本发明涉及一种综合防控土壤线虫方法，属于农业集约化生产技术领域。
背景技术：
根结线虫(root-knotnematode,meloidogynespp.)隶属于异皮科根结线虫属，是一类重要的土传性病原物。其寄主范围十分广泛，大约已超过3000种植物可被其侵染，如蔬菜、果树、观赏植物、烟草、药材及杂草等，其中以茄科、葫芦科、十字花科等植物受害尤为严重。据估计植物寄生线虫每年对世界农业生产造成的直接经济损失高达1000亿美元。据报道中国大约有50％的温室蔬菜存在不同程度的根结线虫危害，每年造成的经济损失高达4亿美元。特别是在保护地栽培中，根结线虫病已发展成为一种毁灭性病害，给保护地蔬菜的发展和稳产带来了严重的制约。因此，治理根结线虫病害已成为一项非常重要的农业生产任务。
目前，根结线虫的防治主要依靠化学药剂处理土壤为主，但由于杀线虫剂的开发较少，可供选择的范围较小，且以前广泛应用的一些药剂被禁用或停止开发，如dd、edb、丰索磷、除线磷、胺线磷、丁环硫磷等。而现有的大多数品种也面临着成本太高、防效不理想甚至产生药害和抗性等诸多问题，使植物线虫的化学防治工作面临困境。因此，寻找低毒、低价、高效的根结线虫防治方法是解决根结线虫危害的根本之一。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种综合防控土壤线虫方法，本发明中液氨和芝麻渣二者结合具有更好的土壤消毒作用，能有更好的土壤病害处理效果，二者协同利用是一种很好的低毒、低价、高效的土壤根结线虫防治方法。
本发明提供的一种综合防控土壤线虫方法，包括如下步骤：1)土壤翻耕处理：在植物寄生线虫病害的设施土壤表面撒施芝麻渣，然后进行翻耕；
2)分布带覆盖：在步骤1)处理后的设施土壤中挖若干个坑，每个坑中埋上一端打一个死结的具有小孔的分布带，所述分布带上面覆盖塑料薄膜，所述薄膜四周用土埋实；
3)液氨消毒处理：通过所述分布带将液氨施于所述设施土壤中；
4)揭膜：在所述液氨消毒后，揭开所述塑料薄膜，然后将所述设施土壤晾干，种植作物，进行常规田间管理。
上述的方法中，所述芝麻渣的撒施量可为10～100kg/亩。
上述的方法中，所述芝麻渣的撒施量可为50～100kg/亩，具体可为50kg/亩、100kg/亩。
上述的方法中，步骤1)中，所述翻耕的深度为20～30cm，具体可为20cm；
所述设施土壤的含水量可为30％以下。
上述的方法中，所述坑的深度可为20～30cm，具体可为30cm；
相邻的两个所述分布带的间距可为50cm～200cm；所述分布带具体可为宏德牌透明耐压软管，6mm；
步骤2)结束之后还包括在所述塑料薄膜四周浇水的步骤，防止漏药。
上述的方法中，相邻的两个所述分布带的间距可为70cm～150cm，具体可为150cm或100cm～150cm。
上述的方法中，步骤3)中，通过所述分布带将液氨施于所述设施土壤中的处理过程如下：
在所述分布带的开口端用塑料胶布将抗腐蚀的输药管包裹好，施药管和液氨钢瓶的减压阀相连，保证不漏气，所述输药管处的塑料薄膜用土埋实；将所述液氨钢瓶放在称上，开启阀门，将所述液氨通过所述分布带施于土壤中；施药完成后，关闭阀门，剪断所述分布带，让所述分布带自动缩回到所述塑料薄膜覆盖的土壤表面。
上述的方法中，所述液氨的施用量可为10～100kg/亩；具体可为25～70kg/亩，更具体可为25～50kg/亩。
本发明中，所使用的液氨存储在钢瓶中，为高纯液氨(纯度大于98％)，所用液氨储存钢瓶的规格具体可为：高度95cm，半径13cm，可装液氨30～35千克。
上述的方法中，步骤4)中，在所述液氨消毒后5～7天揭开所述塑料薄膜；
揭开所述塑料薄膜的过程如下：先将所述塑料薄膜两端揭开，待通风敞气至少1天后将所述塑料薄膜全部揭开；
所述设施土壤晾干7～10天。
上述的方法中，所述植物寄生线虫为根结线虫，具体可为根结线虫二龄幼虫j2。
本发明具有以下优点：
(1)本发明采用的液氨消毒方法是国内首次使用的土壤消毒方法，比其它的化学消毒方法更加安全，更加便宜，无毒害、无残留，没有环境风险。
(2)液氨消毒可以减少其它氮肥的施用量，提高土壤氮肥含量；同时减少其它药剂的使用量，起到减肥减药的双重效果。
(3)本发明中首次将液氨和芝麻渣协同使用，具有更稳定和更高效的根结线虫防治效果，并且具有一定的土壤改良效果。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中所使用的福气多，日本石原产业株式会社生产。
下述实施例中根结线虫二龄幼虫的数量采用显微镜进行检测；可培养微生物采用传统平板法进行检测，细菌采用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(牛肉膏3.0g，蛋白胨:10.0g，nacl5.0g，琼脂15～25g，蒸馏水1000ml，ph7.4-7.6)，25℃条件下，培养48h；真菌采用马铃薯葡萄糖琼脂培养(马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15g，蒸馏水1000ml)，25℃条件下，培养72h；放线菌采用改良高氏一号培养基(可溶性淀粉20g，kno31g，k2hpo40.5g，mgso4·7h2o0.5g，nacl0.5g，feso4·7h2o0.01g，琼脂20g，蒸馏水1000ml，ph7.4-7.6)，25℃条件下，培养120h。
实施例一、土壤综合消毒
(1)土壤翻耕处理
将根结线虫病害严重的设施土壤表面按照(50kg/亩和100kg/亩)的标准撒施芝麻渣，然后进行翻耕至不少于20cm深，土壤含水量达到30％以下；
(2)分布带覆盖
在施药前，先在土壤一端挖一个30cm深的坑，将具有小孔的分布带一端打一个死结，埋在所挖的坑中埋好压实(分布带末端)；每两个分布带的间距为150cm。分布带上面覆盖好塑料薄膜，薄膜四周用土埋石，在塑料薄膜四周浇水防止漏药。
(3)液氨消毒处理
在分布带的开口端用塑料胶布将抗腐蚀的输药管包裹好，施药管和减压阀相连，保证不漏气，输药管处的塑料薄膜用土埋实。将液氨钢瓶放在称上，开启阀门，将液氨通过分布带施于土壤中(当芝麻渣为50kg/亩时，液氨25kg/亩；当芝麻渣100kg/亩，液氨50kg/亩；当芝麻渣为0kg/亩时，液氨25kg/亩或50kg/亩；当芝麻渣、液氨为0kg/亩时，为对照(ck))。施药完成后，关闭阀门，剪断分布带，让分布带自动缩回到塑料薄膜覆盖的土壤表面。
(4)揭膜
一般液氨消毒7天后，即可揭开塑料薄膜，揭膜应先将膜两端揭开，待通风敞气1天后，再将膜全部揭开。揭膜后自然晾干10天，施肥做畦后种植作物，进行常规田间管理。
用于土壤根结线虫消毒的液氨为高纯液氨，所用液氨储存钢瓶的高度95cm，半径13cm，可装液氨30～35千克。
实施例二、综合消毒对黄瓜种植的影响
选择根结线虫病害严重并用于黄瓜种植的设施土壤进行效果评价。实验设8个处理：对照(ck)；液氨25kg/亩消毒；液氨50kg/亩消毒；芝麻渣50kg/亩处理；芝麻渣100kg/亩处理；液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩综合消毒；液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩综合消毒(前7组按照本发明实施例1中的方法进行施加液氨、芝麻渣)；福气多消毒(福气多在移栽时应用，2g福气多/棵，移栽之前处理和对照相同)。土壤处理完成后进行黄瓜苗(津优35)的移栽，并进行常规管理。
分别于土壤消毒揭膜后(全部处理都覆膜)7-10天进行土壤中根结线虫(二龄幼虫j2)数量以及可培养微生物(细菌、真菌和放线菌)数量的检测；黄瓜经5个月的生长后收获，进行黄瓜根结线虫病情指数、根结线虫(j2)数量、及可培养微生物(细菌、真菌和放线菌)数量和黄瓜产量的统计。样品采集采用5点取样，共5株，3次重复。土壤处理前的根结线虫(j2)数量在1065个/100g土壤。
根结线虫病情指数＝σ(各级植株数×该级数值)×100/(总株数×最高级别数)；分别根据分级标准计算病情指数。病情分级标准划分为6个等级，0级：根系健康，无根结；1级：0<受根结线虫危害的根肿胀数或根结<10％；2级：10％≤受根结线虫危害的根肿胀数或根结<25％；3级：25％≤受根结线虫危害的根肿胀数或根结<50％；4级：50％≤受根结线虫危害的根肿胀数或根结<75％；5级：75％≤受根结线虫危害的根肿胀数或根结≤100％。
表1综合消毒揭膜7天后根结线虫及土壤微生物的数量
注：数据经过spss20.0软件差异性分析(tukey分析，p<0.05)
从表1可看出，液氨和芝麻渣消毒处理可显著降低土壤中根结线虫的数量。随着液氨或者芝麻渣用量的增加，杀线效果都明显增加，二者联合使用效果更好。对照处理中100g土中含根结线虫(j2)810个，液氨25kg/亩消毒后j2检测值为292个/100g土，防效在64.0％；液氨50kg/亩消毒条件下，j2检测值为175个/100g土，防效在78.4％；芝麻渣50kg/亩和100kg/亩用量条件下的j2检测值分别为580和412个/100g土，防效分别为28.2％和49.1％；液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩综合消毒条件下，j2检测值为80个/100g土，防效为90.1％；液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩综合消毒条件下，j2检测值为22个/100g土，防效为97.3％。液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩综合消毒条件的根结线虫j2数量最少，防治效果最好。
液氨消毒处理对土壤中细菌、真菌和放线菌的数量也有一定的影响，从表1中可以看出，液氨和芝麻渣处理协同处理会降低土壤中细菌、真菌和放线菌的总数量，随着液氨和芝麻渣单一用量或者复合用量的增加细菌、真菌和放线菌的数量也会相应的降低。因此，液氨消毒除了可以解决根结线虫的危害问题，同样对其它土壤传播的病原微生物具有一定的防治作用。
表2黄瓜收获后不同指标的差异
注：数据经过spss20.0软件差异性分析(tukey分析，p<0.05)
从表2看出，黄瓜经5个月的生长收获后，不同处理存在明显的差异。在相同的种植条件下，对照(ck)的黄瓜线虫病情指数为67.5％。液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理具有最低的病情指数11.5％和最高的线虫防治效果83.0％，然后依次是液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩处理、福气多处理、液氨50kg/亩处理、液氨25kg/亩处理、芝麻渣100kg/亩处理、芝麻渣50kg/亩处理。土壤中j2的数量变化规律和病情指数的变化成正相关(表2)。液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理具有最低j2数量(399.2个/100g土)和最高的根结线虫数量防治效果(89.9％)。
黄瓜的最终产量和病情指数及j2数量成负相关(表2)。液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理具有最高的产量为5390kg/亩，增产效果最好，比对照(ck)的3300kg/亩，增产63.3％；液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理(5390kg/亩，增产63.3％)>液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩处理(5250kg/亩，增产59.1％)>福气多处理(5010kg/亩，增产51.8％)>液氨50kg/亩处理(4805kg/亩，增产45.6％)>液氨25kg/亩处理(4070kg/亩，增产23.3％)>芝麻渣100kg/亩处理(3800kg/亩，增产15.2％)>芝麻渣50kg/亩处理(3587kg/亩，增产8.7％)。
从病情指数、j2数量和黄瓜增产效果综合分析，液氨和芝麻渣联合施用具有比单一施用效果之和更好。病情指数方面，液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理的防效为83.0％，高于液氨50kg/亩处理的防效51.1％和芝麻渣100kg/亩处理的防效26.2％之和77.3％；同样，液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩处理的防效为66.7％，高于液氨25kg/亩处理的防效39.6％和芝麻渣50kg/亩处理的防效15.3％之和54.9％。j2防治效果和黄瓜增产效果也类似。
黄瓜收获后(表2)，所有处理之间土壤微生物数量(细菌、真菌和放线菌)没有太大的差异。说明高剂量的液氨和芝麻渣消毒能有效降低土壤微生物数量，能起到降低土壤病原微生物的作用(表1)，但一定时间内又能够有效的生态修复，不会产生土壤生态破坏问题(表2)。
以上结果表明，本发明土壤液氨和芝麻渣单独或者复合消毒不但可以解决黄瓜土壤根结线虫和其它土壤病害侵染的问题，同时不会引起土壤生态破坏问题。同时，液氨和芝麻渣复合施用具有比单一施用更好的效果。
实施例三、液氨消毒对番茄种植的影响
选择根结线虫病害严重并用于番茄种植的设施土壤进行效果评价。实验设8个处理：对照(ck)；液氨25kg/亩消毒；液氨50kg/亩消毒；芝麻渣50kg/亩处理；芝麻渣100kg/亩处理；液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩综合消毒；液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩综合消毒(前7组按照本发明实施例1中的方法进行施加液氨、芝麻渣)；福气多消毒(福气多在移栽时应用，2g福气多/棵，移栽之前处理和对照相同)。土壤处理完成后进行番茄苗(硬粉8号)的移栽，并进行常规管理。土壤处理前的根结线虫(j2)数量为576个/100g土壤。
其它实验方法、实验方案、检测指标没有特殊说明均同本发明实施例2。
表3综合消毒揭膜7天后根结线虫及土壤微生物的数量
注：数据经过spss20.0软件差异性分析(tukey分析，p<0.05)
表3的结果同表1的结果相似。从表3可看出，不同处理方法均可显著降低土壤中根结线虫的数量。液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理(防效98.6％)>液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩处理(防效92.8％)>液氨50kg/亩处理(防效74.9％)>液氨25kg/亩处理(防效60.4％)>芝麻渣100kg/亩处理(防效42.8％)>芝麻渣50kg/亩处理(防效28.1％)。同样，不同处理一定程度上会降低土壤中细菌、真菌和放线菌的数量，随着液氨用量和芝麻渣用量的增加细菌、真菌和放线菌的数量也会相应的降低。说明液氨和芝麻渣具有杀线虫和土壤微生物的作用。
从表4看出，在相同的管理条件下，液氨和芝麻渣处理都可以降低番茄种植土壤根结线虫病害的发生程度，起到很好的病害防控效果。本发明液氨和芝麻渣联合使用能够起到更好的杀线虫效果。表4番茄根结线虫病情指数所示，液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理具有最低的病情指数5.9％和最好的根结线虫防治效果89.4％，比化学药剂福气多的防治效果要好。液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理(防效89.4％)>液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩处理(防效79.7％)>福气多(防效77.6％)>液氨50kg/亩处理(防效57.5％)>液氨25kg/亩处理(防效43.8％)>芝麻渣100kg/亩处理(防效29.3％)>芝麻渣50kg/亩处理(防效13.1％)。另外，液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理的防效为89.4％，高于液氨50kg/亩处理的防效57.5％和芝麻渣100kg/亩处理的防效29.3％之和86.8％；液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩处理的防效为79.7％，高于液氨25kg/亩处理的防效43.8％和芝麻渣50kg/亩处理的防效13.1％之和56.9％。液氨和芝麻渣联合使用能够起到更好的杀线虫效果。
土壤中j2的变化规律和病情指数的变化类似。本发明液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理具有更少的土壤j2数量。液氨和芝麻渣联合使用具有更高的j2防治效果。番茄收获后(表4)，所有处理之间土壤微生物数量(细菌、真菌和放线菌)都在同一个数量级别，没有太大的差异。
表4番茄收获后不同指标的差异
注：数据经过spss20.0软件差异性分析(tukey分析，p<0.05)
番茄的最终产量和病情指数及j2数量成负相关(表4)。本发明液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理具有最高产量5394kg，增产50.9％。液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理(增加50.9％)>液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩处理(增加44.7％)>福气多(增加40.5％)>液氨50kg/亩处理(增加30.7％)>液氨25kg/亩处理(增加25.0％)>芝麻渣100kg/亩处理(增加17.5％)>芝麻渣50kg/亩处理(增加12.1％)。同样，液氨50kg/亩+芝麻渣100kg/亩处理的增产效果为50.9％，高于液氨50kg/亩处理的增效30.7％和芝麻渣100kg/亩处理的增效17.5％之和48.2％；液氨25kg/亩+芝麻渣50kg/亩处理的增效为44.7％，高于液氨25kg/亩处理的增效25.0％和芝麻渣50kg/亩处理的增效12.1％之和37.1％。液氨和芝麻渣联合使用具有比单一施用相加还要高的增产效果。
以上结果和黄瓜土壤处理结果类似，番茄土壤液氨和芝麻渣单一和本发明复合消毒都能解决土壤根结线虫和其它土壤病害侵染的问题，可以提高番茄的最终产量；但本发明液氨和芝麻渣协同处理的效果会更好。
本发明首先从减肥减药双向入手，既发挥了液氨作为肥料的作用，又发挥了液氨作为消毒剂的作用，减少土壤氮肥使用量的同时又减少了土壤熏蒸药剂的使用，具有很好的社会效应；另外，本发明在土壤中没有任何的有害残留，和其它土壤化学消毒剂比较，具有更好的生态效应；再次，液氨联合芝麻渣，增加了土壤消毒的稳定性和病害防治的广谱性，具有更好的防治效果；最后，液氨和芝麻渣联合消毒的价格在300～500元/亩，低于常规的化学土壤消毒费用，具有很好的经济效应。因此液氨和芝麻渣联合消毒是未来很好的土壤消毒方法。