一种快速诱导蓝莓组培苗根原基的方法与流程

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本发明属于园艺植物繁育领域，具体涉及一种快速诱导蓝莓组培苗瓶外产生根原基的诱导方法。


背景技术：

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蓝莓被称作浆果之王，有较高的营养价值，特别是富含花青素，具有保护眼睛、美容养颜、延缓衰老等保健功效，因其食用和药用价值，被国际粮农组织列为五大健康食品。因此蓝莓越来越受到人们的喜爱，市场需求非常大。
[0003]
蓝莓果实需求量的增加促进了蓝莓苗木的市场的火爆，为了满足市场需求，蓝莓组织培养工厂化育苗技术应运而生。由于蓝莓根系属于浅根系，仅具大量细根而无根毛，而瓶内生根由于透气性差、诱导面积小等原因，不利于毛细根的形成，且生根后移栽炼苗的过程对根的损伤较大。瓶外扦插诱导多采用速蘸或者短时间浸泡不定芽基部的方法，虽然解决了透气性差的问题，但是却没有解决诱导面积小的问题。
[0004]
植物生根难易程度及生根周期长短受树种遗传因素影响，生根较容易的植物一般存在潜伏根原基（马德滋，1983；刘国彬，2020），激素可诱导不定根根原基的发生，从而缩短生根时间，提高生根效率（乔峰，2014）。而目前蓝莓瓶外生根诱导多是直接诱导不定根，其诱导周期较长、生根数也较少，严重影响了生根效率。
[0005]
因此，蓝莓生根亟需一种既提高透气性、增加诱导面积，又能诱导根原基的瓶外生根诱导方法。


技术实现要素：

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本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺陷，提供一种能够快速有效诱导蓝莓组培苗根原基的方法。为了达到上述目的，本发明提供了一种瓶外25℃避光保湿条件下，快速诱导蓝莓组培不定芽产生根原基的方法。该方法以蓝莓组织培养的不定芽为材料，采用一层布一层苗的放置方式，将不定芽放置于浸泡根原基诱导剂的布上，25℃避光保湿诱导一段时间，然后修剪成茎段，把茎段2/3长度扦插在生根基质中，保湿保温培养。
[0007]
该方法以组织培养继代、增殖的蓝莓组培不定芽为材料，不定芽长度为3cm以上，用50-150mg/l生根诱导剂（吲哚丁酸钠：吲哚丁酸钾的质量比为3:1-4:1）保湿诱导24h；然后采用一层布一层苗的放置方式，具体为两层布中间夹一层苗的放置方式，布可以是吸水布或吸水纸；把处理过的不定芽修剪成2-3cm茎段，保留1-2个茎节，最后把茎段2/3长度扦插在生根基质中培养，保持温度15-25℃，基质湿度50-60%，空气湿度60-80%。其中生根基质分为3层，底层为5-8mm大颗粒蛭石和3-6mm珍珠岩的混合材料，体积比为3:1，厚度为1.5-2.5cm；中间层为进口草炭、椰糠、进口苔藓的粉碎后的混合材料，颗粒大小为1-3mm，三者体积比为1:2:3，厚度为3-4cm；上层为松针，厚度为1-1.5cm；扦插密度为每平方厘米2-4个茎段。
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在部分实施例中，较为优选的布为吸水布，可以灭菌后重复利用；根原基诱导可以
放置在顶部透气的保鲜盒中；生根基质可以放在自制的扦插池中，也可以放在普通的播种穴盘中便于搬运。
[0009]
本发明相比现有技术具有以下优点：1、本发明通过对蓝莓组培苗根原基诱导的最佳诱导剂配比和浓度这两个关键因素的筛选，确定最佳诱导剂和浓度配比，确实有效地诱导根原基的生成，从而了提高生根率，促进了组培苗生根移栽成活效果。
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2、本发明与现有瓶外扦插生根相比，诱导面积较大，刺激不定根发生的部位增多，且生根时间短，15d即开始生根，30d生根率即可达到100%，比文献（龚月桦等2020）报道的70d生根率才达100%的时间缩短了40d，本发明寻求一种最佳的诱导方法，既节约了时间又节省了成本，从而达到最大的经济效益。
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3、本发明本方法与瓶内生根相比，不仅增加了透气性，也省去了清洗和移栽炼苗的步骤，避免了瓶内生根苗在清洗和移栽过程中造成大量根损伤，同时，本方法的生根诱导剂易溶于水，无需用naoh或乙醇助溶，也无需调节ph值，既避免了naoh或乙醇对组培苗的伤害，同时节约了时间和成本。本方法生根率高，移栽成活率高，解决了目前蓝莓组培苗生根时间长、移栽成活率低的问题。
附图说明
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图1为本发明实施例1-3中准备进行根原基诱导的蓝莓组培不定芽。
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图2为本发明实施案例2中配比为3:1时诱导产生的根原基。
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图3为本发明实施案例中不同诱导剂种类对生根的影响。
具体实施方式
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下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
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以钱德勒组培苗为材料，选取长度大于3cm的不定芽，用试验设计的根原基诱导剂浸泡吸水布，一层布一层不定芽处理，25℃避光保湿诱导一段时间，然后修剪成茎段，把茎段2/3长度扦插在生根基质中，保湿保温培养，每处理10个不定芽，重复3次。
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实施例1诱导剂种类的确定采用表1的4种诱导剂处理不定芽24h，浓度为100mg/l，分别于10d、15d调查根原基的诱导率，结果发现无论是10d还是15d，吲哚丁酸钠的诱导效果最好，萘乙酸的诱导效果最差，吲哚丁酸和吲哚丁酸钾的诱导效果差异不显著，但是吲哚丁酸钾处理后的茎段产生根原基的部位较多，覆盖面积较大。因此吲哚丁酸钠诱导根原基的效果最好，其次是吲哚丁酸钾，可以尝试二者配比使用增强诱导效果。
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表1不同种类诱导剂对根原基诱导率的影响
注：小写字母为p<0.05水平上的差异（下表同）实施例2诱导剂配比的确定采用表2的5种试剂配比处理不定芽，浓度为100mg/l，分别于15d调查根原基的诱导率、30d调查生根率，结果显示吲哚丁酸钠和吲哚丁酸钾配合使用效果优于实施案例1中单独使用的效果，二者配比为3:1或者4:1时效果最佳，根原基诱导率最高，生根率均可达100%。因此，二者最佳配比范围为吲哚丁酸钠：吲哚丁酸钾=3:1~4:1。
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表2 吲哚丁酸钠：吲哚丁酸钾配比对根原基诱导率和生根率的影响吲哚丁酸钠：吲哚丁酸钾15d根原基诱导率/%30d生根率/%1:170.67c77.33c2:188.33b90b3:1100a100a4:198.67a100a5:190.67b93.33d 实施例3诱导剂浓度的确定以吲哚丁酸钠：吲哚丁酸钾=3:1为诱导剂，采用表3的6种诱导剂浓度，结果显示诱导剂浓度为25mg/l根原基诱导率和生根率时均最低，50-150mg/l时根原基诱导率和生根率无显著差异且最高，因此诱导剂最佳浓度范围为50-150mg/l。
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表3 诱导剂浓度对根原基诱导率和生根率的影响诱导剂浓度mg/l15d根原基诱导率%30d生根率%2550.67d59.33c5097.67a100a100100a100a150100a100a20085.67b87.33b25062.33c65.67c