一种辣椒或茄子单倍体植株的染色体加倍方法与流程

文档序号:21398831发布日期:2020-07-07 14:31阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种辣椒或茄子单倍体植株的染色体加倍方法,包括:

(1)250ml或500ml无菌培养瓶中加入10ml~20ml无菌加倍处理液,所述加倍处理液由0.1~0.4%秋水仙碱溶液和体积百分数为1%~4%的dmso组成;

(2)选取株高为3cm~5cm的辣椒或茄子花药培养再生植株,保留根系或切去根系,置于无菌培养瓶中,准备诱导;

(3)将无菌培养瓶横放,固定在滚动摇床上,以20rpm~30rpm的速度让加倍处理液充分、不间断地浸润植株,进行震荡浸苗处理24h~48h,诱导培养条件为温度22℃~28℃,湿度40%~60%,光照时间12h~16h,光照强度1000lx~2000lx;

(4)步骤(3)加倍处理24h~48h后,取出花药培养再生植株,用无菌水冲洗3~5次,转接至ms基本培养基中进行光照培养,培养一个月后即得二倍体植株;光照培养条件为温度22℃~28℃,湿度40%~60%,光照时间12h~16h,光照强度2000lx~4000lx。

2.根据权利要求1所述的辣椒或茄子单倍体植株的染色体加倍方法,其特征在于,步骤(2)中辣椒或茄子花药培养再生植株是通过以下步骤获得;

(a)取辣椒或茄子花粉发育时期为单核靠边期的辣椒、茄子花蕾,在无菌条件下经10%的次氯酸钠表面消毒10min~20min,无菌水冲洗3次;

(b)将花药剥离出来,接种于诱导培养基中得到花粉胚状体,将胚状体转接至不附加任何生长调节剂的ms基本培养基中,长成小植株;再将小植株转接至生根壮苗培养基,最终得到花培再生植株;

辣椒花粉胚状体的诱导培养基为ms基本培养基中加入0.1mg/l~1mg/lba、0.1mg/l~1mg/liaa和0.01mg/l~0.1mg/lnaa;

茄子花粉胚状体的诱导培养基为ms基本培养基中加入0.05mg/l~2mg/lkt、0.1mg/l~1mg/liaa、0.01mg/l~0.1mg/lnaa和0.1%~0.3%活性炭;

所述生根壮苗培养基为ms基本培养基加入iba1mg/l。


技术总结
本发明一种辣椒或茄子单倍体植株的染色体加倍方法,属于植物组织培养技术领域。所述方法包括:在无菌培养瓶中加入无菌秋水仙碱溶液和无菌DMSO,将辣椒或茄子花药培养再生植株保留或去根,置于无菌培养瓶中,进行震荡浸苗处理;处理24h~48h后,取出花药培养再生植株,转接至MS基本培养基进行光照培养,培养一个月后即得到二倍体植株。本发明的方法具有以下优点:(1)可以保证植株上所有的生长点都处理到;(2)可以确保处理期间,植株的生长点始终保持有处理液,但处理液用量较少,成本减少;(3)加倍成功率60%~100%。

技术研发人员:邓晓梅;张秦;惠志明;张树根;张军民;李春玲
受保护的技术使用者:北京市海淀区植物组织培养技术实验室;北京海花生物科技有限公司
技术研发日:2020.04.28
技术公布日:2020.07.07
当前第2页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1