一种人血管瘤动物模型及其高成功率构建方法与流程

文档序号:19724437发布日期:2020-01-18 03:14阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种人血管瘤动物模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

s1、取离体的人血管瘤细胞备用;

s2、将人血管瘤细胞用pbs重悬均匀;

s3、将重悬后的人血管瘤细胞接种到免疫缺陷的动物皮下;

s4、腹腔注射雌二醇,得到母瘤;

s5、摘取母瘤,剥离干净并冲洗;

s6、将冲洗后的母瘤分成30-70mm3的肿瘤组织;

s7、将肿瘤组织接种到免疫缺陷的动物皮下,饲养后即得人血管瘤动物模型;

所述人血管瘤细胞包括人血管瘤内皮细胞、人血管瘤干细胞中的一种或两种的混合。

2.根据权利要求1所述的人血管瘤动物模型的构建方法,其特征在于,步骤s2中,所述的人血管瘤细胞先进行培养、增殖,然后消化,再将人血管瘤细胞数量为1×106~1×108个的消化液搜集、离心,去上清后用pbs重悬均匀。

3.根据权利要求2所述的人血管瘤动物模型的构建方法,其特征在于,所述培养采用dmem完全培养基,所述消化采用0.25%胰酶消化。

4.根据权利要求2所述的人血管瘤动物模型的构建方法,其特征在于,所述的人血管瘤细胞数量为1×106~5×107个,母瘤组织的体积为40~70mm3

5.根据权利要求4所述的人血管瘤动物模型的构建方法,其特征在于,所述的人血管瘤细胞数量为5×106~1×107个,母瘤组织的体积为50~60mm3

6.根据权利要求1所述的人血管瘤动物模型的构建方法,其特征在于,步骤s3中,所述的免疫缺陷的动物是指t细胞免疫缺陷的裸鼠或t细胞和b细胞严重联合免疫缺陷的scid鼠。

7.根据权利要求1所述的人血管瘤动物模型的构建方法,其特征在于,步骤s4中,所述雌二醇的注射量为0.1~1.0mg。

8.根据权利要求1所述的人血管瘤动物模型的构建方法,其特征在于,步骤s5中,所述摘取母瘤的具体步骤包括:将含有母瘤的免疫缺陷的动物处死后剥离母瘤。

9.根据权利要求1所述的人血管瘤动物模型的构建方法,其特征在于,步骤s6中,所述接种具体步骤如下:将肿瘤组织通过植入套管针植入的方式接种到6-8周龄的免疫缺陷动物皮下。

10.一种根据权利要求1-9任一所述方法构建的人血管瘤动物模型。

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