液体菌种——发酵罐液体菌种逐级放大的经典工艺进行液体菌种制备，具体不再赘述）；

b、培养料的配制：按照松木屑：麦麸：糖的质量份数比＝70~85：15~30：1~2的比例将上述原料混配均匀加水搅拌，加水量为上述原料总质量的1.0~1.3倍，加水后继续搅拌3~10分钟；

c、周转袋的制备：将步骤b制备的培养料置于周转袋内，周转袋的装料系数为50-75％，将周转袋分层转入灭菌柜中进行灭菌，冷却降温后进行接种；

d、接种:将步骤a制备的液体菌种接入降温后的培养料中，混合均匀；

e、短暂培养：在温度为20℃-25℃的条件下培养15-20天；

f、菌棒制备：将短暂培养结束后周转袋中的培养料破碎为0.5-2cm的菌块，在洁净环境条件下分装压实至包装袋内制成菌棒；

g、继续培养：将步骤f中制备的菌棒在常温条件下继续培养40-50天，至菌棒内菌丝长满；

h、出菇管理：将步骤g中制备的菌棒在常温出菇管理条件下进行出菇、以及进行生物学效率统计。

本发明步骤c中所述的灭菌、降温的条件为：周转袋分层放入灭菌柜中进行灭菌，当周转袋内物料温度达到100℃-121℃时开始保温，保温时间为45-600分钟；当灭菌完成周转袋内压力恢复降至常压时，取出周转袋转入洁净接种室内冷却，在周转袋内原料温度降至20℃-30℃时进行接种。

本发明步骤d中所述混合均匀的具体步骤如下：震荡混合10-30秒、震荡频率1次/秒。。

本发明步骤c中所述周转袋采用聚丙烯、聚乙烯材料或其它耐高温材料如帆布袋制备而成，可以根据灭菌温度和货源自由选择，袋口装有透气胶塞、并采用颈环绑扎；周转袋的尺寸为：宽300mm*长600mm*厚0.1mm。

本发明的有益效果如下：

1、在周转袋中利用温湿度条件和氧气条件使菌丝迅速萌发定植；培养48小时时菌丝开始萌发，到60小时可观察到白色绣球菌菌丝。

2、绣球菌菌丝定植后成为优势菌群，减少了杂菌污染的机会。

3、利用本发明的方法制备的栽培菌棒的方法较之传统的先装袋-灭菌-接种-培养的工艺，发菌时间减少20-25天，而且菌龄一致性好，出菇整齐，适合工业化生产菌棒的企业应用。而且因为菌丝生长速度快，减少了杂菌污染的机会。

4、使用本发明的方法生产的绣球菌菌棒，从接种到第一潮菇采收可以控制在95-130天时间较传统培养方法减少了20-25天。

附图说明

图1是本发明的工艺流程图。

具体实施方式

本发明以下结合实施例（附图）作进一步描述：

本发明的利用绣球菌液体菌种和周转袋制备栽培菌棒的方法包括下述步骤：

a、液体菌种的制备：将绣球菌(sparassislatifolia)制成液体菌种（因液体菌种的制作属于常规技术，一般多采用试管母种——三角瓶液体菌种——发酵罐液体菌种逐级放大的经典工艺进行液体菌种制备，具体不再赘述）；

b、培养料的配制：按照松木屑：麦麸：糖的质量份数比＝70~85：15~30：1~2的比例将上述原料混配均匀加水搅拌，加水量为上述原料总质量的1.0~1.3倍，加水后继续搅拌3~10分钟；

c、周转袋的制备：将步骤b制备的培养料置于周转袋内，周转袋的装料系数为50-75％，将周转袋分层转入灭菌柜中进行灭菌，冷却降温后进行接种；

d、接种:将步骤a制备的液体菌种接入降温后的培养料中；震荡混合10-30秒、震荡频率1次/秒；

e、短暂培养：在温度为20℃-25℃的条件下培养15-20天；

f、菌棒制备：将短暂培养结束后周转袋中的培养料轻轻破碎为0.5-2cm的菌块，在洁净环境条件下分装压实至新的菌袋内制成菌棒；

g、继续培养：将步骤f中制备的菌棒在常温条件下继续培养40-50天，至菌棒内菌丝长满；

h、出菇管理：将步骤g中制备的菌棒在常温出菇管理条件下进行出菇、以及进行生物学效率统计。

本发明步骤c中所述的灭菌、降温的条件为：周转袋分层放入灭菌柜中进行灭菌，当周转袋内物料温度达到100℃-121℃时开始保温，保温时间为45-600分钟；当灭菌完成周转袋内压力恢复降至常压时，取出周转袋转入洁净接种室内冷却，在周转袋内原料温度降至20℃-30℃时进行接种。

本发明步骤c中所述周转袋采用聚丙烯、聚乙烯材料或其它耐高温材料如帆布袋制备而成，可以根据灭菌温度和货源自由选择，袋口装有透气胶塞、并采用颈环绑扎；周转袋的尺寸为：宽300mm*长600mm*厚0.1mm。

实施例1

a、液体菌种制备：将绣球菌(sparassislatifolia)制成液体菌种；

b、培养料的配制：按照松木屑：麦麸：糖的质量份数比＝70：29：1的比例将上述原料混配均匀加水搅拌，加水量为原料总质量的1.0倍，加水后继续搅拌时间3分钟；

c、周转袋的制备：装料系数为50％，将步骤b中制备的培养料后置于聚丙烯或聚乙烯材料制备的周转袋内，袋口装有透气胶塞、并采用颈环绑扎；周转袋的尺寸为：宽300mm*长600mm*厚0.1mm；将周转袋中分层转入灭菌柜中进行灭菌，当周转袋内物料温度达到121℃时开始保温，保温时间为45分钟；保温完成后打开灭菌柜的排气阀，使周转袋内压力降至常压，开启灭菌柜柜门，取出周转袋转入洁净接种室内冷却，在周转袋内原料温度降至20℃-30℃时进行接种；

d、接种：将步骤a制备的液体菌种接入降温后的培养料中，震荡混合10-30秒、震荡频率1次/秒；

e、短暂培养：在温度为20℃-25℃的条件下培养15天；

f、菌棒制备：将短暂培养结束后周转袋中的培养料破碎为0.5-2cm的菌块，用装袋机、在洁净环境条件下分装压实至包装袋内制成菌棒；

g、继续培养：将步骤f中制备的菌棒在常温条件下继续培养50天，至菌棒内菌丝长满；

h、出菇管理：将步骤g中制备的菌棒在常温出菇管理条件下进行出菇、以及进行生物学效率统计。

实施例2

本实施例与实施例1的区别在于：

b、培养料的配制：按照松木屑：麦麸：糖的质量份数比＝75：23：2的比例将上述原料混配均匀加水搅拌5分钟，加水量为原料总质量的1.1倍；

c、周转袋的制备：装料系数为60％；将周转袋分层放入灭菌柜或灭菌室中进行灭菌，当周转袋内物料温度达到100℃时开始保温，保温时间为600分钟；取出周转袋转入洁净接种室内冷却，在周转袋内原料温度降至20℃-30℃时进行接种。

d、接种：震荡混合20秒、震荡频率1次/秒；

e、短暂培养：在温度为20℃-25℃的条件下培养20天；

g、继续培养：将步骤f中制备的菌棒在常温条件下继续培养45天，至菌棒内菌丝长满。

其余方法均与实施例1相同。

实施例3

本实施例与实施例1的区别在于：

b、培养料的配制：按照松木屑：麦麸：糖的质量份数比＝80：18.5：1.5的比例将上述原料混配均匀加水搅拌，加水量为原料总质量的1.2倍；

c、周转袋的制备：装料系数为70％；将步骤b中制备的培养料后置于聚丙烯或聚乙烯材料制备的周转袋内，袋口装有透气胶塞、并采用颈环绑扎；将周转袋中分层转入灭菌柜中进行灭菌，当周转袋内物料温度达到121℃时开始保温，保温时间为45分钟；保温完成后打开灭菌柜排气阀，使周转袋内压力降至常压，开启灭菌柜柜门，取出周转袋转入洁净接种室内冷却，在周转袋内原料温度降至20℃-30℃时进行接种；

d、接种：震荡混合30秒、震荡频率1次/秒；

e、短暂培养：在温度为20℃-25℃的条件下培养15天；

g、继续培养：将步骤f中制备的菌棒在常温条件下继续培养50天至菌棒内菌丝长满。

其余方法均与实施例1相同。

实施例4

本实施例与实施例1的区别在于：

b、培养料的配制：按照松木屑：麦麸：糖的质量份数比＝85：14：1的比例将上述原料混配均匀后置于周转袋内，加水量为周转袋内原料总质量的1.3倍；

c、周转袋的制备：装料系数为75％；将周转袋分层放入灭菌柜或灭菌室中进行灭菌，当周转袋内物料温度达到100℃时开始保温，保温时间为600分钟；取出周转袋转入洁净接种室内冷却，在周转袋内原料温度降至20℃-30℃时进行接种。

d、接种：震荡混合30秒、震荡频率1次/秒；

e、短暂培养：在温度为25℃的条件下培养20天；培养：

g、继续培养：将步骤f中制备的菌棒在常温条件下继续培养40天，至菌棒内菌丝长满。

其余方法均与实施例1相同。

对实施例1-4的方法所制备的栽培菌棒进行了如下出菇和杂菌污染试验结果如下：

一、出菇时间

按照实施例1-4的方法试生产的600个菌棒栽培绣球菌，55-70天时间的培养绣球菌栽培菌棒中菌丝已长满；在温度10-20℃、光照800-1500lux的条件下刺激出菇15-20天，逐渐长出绣球菌菇蕾、小绣球菌和成熟的绣球菌，10天后开始采收。

二、绣球菌质量

按照实施例1-4的方法试生产的600个菌棒栽培绣球菌，从出菇的第一潮菇看，菇型、颜色和大小都比较理想，与早40天接种并同时开袋出菇的传统出菇方式比较并无不同，但出菇数量较多。

三、杂菌污染

按照实施例1-4的方法试生产的600个栽培菌棒中，未发现污染菌棒。