一种梯级流动诱导龟足腺介幼虫附着变态的梯级培育池的制作方法

本实用新型涉及水产养殖的技术领域，具体涉及一种梯级流动诱导龟足腺介幼虫附着变态的梯级培育池

背景技术：

龟足(capitulummitellalinnaeus)是一种具有较高经济价值和发展前景的海水养殖品种，隶属于节肢动物门、甲壳亚门、蔓足下纲、围胸总目、有柄目、铠茗荷亚目、指茗荷科(pollicipidae)龟足属(capitulum)。龟足俗称笔架、佛手、狗爪螺等，一般栖居在海浪剧烈冲击水流通畅的中、高潮区的岩石缝隙中，常见于群生簇状分布或与鳞笠藤壶、刺巨藤壶等伴生粘附于岩石或其它物体表面。由于受到栖息环境的制约，龟足种群规模较小且大小个体混杂，幼体常附着在成体柄部；采捕时均将成簇个体挖出，大量未达到食用规格的幼体也被带走，使种群资源受到极大破坏；撬砸等采挖行为也容易破坏岩礁生境，同时岩礁上的作业对采捕者而言也极具危险性。为了合理开发和保护龟足资源，有必要对龟足进行人工育苗和增养殖研究，这样，可大大减少对野生资源的采捕，控制对环境的过度开发，从而有效保护福建特色的海产品资源和海岸生态环境。

指茗荷科的另一属指茗荷属(pollicipe)具有很大的经济价值。在西班牙、葡萄牙p.polymerus和p.pollicipes更是被视为美味佳肴，作为一种巨大经济价值的渔业资源被高度开发利用，有着广阔的商业需求和很高的市场价格，目前每公斤的价格可高达200欧元。由于过度的开发利用，出于保护的需要，西班牙等国均限制其开采量。

蔓足类的生活史通常要经过营浮游生活的6期无节幼体、不摄食的腺介幼虫、固着的稚体和成体几个发育阶段。腺介幼虫是蔓足类发育过程中的一个重要阶段，唯一的作用是选择适宜附着的基质并完成变态。在腺介幼虫附着变态过程中，腺介幼虫的游泳足快速划动，以规律性的“步伐”在基质表面行走，通过第一触角探测附着基质，分泌临时胶体形成足迹；如果基质条件适宜，腺介幼虫则分泌永久胶体附着，进而变态为稚体，个体进入固着生活阶段。蔓足类浮游的腺介幼虫在附着变态过程中，其形态结构及生活习性发生了剧烈变化。如果腺介幼虫不能完成附着变态，随着营养物质的耗尽，最终走向死亡。无柄蔓足类藤壶是最主要的海洋污损生物，国外以纹藤壶(amphibalanusamphitrite)为模型生物对藤壶的附着变态机制进行了多年研究，希望能开发出干扰其附着变态的高效、绿色的防污剂。经济有柄蔓足类(指茗荷属和龟足属)与无柄蔓足类藤壶分属于不同的目，它们的形态和生活方式存在很大的差异。有柄类龟足分泌的粘胶剂借助于柄的基部固着在基质上，无柄类藤壶分泌的粘胶剂则通过整个底盘固着在基质上。无柄类藤壶在人工条件下腺介幼虫易于附着变态，而有柄类(龟足属和指茗荷属)对生态的要求特殊，在人工条件下腺介幼虫难以完成附着变态。对经济有柄蔓足类而言，腺介幼虫在室内完成附着变态是人工育苗的关键；对污损无柄蔓足类来说，干扰其附着变态是防除的关键。

虽然目前实验室实现从龟足卵的人工孵化、无节幼虫的培养、最后能够大规模培养出腺介幼虫，但要实现龟足的人工育苗，必须突破在人工条件下诱导龟足腺介幼虫附着变态的难题。龟足腺介幼虫人工条件下的附着变态是在室内完成其生活史的必经过程，也是实现龟足人工育苗的核心问题，因此需要筛选出能够有效诱导龟足腺介幼虫附着变态的方法或制剂。

保幼激素及类似物是最重要的一类昆虫激素,具有调控昆虫生长、发育、变态和生殖等的生理功能，同样能调控虾蟹等甲壳类的生长发育。虽然近年对保幼激素的作用分子机制进行了大量研究，但远未彻底揭示保幼激素的作用机理。由于保幼激素及类似物种类繁多，且具有多种生理调节功能；昆虫和甲壳类的种类多样，且同一物种不同的发育阶段、药物的浓度、作用的时机等都会影响激素的效应。因此，某一激素针对某一物种的作用往往是不同的。中国专利(专利号201510183853.8)公开了《一种利用保幼激素-ⅲ诱导龟足金星幼虫附着变态的方法》。在此工作的基础上，再次筛选出以保幼激素类似物烯虫炔酯为主要成份的诱变制剂。

技术实现要素：

本实用新型设置梯级培育池，辅以烯虫炔酯为主要作用成份配制成龟足腺介幼虫附着变态的专用诱导剂，解决了腺介幼虫变态和附着难题。本实用新型使用方法简单，使用后腺介幼虫的变态率可达到55％以上，获得的稚体能够正常生长发育成为成体。

为了实现上述目标，本实用新型采取的技术方案为：

所述的梯级培育池由梯级水池、空气系统、海水注入管和诱变剂滴加管构成，其中梯级水池由a池、b池、c池安水位的高度由高到低依次排列而成，a池、b池之间，b池、c池之间，分别通过a池溢水管、b池溢水管相连接；c池的海水储满后，尾水由尾水管排出；海水注入管开口于a池，诱变剂滴加管位于a池的上方。

所述的空气系统，由空压机、输气管和爆汽盘构成并以此连接，输气管铺设于位于a池、b池、c池的底部，爆气盘与空气管连接后设置在a池、b池、c池的底部的中心处。

所述的诱变剂滴加管，在总的输入管出口端并排设置5-10路带有阀门的滴加控制头。

利用本实用新型所述的梯级培育池用于腺介幼虫变态和附着，具体步骤如下：

1、按照烯虫炔酯：二甲基亚砜为1：45～60(w/v)的重量体积比例助溶，加乙醇配制成含有烯虫炔酯5～8mg/ml的诱导剂，4℃条件下低温保存。

2.首先在梯级培育池a池、b池、c池中设置好附着基，之后开始对a池、b池注清洁的海水，注满清洁的海水后，将收集培养的腺介幼虫移入梯级培育池的a池、b池海水中。

3、a池、b池海水进行持续微充气，使腺介幼虫自由分散。

4、微充气10分钟后，开启诱变剂滴加管，对a池连续滴加诱变剂，诱变剂滴加的速度以a池、b池水体总体积的水量计，每升每分钟6滴。

5.滴加20分钟后，启动梯级培育池的进水泵，注水管对a池进行不间断注水，24小时注水量为a池、b池水体总体积的1/3。连续的注水时间为4-6天。注入的清洁海水，混合后经由a池、b池流入梯级培育池的c池，当c池水满之后，由尾水管排出培育尾水。

6、4-6天后，停止注水和滴加，分别取出腺介幼虫附着基，即可转入稚体养殖阶段。

从取出腺介幼虫附着基可以发现a池、b池腺介幼虫附着变态量最大，而c池属于a池、b池的尾水，仍然有部分的附着变态体。

所述的清洁海水：水温为23-28℃，盐度为25-35，ph7.8-8.1。

所述的烯虫炔酯，购置于试剂公司。

采用本实用新型方法进行了4批次6天的跟踪试验，每批次等量投入10000只腺介幼虫，记录到每批次龟足腺介幼虫变态发育成稚体变态率数据如下：

从上表可以看出，本实用新型跟踪实验组4批次培育稚体的变态率都高于80％，平均数可达到82.5％，获得的稚体能够正常生长发育成为成体。

本实用新型结构简单，操作方便，能耗少，成本低，作用稳定，诱导效果显著，变态率可达80％以上。c池的设置，即延长了诱导海水的停留时间，同时可将a池、b池未附着的腺介幼虫进一步诱导附着，有效防止腺介幼虫活体的流失。

附图说明

图1是本实用新型所述的梯级培育池结构示意图。

图2是本实用新型所述的梯级培育池诱变剂滴加管结构示意图。

具体实施方式

本实用新型已连续在多批次的龟足腺介幼虫中进行诱导，均达到良好的效果。以下实施例方式对本发明做进一步的说明。

图1中，1是诱变剂滴加管；2是梯级水池中的a池；3是a池溢水管；4是梯级水池中的b池；5是b池溢水管；6是梯级水池中的c池；7是c池侧壁上的尾水管；8是空气系统中的爆气盘；9是输气管；10是海水注入管；11是空压机。a池(2)、b池(4)、c池(6)呈梯级水位崇高到低排列。a池溢水管(3)连接了a池(2)和b池(4)；b池溢水管(5)连接了b池(4)和c池(6)。

图2中，1是诱变剂滴加管；12是诱变剂滴加管(1)出口端并排设置5-10路带有阀门的滴加控制头。

实施例1

1.龟足腺介幼虫附着变态的诱变剂的配制：

按照烯虫炔酯：二甲基亚砜为1：50(w/v)的重量体积比例助溶，加乙醇配制成含有烯虫炔酯8mg/ml的诱变剂，4℃条件下低温保存。

2.梯级培育池结构：

本实施例所述的梯级培育池结构如技术方案所示。其中：

所述的梯级水池中a池(2)的尺寸为：1米(长)×1.5米(宽)×1米(高)，注水高度0.8米，水体体积为1.2立方米。

所述的梯级水池中b池(4)的尺寸为：1.2米(长)×1.5米(宽)×0.9米(高)，注水高度0.7米，水体体积为1.26立方米。

所述的梯级水池中c池(6)的尺寸为：0.8(长)×1.5(宽)×0.8(高)，注水高度0.6，水体体积为0.84立方米。c池(6)的海水充满后，尾水由尾水管(7)排出。

3.培育：

1首先在梯级培育池a池(2)、b池(4)注满清洁的海水后，将收集培养的5600只腺介幼虫移入梯级培育池的a池(2)、b池(4)海水中。

2)对a池(2)、b池(4)海水进行持续微充气，使腺介幼虫自由分散。

3)微充气10分钟后，开启诱变剂滴加管(1)，对a池(2)连续滴加诱变剂，诱变剂滴加的速度每分钟6滴，共开10路的滴加控制头(12)，持续滴加20分钟。

4)滴加20分钟后，启动梯级培育池的进水泵，海水注水管(10)对a池进行不间断注水，控制24小时注水量0.4立方米。连续的注水时间为5天。注入的清洁海水，混合后经由a池(2)、b池(4)流入梯级培育池的c池(6)，当c池(6)水满之后，由尾水管(7)排出培育尾水。

5)5天后，停止注水和滴加，分别取出腺介幼虫附着基，即可转入稚体养殖阶段。

6)取出腺介幼虫附着基进行计数，a池(2)、b池(4)和c池(6)中的变态稚体分别为：1994、2478、189只，合并后为4661，总变态率为83.23％。

本实施例所用的清洁海水：水温为23-28℃，盐度为25-35，ph7.8-8.1。

实施例2

1.龟足腺介幼虫附着变态的诱变剂的配制：

按照烯虫炔酯：二甲基亚砜为1：45(w/v)的重量体积比例助溶，加乙醇配制成含有烯虫炔酯8mg/ml的诱变剂，4℃条件下低温保存。

2.梯级培育池结构：

本实施例所述的梯级培育池结构如技术方案所示。其中：

所述的梯级水池中a池(2)的尺寸为：1米(长)×1.5米(宽)×1米(高)，注水高度800mm。

所述的梯级水池中b池(4)的尺寸为：1.2米(长)×1.5米(宽)×0.9米(高)，注水高度0.7米。

所述的梯级水池中c池(6)的尺寸为：0.8米(长)×1.5米(宽)×0.8米(高)，注水高度0.6米。c池(6)的海水充满后，尾水由尾水管(7)排出。

3.培育：

1)首先在梯级培育池a池(2)、b池(4)注满清洁的海水后，将收集培养的5600只腺介幼虫移入梯级培育池的a池(2)、b池(4)海水中。

2)对a池(2)、b池(4)海水进行持续微充气，使腺介幼虫自由分散。

3)微充气10分钟后，开启诱变剂滴加管(1)，对a池(2)连续滴加诱变剂，诱变剂滴加的速度每分钟4滴，共开10路的滴加控制头(12)，持续滴加150分钟。

4)滴加150分钟后，启动梯级培育池的进水泵，注水管(10)对a池(2)进行不间断注水，控制24小时注水量0.5立方米。连续的注水时间为5天。注入的清洁海水，混合后经由a池(2)、b池(4)流入梯级培育池的c池(6)，当c池(6)水满之后，由尾水管(7)排出培育尾水。

5)5天后，停止注水和滴加，分别取出腺介幼虫附着基，即可转入稚体养殖阶段。

6)取出腺介幼虫附着基进行计数，a池(2)、b池(4)和c池(6)中的变态稚体分别为：1994、2478、189只，合并后为4661，总变态率为83.23％。

本实施例所用的清洁海水：水温为23℃，盐度为35，ph7.8。

实施例3

1.龟足腺介幼虫附着变态的诱变剂的配制：

按照烯虫炔酯：二甲基亚砜为1：45(w/v)的重量体积比例助溶，加乙醇配制成含有烯虫炔酯8mg/ml的诱变剂，4℃条件下低温保存。

2.梯级培育池结构：

本实施例所述的梯级培育池结构如技术方案所示。其中：

所述的梯级水池中a池(2)的尺寸为：1米(长)×1米(宽)×1米(高)，注水高度0.8米，水体体积为1立方米。

所述的梯级水池中b池(4)的尺寸为：1米(长)×1米(宽)×0.9米(高)，注水高度0.7米。

所述的梯级水池中c池(6)的尺寸为：0.8米(长)×1米(宽)×0.8米(高)，注水高度0.6米。c池(6)的海水充满后，尾水由尾水管(7)排出。

3.培育：

1)首先在梯级培育池a池(2)、b池(4)注满清洁的海水后，将收集培养的5600只腺介幼虫移入梯级培育池的a池(2)、b池(4)海水中。

2)对a池(2)、b池(4)海水进行持续微充气，使腺介幼虫自由分散。

3)微充气10分钟后，开启诱变剂滴加管(1)，对a池(2)连续滴加诱变剂，诱变剂滴加的速度每分钟5滴，共开10路的滴加控制头(12)，持续滴加20分钟。

4)滴加20分钟后，启动梯级培育池的进水泵，注水管(10)对a池(2)进行不间断注水，控制24小时注水量0.36立方米。连续的注水时间为4天。注入的清洁海水，混合后经由a池(2)、b池(4)流入梯级培育池的c池(6)，当c池(6)水满之后，由尾水管(7)排出培育尾水。

5)4天后，停止注水和滴加，分别取出腺介幼虫附着基，即可转入稚体养殖阶段。

6)取出腺介幼虫附着基进行计数，a池(2)、b池(4)和c池(6)中的变态稚体分别为：1994、2478、189只，合并后为4661，总变态率为83.23％。

本实施例所用的清洁海水：水温为25℃，盐度为30，ph8.1。