利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法与流程

本发明涉及一种桑树多倍体诱导方法。更具体地说，本发明涉及一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法。
背景技术：
：桑树在进行良种繁育和种质资源创新过程中要经常进行桑树诱变，其中化学诱变见效最快最直接的方法，原理是依靠化学诱变剂的作用，诱发植物遗传物质突变，从而引起的植物外观形态特征的变异。因此使用化学诱变剂进行桑树诱变是种质资源创新研究中最常见也是使用频率最高的一种方式。在桑树化学诱变的实际操作中，方法单一，费时费力，用药操作流程是脱脂棉卷团，镊子夹取蘸药，浸药棉放置于芽眼处。该方法看起来操作简单，做起来却相当费时费力且工作效率低下。同时，该方法滴药量只能依据随机卷的棉团大小，难以控制用量，致使药液常常溢出到周围叶片、苗茎后又进入到育苗土中，不但造成了诱导剂的浪费，对于桑苗的周围茎叶也造成了损伤危害。基于化学诱变剂价格昂贵，所以，这种浪费无形中提升了诱导苗成本。另外，由于浸药棉花团直接裸置于芽眼处，外界空气流通快，药液蒸发快，通常一天需要进行两次或三次的重复做工，即便如此，在天气干燥时，仍会存在药棉干燥的空档。并且，干燥的棉花团质轻常常被风吹走或掉落，对于掉落或不见的药棉，在下一次用药时又要做重复操作，再一次取脱脂棉、卷团、找镊子夹取、蘸药，最后再轻轻放置于芽眼上，极大地增加了工作量和劳动时间。而且传统的滴药方法综合影响因素多，使得桑苗的染色体诱导效果也大打折扣，据统计诱导成功率仅约20-30％。技术实现要素：本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。本发明还有一个目的是提供一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其能够有效解决传统方法滴药用时长、劳动强度大、人工成本高、诱导效果低和空气污染重等问题，脱脂棉和诱变剂的浪费也从根本上得到了遏制；此外，利用支撑杆的矫正作用，原来的斜生或弯曲苗都可以作为有效诱导苗，明显提升了资源利用率；还有本发明方法利用套棉管直接罩于芽眼上且内腔两侧嵌有锯齿，不但固定了药棉体的位置，隔绝了周围空气流通，直接降低了化学药剂挥发，还减少了污染，确保了诱导效果。为了实现本发明的这些目的和其它优点，提供了一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其包括以下步骤：1)桑种育苗，出苗3-5天待两片叶子完全展开时且露出真叶芽眼，对桑苗进行化学诱导；2)套棉管的下端对准桑苗的芽眼，并将套棉管固定在桑苗的芽眼上；其中，所述套棉管包括：药棉；管体，其下端的管壁上设置有一对缺口，所述药棉填充在所述管体中，两个缺口分别卡接在幼苗两片叶子的叶柄上以将套棉管固定在桑苗上；3)往所述药棉滴入诱导剂，持续种植，并进行染色体倍数鉴定，获得诱导成功的桑苗。优选的是，还包括2根支撑杆，所述支撑杆沿着管体的长度方向设置在所述管体的下端，所述支撑杆与两个所述缺口之间的管壁固定连接，支撑杆插入泥土中将套棉管固定在桑苗芽眼上方。优选的是，还包括定位件，所述管体下端的管壁内折以在所述管壁上形成所述缺口，内折到管体中的管壁形成所述定位件。即管体下端管壁上沿着其长度方向开设有两条贯穿管壁的缝隙，两条缝隙间的管壁内折到管体中形成所述定位件，且在管壁处形成所述缺口。优选的是，所述定位件呈锯齿状结构。优选的是，上午的8～10点植物细胞活跃期滴药一次，滴药期为5～7天。优选的是，所述诱导剂为秋水仙碱。优选的是，诱导剂滴加量以药棉湿润不外溢为标准。优选的是，诱导剂滴加完成后，桑苗继续种植50-60天，待苗茎木质化后再移栽大田，移栽时选择叶片出现有畸形变化的植株种植，待桑苗于大田生长稳定，出现新生叶片时，摘取嫩芽或新生叶进行染色体倍数的签定，保留诱导成功的苗木，加强水肥管理，持续种植观察，进一步发现目标性状优良的植株，剔除非目标性状的植株，优良性状的植株进入阶段性的嫁接单株选，为桑树良种繁育做准备。优选的是，桑种育苗包括以下步骤：a、播种前将育苗盘装好育苗土，并使穴装育苗土的高度距顶边2-3cm，育苗土浇透水以待播种，其中，育苗盘的穴深20-25cm，上口直径15cm；b、温度在25-35℃时，温水浸种12-24h进行催芽处理，每穴播种4-7粒；c、播种后进行遮阴，保持育苗土湿润以培育出幼苗。本发明至少包括以下有益效果：一、利用本发明方法进行桑苗多倍体诱导，一天往药棉滴药一次即可保持药棉的全天湿润，无需重复做工，不但省去了多次用药的人工，避免了脱脂棉、诱导剂的浪费，减少了人为接触化学试剂的时间，还从根本上提高了劳动功效，大大地提升了诱导质量，也减少了原来药棉裸露在外的空气污染。二、管体下端的部分管壁内折以形成所述缺口和定位件，两缺口与芽左右两片叶子的叶子卡接，使管体更稳固地扣套在芽眼区域，不但克服了棉花团脱落造成的繁琐重复工作，而且管体框选了滴药区域，使滴药目标更准确，滴药更容易、工作效率更高，同时也有效避免了药液溢流到非目标区域造成的危害和浪费；定位件的锯齿与管体中的脱脂棉咬合在一起，避免了浸药棉位置的偏移、掉落，同时套棉管管体能减少诱导剂挥发，保证药棉的持续湿润，以及通过支撑杆矫正弯曲苗、平衡滴药区域，从根本上提升了桑苗的使用率和诱导效果，试验表明使用本发明的套棉管诱导的成功率达45％以上，高于传统方法2倍多。三、通过将支撑杆扎入育苗土中，不但能将斜生苗、弯曲苗有效固定、平衡生长点，及早矫正桑苗生长，还克服了药棉易脱落、难滴药的难题，极大地提升了工作效率和劳动质量。利用本发明进行滴药诱导平均用时1～5秒/株/人，与传统用药方法相比工作效率提升了83％～90％，另外，本发明的套棉管从根本上解决了整个诱导期药棉位置偏离、干燥的问题。四、本发明方法具有操作简单，极大地减少了操作人员接触化学诱导剂的时间，一天往药棉滴药一次即可保持药棉的全天湿润，能提高桑苗的诱导成功率以及矫正弯曲幼苗等特点。本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。附图说明图1为本发明一个实施例的立体结构示意图(药棉未示出)；图2为本发明一个实施例的立体结构示意图(药棉未示出)；图3为发明一个实施例的俯视结构示意图(药棉未示出)；图4说明的是本发明使用时的结构示意图。1、管体；2、缺口；3、支撑杆；4、定位件；5、叶子；6、茎秆。具体实施方式下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。实施例1如图1-4所示，一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其包括以下步骤：1)桑种育苗，出苗3天待两片叶子5完全展开时且露出真叶芽眼，对桑苗进行化学诱导；2)套棉管的下端对准桑苗的芽眼，并将套棉管固定在桑苗的芽眼上；其中，所述套棉管包括：药棉；管体1，其下端的管壁上设置有一对缺口2，所述药棉填充在所述管体1中，两个缺口2分别卡接在幼苗两片叶子5的叶柄上以将套棉管固定在桑苗上；3)往所述药棉滴入诱导剂，持续种植，并进行染色体倍数鉴定，获得诱导成功的桑苗。实施例2如图1-4所示，一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其包括以下步骤：1)桑种育苗，出苗5天待两片叶子5完全展开时且露出真叶芽眼，对桑苗进行化学诱导；2)套棉管的下端对准桑苗的芽眼，并将套棉管固定在桑苗的芽眼上；其中，所述套棉管包括：药棉；管体1，其下端的管壁上设置有一对缺口2，所述药棉填充在所述管体1中，两个缺口2分别卡接在幼苗两片叶子5的叶柄上以将套棉管固定在桑苗上；还包括2根支撑杆3，所述支撑杆3沿着管体1的长度方向设置在所述管体1的下端，所述支撑杆3与两个所述缺口2之间的管壁固定连接，支撑杆3插入泥土中将套棉管固定在桑苗芽眼上方；3)往所述药棉滴入诱导剂，持续种植，并进行染色体倍数鉴定，获得诱导成功的桑苗。实施例3如图1-4所示，一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其包括以下步骤：1)桑种育苗，出苗4天待两片叶子5完全展开时且露出真叶芽眼，对桑苗进行化学诱导；2)套棉管的下端对准桑苗的芽眼，并将套棉管固定在桑苗的芽眼上；其中，所述套棉管包括：药棉；管体1，其下端的管壁上设置有一对缺口2，所述药棉填充在所述管体1中，两个缺口2分别卡接在幼苗两片叶子5的叶柄上以将套棉管固定在桑苗上；还包括2根支撑杆3，所述支撑杆3沿着管体1的长度方向设置在所述管体1的下端，所述支撑杆3与两个所述缺口2之间的管壁固定连接，支撑杆3插入泥土中将套棉管固定在桑苗芽眼上方；还包括定位件4，所述管体1下端的管壁内折以在所述管壁上形成所述缺口2，内折到管体1中的管壁形成所述定位件4，即管体1下端管壁上沿着其长度方向开设有两条贯穿管壁的缝隙，两条缝隙间的管壁内折到管体1中形成所述定位件4，且在管壁处形成所述缺口2；3)往所述药棉滴入诱导剂，持续种植，并进行染色体倍数鉴定，获得诱导成功的桑苗。实施例4如图1-4所示，一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其包括以下步骤：1)桑种育苗，出苗3天待两片叶子5完全展开时且露出真叶芽眼，对桑苗进行化学诱导；2)套棉管的下端对准桑苗的芽眼，并将套棉管固定在桑苗的芽眼上；其中，所述套棉管包括：药棉；管体1，其下端的管壁上设置有一对缺口2，所述药棉填充在所述管体1中，两个缺口2分别卡接在幼苗两片叶子5的叶柄上以将套棉管固定在桑苗上；还包括2根支撑杆3，所述支撑杆3沿着管体1的长度方向设置在所述管体1的下端，所述支撑杆3与两个所述缺口2之间的管壁固定连接，支撑杆3插入泥土中将套棉管固定在桑苗芽眼上方；还包括定位件4，所述管体1下端的管壁内折以在所述管壁上形成所述缺口2，内折到管体1中的管壁形成所述定位件4，所述定位件4呈锯齿状结构，即管体1下端管壁上沿着其长度方向开设有两条贯穿管壁的缝隙，两条缝隙间的管壁内折到管体1中形成所述定位件4，且在管壁处形成所述缺口2；3)往所述药棉滴入诱导剂，持续种植，并进行染色体倍数鉴定，获得诱导成功的桑苗。实施例5如图1-4所示，一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其包括以下步骤：1)桑种育苗，出苗5天待两片叶子5完全展开时且露出真叶芽眼，对桑苗进行化学诱导；2)套棉管的下端对准桑苗的芽眼，并将套棉管固定在桑苗的芽眼上；其中，所述套棉管包括：药棉；管体1，其下端的管壁上设置有一对缺口2，所述药棉填充在所述管体1中，两个缺口2分别卡接在幼苗两片叶子5的叶柄上以将套棉管固定在桑苗上；还包括2根支撑杆3，所述支撑杆3沿着管体1的长度方向设置在所述管体1的下端，所述支撑杆3与两个所述缺口2之间的管壁固定连接，支撑杆3插入泥土中将套棉管固定在桑苗芽眼上方；还包括定位件4，所述管体1下端的管壁内折以在所述管壁上形成所述缺口2，内折到管体1中的管壁形成所述定位件4，即管体1下端管壁上沿着其长度方向开设有两条贯穿管壁的缝隙，两条缝隙间的管壁内折到管体1中形成所述定位件4，且在管壁处形成所述缺口2；所述定位件4呈锯齿状结构；3)上午的8点在植物细胞活跃期往所述药棉滴入诱导剂一次，滴药期为5天，持续种植，并进行染色体倍数鉴定，获得诱导成功的桑苗。实施例5如图1-4所示，一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其包括以下步骤：1)桑种育苗，出苗5天待两片叶子5完全展开时且露出真叶芽眼，对桑苗进行化学诱导；2)套棉管的下端对准桑苗的芽眼，并将套棉管固定在桑苗的芽眼上；其中，所述套棉管包括：药棉；管体1，其下端的管壁上设置有一对缺口2，所述药棉填充在所述管体1中，两个缺口2分别卡接在幼苗两片叶子5的叶柄上以将套棉管固定在桑苗上；还包括2根支撑杆3，所述支撑杆3沿着管体1的长度方向设置在所述管体1的下端，所述支撑杆3与两个所述缺口2之间的管壁固定连接，支撑杆3插入泥土中将套棉管固定在桑苗芽眼上方；还包括定位件4，所述管体1下端的管壁内折以在所述管壁上形成所述缺口2，内折到管体1中的管壁形成所述定位件4，即管体1下端管壁上沿着其长度方向开设有两条贯穿管壁的缝隙，两条缝隙间的管壁内折到管体1中形成所述定位件4，且在管壁处形成所述缺口2，所述定位件4呈锯齿状结构；3)上午的10点在植物细胞活跃期往所述药棉滴入秋水仙碱诱导剂一次，诱导剂滴加量以药棉湿润不外溢为标准，滴药期为7天，持续种植，并进行染色体倍数鉴定，获得诱导成功的桑苗。实施例6如图1-4所示，一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其包括以下步骤：1)桑种育苗，出苗4天待两片叶子5完全展开时且露出真叶芽眼，对桑苗进行化学诱导；2)套棉管的下端对准桑苗的芽眼，并将套棉管固定在桑苗的芽眼上；其中，所述套棉管包括：药棉；管体1，其下端的管壁上设置有一对缺口2，所述药棉填充在所述管体1中，两个缺口2分别卡接在幼苗两片叶子5的叶柄上以将套棉管固定在桑苗上；还包括2根支撑杆3，所述支撑杆3沿着管体1的长度方向设置在所述管体1的下端，所述支撑杆3与两个所述缺口2之间的管壁固定连接，支撑杆3插入泥土中将套棉管固定在桑苗芽眼上方；还包括定位件4，所述管体1下端的管壁内折以在所述管壁上形成所述缺口2，内折到管体1中的管壁形成所述定位件4，即管体1下端管壁上沿着其长度方向开设有两条贯穿管壁的缝隙，两条缝隙间的管壁内折到管体1中形成所述定位件4，且在管壁处形成所述缺口2，所述定位件4呈锯齿状结构；3)上午的9点在植物细胞活跃期往所述药棉滴入秋水仙碱诱导剂一次，诱导剂滴加量以药棉湿润不外溢为标准，滴药期为6天，持续种植，并进行染色体倍数鉴定，获得诱导成功的桑苗。实施例7如图1-4所示，一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其包括以下步骤：1)桑种育苗，出苗3天待两片叶子5完全展开时且露出真叶芽眼，对桑苗进行化学诱导；2)套棉管的下端对准桑苗的芽眼，并将套棉管固定在桑苗的芽眼上；其中，所述套棉管包括：药棉；管体1，其下端的管壁上设置有一对缺口2，所述药棉填充在所述管体1中，两个缺口2分别卡接在幼苗两片叶子5的叶柄上以将套棉管固定在桑苗上；还包括2根支撑杆3，所述支撑杆3沿着管体1的长度方向设置在所述管体1的下端，所述支撑杆3与两个所述缺口2之间的管壁固定连接，支撑杆3插入泥土中将套棉管固定在桑苗芽眼上方；还包括定位件4，所述管体1下端的管壁内折以在所述管壁上形成所述缺口2，内折到管体1中的管壁形成所述定位件4，即管体1下端管壁上沿着其长度方向开设有两条贯穿管壁的缝隙，两条缝隙间的管壁内折到管体1中形成所述定位件4，且在管壁处形成所述缺口2，所述定位件4呈锯齿状结构；3)上午的8点在植物细胞活跃期往所述药棉滴入秋水仙碱诱导剂一次，诱导剂滴加量以药棉湿润不外溢为标准，滴药期为7天，桑苗继续种植50天，待苗茎木质化后再移栽大田，移栽时选择叶片出现有畸形变化的植株种植，待桑苗于大田生长稳定，出现新生叶片时，摘取嫩芽或新生叶进行染色体倍数的签定，保留诱导成功的苗木，加强水肥管理，持续种植观察，进一步发现目标性状优良的植株，剔除非目标性状的植株，优良性状的植株进入阶段性的嫁接单株选，为桑树良种繁育做准备。实施例8如图1-4所示，一种利用套棉管进行桑幼苗染色体倍性诱导的方法，其包括以下步骤：1)桑种育苗，出苗5天待两片叶子5完全展开时且露出真叶芽眼，对桑苗进行化学诱导；其中，桑种育苗包括以下步骤：a、播种前将育苗盘装好育苗土，并使穴装育苗土的高度距顶边3cm，育苗土浇透水以待播种，其中，育苗盘的穴深20cm，上口直径15cm；b、温度在25℃时，温水浸种12h进行催芽处理，每穴播种4粒；c、播种后进行遮阴，保持育苗土湿润以培育出幼苗；2)套棉管的下端对准桑苗的芽眼，并将套棉管固定在桑苗的芽眼上；其中，所述套棉管包括：药棉；管体1，其下端的管壁上设置有一对缺口2，所述药棉填充在所述管体1中，两个缺口2分别卡接在幼苗两片叶子5的叶柄上以将套棉管固定在桑苗上；还包括2根支撑杆3，所述支撑杆3沿着管体1的长度方向设置在所述管体1的下端，所述支撑杆3与两个所述缺口2之间的管壁固定连接，支撑杆3插入泥土中将套棉管固定在桑苗芽眼上方；还包括定位件4，所述管体1下端的管壁内折以在所述管壁上形成所述缺口2，内折到管体1中的管壁形成所述定位件4，即管体1下端管壁上沿着其长度方向开设有两条贯穿管壁的缝隙，两条缝隙间的管壁内折到管体1中形成所述定位件4，且在管壁处形成所述缺口2，所述定位件4呈锯齿状结构；3)上午的10点在植物细胞活跃期往所述药棉滴入秋水仙碱诱导剂一次，诱导剂滴加量以药棉湿润不外溢为标准，滴药期为7天，桑苗继续种植60天，待苗茎木质化后再移栽大田，移栽时选择叶片出现有畸形变化的植株种植，待桑苗于大田生长稳定，出现新生叶片时，摘取嫩芽或新生叶进行染色体倍数的签定，保留诱导成功的苗木，加强水肥管理，持续种植观察，进一步发现目标性状优良的植株，剔除非目标性状的植株，优良性状的植株进入阶段性的嫁接单株选，为桑树良种繁育做准备。将套棉管安放于桑苗的芽眼上，将两片叶子5的叶柄对准管体1的两个缺口2，并将叶柄嵌入缺口2中进行卡接，幼苗的茎秆6置于两根支撑杆3间，将支撑杆3插入育苗土中1～2cm，即完成了套棉管固定。比较例1试验a：采用传统的化学诱变方法对100株幼苗进行诱变，操作流程为脱脂棉卷团，镊子夹取蘸药，浸药棉放置于芽眼处，每天用药一次，连续用药7天，桑苗继续种植60天，待苗茎木质化后再移栽大田，移栽时选择叶片出现有畸形变化的植株种植，待桑苗于大田生长稳定，出现新生叶片时，摘取嫩芽或新生叶进行染色体倍数的签定，试验重复3次，统计诱导成功率，结果如表1所示。试验b：采用传统的化学诱变方法对100株幼苗进行诱变，操作流程为脱脂棉卷团，镊子夹取蘸药，浸药棉放置于芽眼处，每天用药3次，连续用药7天，桑苗继续种植60天，待苗茎木质化后再移栽大田，移栽时选择叶片出现有畸形变化的植株种植，待桑苗于大田生长稳定，出现新生叶片时，摘取嫩芽或新生叶进行染色体倍数的签定，试验重复3次，统计诱导成功率，结果如表1所示。试验c：采用实施例8的方法对100株桑树幼苗进行多倍体诱导，试验重复3次，统计诱导成功率，结果如表1所示。表1诱导成功率(％)试验a8.9试验b21.5试验c48.7从表1结果可知，对芽眼进行多次滴药具有提高诱变成功率的作用，使用本发明方法长时间的保持芽眼的湿润，能显著提高桑树幼苗的诱变成功率。尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用。它完全可以被适用于各种适合本发明的领域。对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改。因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。当前第1页12