1.本发明涉及一种制备使心功能降低的突变型cnpase斑马鱼模型及应用的方法。
2.根据权利要求书1所述的心功能降低，其特征包括心力衰竭、心动过缓。
3.根据权利要求2所述的心力衰竭，其特征在于伴随心律过缓，突变型cnpase斑马鱼出现心脏离心性扩脏性肥大、围心腔水肿及心率减缓。
4.根据权利要求3所述的心率减缓，其特征在于心输出量(cardiacoutput)下降大约50％左右收缩分数(fractionalshortening)、射血分数(ejection)大约下降50％左右及部分突变型斑马鱼可自发心力衰竭。
5.根据权利要求书1所述的心功能降低，其特征包括心律失常。
6.根据权利要求书1所述制备突变型的cnpase的斑马鱼模型，其特征在于涉及调控cnpase斑马鱼，包括调控cnpase的基因突变、基因移码、干扰转录方式及敲除或敲减cnpase。
7.根据权利要求书1所述的制备方法，其特征在于采用了crispr/cas9介导的cnpase基因编辑系统，针对cnpase的外显子序列，设计特异性的一对sgrna序列。
8.根据权利要求书7所述的cnpase的外显子序列，其特征在于针对cnpase的第一个外显子序列，设计特异性的一对sgrna序列，sgrna1其序列特征为5′-taatacgactcactata[ggaagtggcggctcagcaagagg]gttttagagctagaa-3′，sgrna2其序列特征为taatacgactcactata[ggaggaggaagctgtgaaagagg]gttttagagctagaa-3′，其中斜体序列为t7启动子序列，红色部分为sgrna核心序列；通用引物的序列为5′-aaaagcaccgactcggtgccactttttcaagttgataacggactagccttattttaacttgctatttctagctctaaaac-3′。
9.根据权利要求书7所述的crispr/cas9介导的cnpase基因编辑系统，其特征在于采用fill-inpcr方法和纯化的方法制备sgrnadna模板，结合体外转录以及乙醇沉淀的方法，获取sgrna。
10.根据权利要求书7所述的crispr/cas9介导的cnpase基因编辑系统，其特征在于，通过显微注射的方法，在斑马鱼胚胎单细胞期，注射1nlsgrna与cas9蛋白混合物；培育f1代。
11.根据权利要求书7所述的crispr/cas9介导的cnpase基因编辑系统，其特征在于，f1通过提取鱼尾dna，使用pcr扩增，采用桑格测序法筛选和确认cnpase突变型斑马鱼；采用突变型f1斑马鱼进行交配，筛选f2代斑马鱼。
12.根据权利要求书6所述的制备方法，其特征在于采用了吗啉代反义寡核苷酸(morpholino，mo)技术，构建了抑制剪接的mo(mo-spl)下调斑马鱼cnpase基因所需的重组质粒-cnpase-mo-spl。
13.根据权利要求书1所述的制备方法，其特征在于通过显微注射的方式，将cnpase-mo-spl或control-mo注射到1-2个细胞阶段的胚胎,阻遏原始转录本的剪接。
14.根据权力要求1所述的突变型cnpase斑马鱼模型的应用，其特征在于，可用于研究cnpase对心脏功能调控，也可以用作自发性的心衰伴随的心律过缓的动物模型，用于临床前或临床药物筛选等用途。