1.一种利用微嫁接技术高效提升梨组培苗大田移栽成活率的方法,其特征在于包含以下步骤:
(1)砧木准备:对消毒后的梨洁净种胚进行培养,长至3~5厘米时选择单根幼苗作为砧木;
(2)接穗准备:选择继代培养20~30天,带有2~3片叶子,茎上无多余分生且叶片舒展的梨组培苗作为接穗;
(3)砧木和接穗处理:砧木处理:将单根砧木幼苗从子叶下方横切,去除子叶及以上部分,保留根部和部分茎段,然后从其顶端纵向劈开约1厘米;接穗处理:将接穗底端削成楔形,与砧木长度尽量保持一致;
(4)微嫁接:将接穗插入砧木劈口中,绑缚锡箔纸并用镊子将四周捏合紧密,将嫁接苗于生根培养基1/2ms+iba0.6mg/l+蔗糖30g/l+琼脂7.0g/lph=5.90~5.95中进行培养14~16天;
(5)炼苗:选择生根良好的嫁接苗,无菌环境中将锡箔纸摘除,闭瓶炼苗7天;
(6)移栽:将嫁接苗移栽到灭菌的营养土中,浇透水并在营养钵上方覆盖保鲜膜,戳适量小洞透气,置于植物光照培养箱中培养,6~9天嫁接苗生长稳定后摘除保鲜膜继续培养。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述的步骤(1)砧木选择野生梨,优选山梨、杜梨和川梨。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于步骤(1)砧木准备:取消毒后的梨洁净种胚在ms+30g蔗糖+7.5g琼脂ph=5.80~6.0培养基中进行暗培养,待种子子叶变绿,胚根开始伸长,转移至生长培养基ms+6-ba1.0mg/l+iba0.5mg/l+蔗糖30g+琼脂7.5g,ph=5.80~6.0中光下培养,长至3~5厘米时选择单根幼苗作为砧木。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于步骤(1)中梨洁净种胚通过以下方法获得:选择干净的野生梨种子,于无菌环境中进行消毒,消毒方法:75%无水乙醇消毒1分钟,10%次氯酸钠溶液消毒5分钟,期间反复震荡,充分消毒杀菌,每一步消毒处理后用灭菌蒸馏水冲洗3~5次;在灭过菌的滤纸上,用镊子按住消毒后的种子,将刀从种子上方垂直插入远离胚根的一端,尽量不伤害种胚,后倾斜角度沿种子侧边划开种皮,去除内外种皮,取出种胚,期间应避免伤及胚根。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于(2)接穗准备:接穗为在ms+6-ba2.0mg/l+iba0.2mg/l+蔗糖30g/l+琼脂7.5g/lph=5.8~6.0的培养基中继代培养20~30天的梨组培苗,带有2~3片叶子,茎上无多余分生且叶片舒展。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤(6):移栽时用清水将嫁接苗根部残留的培养基轻轻涮洗干净,移栽到经过121℃20min高温高压灭菌后的营养土中,移栽后浇透水并在营养钵上方覆盖保鲜膜,戳适量小洞透气,置于植物光照培养箱,光照16h;光强2500lx;温度24℃±1℃中培养,一周左右嫁接苗生长稳定后摘除保鲜膜继续培养。