一种天然组合物在阻断病毒传播中作为消毒剂的应用的制作方法

1.本发明属于生物医药领域，涉及一种天然组合物在阻断病毒传播中作为消毒剂的应用，具体涉及一种天然组合物在预防和消杀食品上的冠状病毒中的应用。


背景技术：

2.中医认为：肺朝百脉，司呼吸，肺开窍于鼻，温邪上受，首先犯肺，预防疫病，最重要的是切断疫气传播途径，要固护人体鼻、口、皮肤等。国内中医学专家指出：中医药的预防，可以用两句话来说，一句话叫扶正气，第二句话叫避邪气。中药具有四气五味，芳香类的中药能起到避疫、避秽、提神、醒脑，通鼻、开窍的作用，能预防流感等传染病，例如花椒，八角是常用中药,也是制作菜肴的芳香名料。
3.现代医学的研究已发现，植物性挥发油是芳香类中药的物质基础，体外试验发现，这类挥发油具有一定的抑菌、抗病毒的作用，芳香避秽，改变病毒依附的生存环境。例如，中药八角里面的成分莽草酸是制备奥司他韦的原料，用于抗禽流感药物的开发。
4.冠状病毒科(coronaviridae)病毒是自然界广泛存在的一大类病毒，感染脊椎动物，如人、鼠、猪、猫、犬、狼、鸡、牛、禽类。该疾病能引起的人类疾病主要是呼吸系统感染(包括严重急性呼吸综合征，sars)。该病毒对温度很敏感，在33℃时生长良好，但35℃就使之受到抑制。由于这个特性，冬季和早春是该病毒疾病的流行季节。冠状病毒是成人普通感冒的主要病原之一，儿童感染率较高，主要是上呼吸道感染，主要症状是水样大便、发热、呕吐，严重者甚至出现血水样便，极少数情况下也引起神经系统综合征。
5.因此，市场上急需开发一种对冠状病毒能有效杀灭或预防食品上的冠状病毒的产品，这种产品属于消毒或外用制剂，能够用于食品的制造、仓储、运输、销售、使用的全链条，也能做好重点疫情高风险地区周围环境的全面消毒灭菌及个人日常防护措施，这能起到预防新冠病毒的传播和感染的作用，因此，本发明的意义重大。
6.病毒对热敏感，在热力56℃90min或75℃30min即可将其灭活；紫外线照射的有效时间为30min。常见的消毒剂，例如，体积分数为75％的乙醇、碘伏、中效季铵盐，含氯类、过氧化物和其他化学消毒剂，可以在指定的时间内有效地将其杀死。此外，过氧化氢气溶胶喷雾、过氧乙酸加热熏蒸、脉冲紫外线杀菌技术、可见光杀菌技术等作为新型消毒剂和消毒技术，对新型冠状病毒灭活效果较好，适用于物品表面消毒。市场上常用的氯消毒剂。漂白粉、次氯酸钠、二氧化氯、二氯异氰脲酸钠、三氯异氰脲酸钠等消毒剂，由于在消毒过程中会产生刺鼻的氯气，有一定的腐蚀性，对人体的危害较大，且该类消毒剂的残留物对环境也产生一定的破坏。
7.本发明涉及的天然组合物是由山楂核干馏油及干馏液等多种成分组成，包括而不限于指山东步长神州制药有限公司生产的红核药物制剂的原料产品，红核药物制剂是妇洁洗液，该药的国药准字号为z10980131。本技术人经过体外细胞筛选试验发现，本发明的天然组合物的中药洗液对新型冠状病毒的有显著消杀作用。
8.申请人希望本发明的天然组合物能外用消毒制剂广泛应用于环境消杀和个人消
毒中使用，希望本发明的天然组合物用于食品的产业链的消毒，从而有利于保护食品的从业人员和消费者，但是，由于中药洗液与天然组合物的食品制剂之间并不等同，它们之间的辅料不同、制剂不同、应用环境不同，因此，本发明的天然组合物是否可用于食品的产业链的消毒是需要经过深入研究的，这样的研究并不是简单能推到出来的，为满足疫情防控的长期需要，申请人进行了深入的研究和开发。


技术实现要素：

9.本发明提供一种天然组合物在阻断病毒传播中作为消毒剂的应用，本发明天然组合物用于制备阻断病毒传播中尤其是对冷链传播途径，对物品，周围环境消毒中的应用。本发明具有消杀病毒广泛，生产质量可控，且高效环保的消毒制剂，是一种具有生产成本可控，市场前景前景较好的产品。
10.本发明提供一种天然组合物阻断病毒传播的应用，所述天然组合物组成及其重量比为：山楂核干馏油3-7份。
11.作为本发明的优选，所述天然组合物的组成还包括：山楂核干馏液18-22份。
12.作为本发明的进一步优选，所述天然组合物为：山楂核干馏油3-7份、山楂核干馏液18-22 份。
13.本发明提供一种天然组合物阻断病毒传播的应用，所述传播途径包括而不限于冷链。
14.本发明提供一种天然组合物阻断病毒传播的应用，所述传播途径包括而不限于食品的制造、仓储、运输、销售、使用。
15.本发明提供一种天然组合物阻断病毒传播的应用，所述天然组合物在预防和消杀食品上的冠状病毒中的应用。
16.本发明提供一种天然组合物阻断病毒传播的应用，所述天然组合物的组成及其重量比为：山楂核干馏油5份、山楂核干馏液20份、去离子水50份、食品辅料适量；其剂型为外用制剂、清洗液、凝胶剂、洗手液、喷雾剂。
17.本发明提供一种天然组合物阻断病毒传播的应用，所述天然组合物的制备方法为：
18.取山楂核干馏油，山楂核干馏液，再加入食品级辅料，混合均匀后，再常温搅拌20-40 分钟，得混合液，静置，过滤，即得天然组合物；
19.所述天然组合物的剂型为溶液、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂、消毒剂、搽剂、熏液。
20.本发明提供一种天然组合物阻断病毒传播的应用，所述天然组合物的制备方法为：
21.⑴
、将山楂核干馏油置于配料缸中，加入过120目的筛网食品辅料，在常温下搅拌30分钟；
22.⑵
、将山楂核干馏液加入上述
⑴
步骤的药液中，在常温下搅拌30分钟，得混合液a；
23.⑶
、将纯化水加入上述步骤
⑵
的混合液中，在常温下搅拌30分钟，得混合液b；
24.⑷
、将上述
⑶
步骤所得的混合液b，静置4小时后，过滤，即得。
25.本发明提供一种天然组合物的阻断冠状病毒的传播的应用，所述天然组合物在制备用于预防和消杀冠状病毒中的用途。
26.本发明天然组合物可阻断的病毒包括：单链rna病毒，双链rna病毒，单链dna病毒和双链dna病毒；
27.本发明所述的病毒包括：腺病毒、疱疹病毒、痘病毒、呼肠孤病、小dna病毒、披盖病毒、正黏液病毒、副黏液病毒、炮弹病毒、甲肝病毒、乙肝病毒、丙肝病毒、戊肝病毒、脊髓灰质炎病毒、艾滋病病毒、乙脑病毒、登革热病毒、黄热病病毒、西尼罗病毒、日本脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、出血热病毒，牛病毒性腹泻病毒，寨卡病毒、麻疹病毒、狂犬病病毒、流感病毒、禽流感病毒、猪流感病毒、埃博拉病毒、轮状病毒、冠状病毒、sars病毒、 mers病毒；
28.本发明的所述的冠状病毒优选为sars-cov-2新型冠状病毒。
29.本发明天然药物组合物是阻断不限于病毒，还可以包括细菌(日常生活中常见的：大肠杆菌、沙门菌及金黄色葡萄球菌等)，支原体，衣原体等病菌，扩大消杀范围。
30.本发明体外细胞实验以新型冠状病毒(sars-cov-2)为代表，进行实验，本发明预防和消杀的疾病不限于新型冠状病毒，也可以所指为新型冠状病毒相类似的冠状病毒。
31.本发明天然组合物的活性组分为山楂核提取物，其所有效成分物质为山楂核干馏液和山楂核干馏油。其有效物质成分的提取工艺方法为：取山楂核，将山楂核置于干馏釜中，投料量为设备容积率的55％，采用以氮气为驱动力的动态干馏工艺，加热升温速率为40℃/小时，控制干馏液的反应过程，保持干馏釜内压力0.04-0.12mpa，在加热温度达到160～190℃，加热保温时间为1小时，收集160℃以上的干馏产物，并在加热温度达到250～280℃，保持温度为3小时，进行馏分收集，可得本发明的山楂核干馏液和干馏油。对上述物质进行成分研究表明其主要含有有机酸、熊果酸、糠醛类、酚类等多种有效成分。
32.本发明天然组合物的剂型可以利用山楂核提取物，再加入上常用的辅料制成溶液、乳液、清洗液剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂、消毒剂、洗手液、搽剂、熏液等。
33.清洗液剂：将山楂核提取物，与适量辅料制成清洗液剂。所选的溶剂为：水、甘油、乙醇、丙二醇、脂肪油等。增溶剂为：硬脂酸钠、月桂酸、三乙醇胺有机皂、碱金属皂、硫酸化蓖麻油、十二烷基硫酸钠、卵磷脂、豆磷脂。助溶剂：苯甲酸、碘化钾等。潜溶剂：甘油、乙醇、丙二醇等。所选的防腐剂为：苯甲酸钠、山梨酸、苯扎溴铵、对羟基苯甲酸脂等。
34.凝胶剂：将山楂核提取物，与适量辅料制成凝胶剂。其所选的水性凝胶基质，如：西黄蓍胶、明胶、聚乙二醇、聚维酮、聚醋酸乙烯酯、纤维素衍生物、丙二醇、海藻酸钠、卡波姆等。油性凝胶基质，如：液体石蜡、聚氧乙烯、脂肪油、胶体硅、铝皂或锌皂等。防腐剂，如：尼泊金甲酯、苯扎溴铵等。保湿剂，如：聚乙二醇、甘油、丙二醇、山梨醇、吡咯烷酮羧酸钠、pds-3高效保湿剂等。油质，如：乙氧基化酯类、杏仁油等。ph调节剂，如三乙醇胺、氢氧化钠等。增溶剂，如：peg-40氢化蓖麻油或吐温80等。
35.洗手液：将山楂核提取物，与适量药用辅料制成洗手液剂或搽剂。其所选为分散介质，高浓度的乙醇。阳离子杀菌剂：季铵盐类如：苯扎氯铵、苯甲基烷基氯化铵、西吡氯铵、卤化二烷基二甲基铵、卤化单烷基苯甲基烷基氯化铵；双胍类如葡糖酸洗必泰、乙酸洗必泰、盐酸洗必泰、聚六亚甲基胍等。增稠剂：包括烷醇酰胺类如椰油二乙醇酰胺、椰油单乙醇酰胺、椰油单异丙醇酰胺、椰油酰胺、月桂酰-亚油酰二乙醇酰胺、月桂酰-豆蔻酰二乙醇酰胺、异硬脂二乙醇酰胺、亚油二乙醇酰胺等。表面活性剂为：茶皂素、皂树酸、胆固醇、磷脂、阿拉伯胶、西黄芪胶、海藻酸、壳聚糖等。非离子表面活性剂：烷基糖苷、椰子油二乙醇酰胺、月桂酰胺丙基氧化胺、蔗糖酯、烷基酚聚氧乙烯醚等。两性离子表面活性剂：椰油酰胺丙基甜菜
碱或十二烷基二甲基甜菜碱。阴离子表面活性剂：脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、仲烷基磺酸钠、脂肪酸甲酯磺酸钠、a-烯基磺酸盐、十二烷基硫酸钠、月桂酰肌氨酸钠、烷基磷酸钾、烷基磷酸钠、烷基硫酸铵等。ph调节剂：柠檬酸。保湿剂：丙三醇，乙二醇，山梨糖醇等。香精：桂花香精、苹果香精、薰衣草香精等。
36.喷雾剂：将山楂核提取物，与适量药用辅料制成喷雾剂。其所选的药用辅料增溶剂为：无水乙醇、蒸馏水等。保湿剂：丙二醇，甘油，聚乙二醇等。表面活性剂：如，聚乙二醇，吐温80，十二烷基硫酸钠等。防腐剂：对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸乙酯，苯扎氯铵，苯扎溴铵，醋酸氯己定等。ph调节剂：枸橼酸二钠、枸橼酸三钠、枸橼酸钠、一水柠檬酸、枸椽酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸盐、磷酸二氢盐、磷酸氢盐、酒石酸、酒石酸盐、酒石酸氢盐、氨基酸及其盐中的一种或几种。抗氧剂：亚硫酸、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、焦亚硫酸盐、硫代硫酸盐、抗坏血酸等。芳香剂：天然或合成香精香料，包括玫瑰香精、丁香油、桉油等。
37.本发明天然组合物的有益效果为：通过体外药效试验证明，本发明天然组合物的对新型冠状病毒(sars-cov-2)有较强的杀灭作用，本发明所选的活性组分为山楂核提取物中所含酚类(苯酚、2-甲基苯酚、愈创木酚、2-甲氧基-4-甲基苯酚等)、醛类(糠醛)、酮类、有机酸类等多种有效活性成份，具有较强的体外杀菌，杀灭和抑制病毒复制作用。
38.本发明天然组合物的山楂核提取物可以制成：溶液、乳液、脂肪乳、清洗液剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂、消毒剂、洗手液、搽剂、熏液。
39.本发明天然组合物的一种天然组合物作为预防和消杀新冠病毒的用途，提供了阻断冠状病毒通过传播的用途，播途径包括而不限于冷链。
40.本发明天然组合物的一种天然组合物作为预防和消杀新冠病毒的用途，提供了阻断冠状病毒通过传播的用途，传播途径包括而不限于食品的制造、仓储、运输、销售、使用。
41.本发明天然组合物还具有质量稳定，生产成本较低，可产业化的优势明显，具有非常广阔的市场应用前景和价值。
42.本发明天然组合物的使用方法，将本发明天然组合物的制剂，采用搽、擦、抹、浸、泡、洗、洗涤、喷雾、喷涂、雾化、气化等方式，作用于食品的表面，并用于食品的清洗。
43.本发明的产品的用途涉及海鲜、河鲜、水产品、屠宰制品、包括肉类制品、骨类制品、内脏类制品、皮类制品、蹄制品、耳朵制品等。本发明的产品的用途涉及这些产品的整体和加工品。食品的形态为块状、粉末、颗粒、糜状、粘状和液体状。
44.本发明的产品的用途，涉及手工作业、机械化作业，自动化程度高。
45.为了更加充分理解本发明的实施，下面通过典型的实施例对本发明做进一步的说明。以下及通过体外抗病毒试验，以证明本发明天然组合物有良好的治疗效果。
46.实验例
47.1.新型冠状病毒(sars-cov-2)体外筛选实验报告
48.1.1、实验目的
49.在疫情应急期间，在细胞水平评价本发明天然组合物的中药制剂的抗新型冠状病毒(sars-cov-2)效果。
50.1.2、实验材料：
51.1.2.1受试药物：采用本发明天然组合物的中药制剂的不同药物浓度进行试验，药
物名称及浓度见表1。
52.1.2.2测试细胞：veroe6细胞，由广州呼吸健康研究院呼吸疾病国家重点实验室病毒室保存。
53.1.2.3测试的病毒柱来源：sars-cov-2,滴度为tcid
50
＝10-6
/100μl，由广州海关技术中心bsl-3实验室(呼吸疾病国家重点实验室高致病病原微生物研究室)-80℃保存。使用病毒滴度为100tcid
50
。
54.1.3、实验方法：
55.1.3.1样品准备
56.取本发明天然组合物的中药制剂(红核妇洁洗液)分别用纯化水稀释800、1000、1600、 3200倍并作为样品的测定样品溶液。
57.1.3.2受试药物：
58.表1：药物名称、实验浓度和分组
[0059][0060]
1.3.3受试药物抗病毒实验
[0061]
(1)、无菌96孔培养板，每孔加入100μl浓度为2
×
105cells/mlveroe6细胞，37℃5％ co2培养24小时；
[0062]
(2)、培养板实验组和病毒对照组加入100tcid
50
病毒液100μl/孔，37℃，5％co2培养箱吸附2h；
[0063]
(3)、2h后，弃去96孔培养板中细胞培养液；受试药物稀释成表1中的各个浓度，每个浓度3个复孔，100μl/孔加入上述药液；
[0064]
(4)、同时设立细胞对照、空白对照(溶剂对照)和病毒对照(阴性对照)；
[0065]
(5)、细胞37℃，5％c02孵箱孵育3-4天；
[0066]
(6)、光学显微镜下观察细胞病变(cpe),细胞出现病变程度按以下6级标准记录：
“‑”
无病变出现；
“±”
为细胞病变少于10％；“+”为细胞病变约25％；“++”为细胞病变约50％；“+ ++”为约75％的细胞出现病变：“++++”为75％以上病变。采用reed-muench法或graphpadprism5.0计算半数有效浓度(ic
50
)。判断药效标准：具有50％的抑制病毒cpe的浓度视为有效浓度。
[0067]
1.3.4实验条件：以上实验操作均在bsl-3实验室内完成。
[0068]
1.4、实验结果
[0069]
表1红核(批号180802)抗新型冠状病毒药效结果
[0070][0071]
实验结果表明，本发明天然组合物的中药制剂红核妇洁洗液(批号180802)对新型冠状病毒(sars-cov-2)感染vero e6细胞致细胞病变的ic50值为稀释743.2倍。
[0072]
本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定，其中本发明药物为红核妇洁洗液。
具体实施方式
[0073]
以下是本发明内容的具体实施例，用于阐述本技术文件中所要解决技术问题的技术方案，有助于本领域技术人员理解本发明内容，但本发明技术方案的实现并不限于这些实施例。
[0074]
实施例1本发明天然组合物的溶液a的制备方法及用途
[0075]
称取山楂核干馏油7g、山楂核干馏液15g、补加纯化水至1000ml，搅拌混匀，静置，过滤，即得。
[0076]
该溶液作为洗液用于清洗食品。
[0077]
所述消杀的食品为：猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉、鸡、鸭、鹅、鱼、软体动物、动物骨头、动物软骨、乳品、香肠、热狗、熏肠、烤肠、肠衣等。
[0078]
实施例2本发明天然组合物的溶液b的制备方法及用途
[0079]
称取山楂核干馏油7g、山楂核干馏液15g、甘油、月桂酸适量，补加纯化水至1000ml，搅拌混匀，静置，过滤，即得。
[0080]
用途同实施例1。
[0081]
实施例3本发明天然组合物的溶液c的制备方法及用途
[0082]
称取山楂核干馏油7g、山楂核干馏液15g、甘油适量，补加纯化水至1000ml，搅拌混匀，静置，过滤，即得。
[0083]
用途同实施例1。
[0084]
实施例4本发明天然组合物的溶液c的制备方法及用途
[0085]
称取山楂核干馏油7g、山楂核干馏液15g、丙二醇、十二烷基硫酸钠适量、补加纯化水至 1000ml，搅拌混匀，静置，过滤，即得。
[0086]
用途同实施例1。
[0087]
实施例5本发明天然组合物的溶液d的制备方法及用途
[0088]
称取山楂核干馏油7g、山楂核干馏液15g、海藻酸钠、卡波姆等适量、补加纯化水至1000ml，搅拌混匀，静置，过滤，即得。
[0089]
用途同实施例1。
[0090]
实施例6本发明天然组合物的清洗液的制备方法及用途
[0091]
⑴
、将山楂核干馏油5g置于配料缸中，加入过120目的筛网，豆磷脂25g，纯化水200g 在常温下搅拌30分钟；
[0092]
⑵
、将山楂核干馏液20g、加入上述药液中，在常温下搅拌30分钟；
[0093]
⑶
、将纯化水775g加入上述药液中，在常温下搅拌30分钟；
[0094]
⑷
、将上述混合液静置4小时后，过滤，制成清洗液。
[0095]
用途同实施例1。
[0096]
实施例7本发明天然组合物的喷雾剂a的制备方法及用途
[0097]
⑴
、称取山楂核干馏油7g、山楂核干馏液15g、膳食纤维素96g，备用；
[0098]
⑵
、取纯化水适量，加入膳食纤维素96g，浸泡12小时，待其完全溶胀，备用。
[0099]
⑶
、依次将山楂核干馏油7g、山楂核干馏液15g、加入步骤2项溶液中，边加边搅拌，搅拌均匀。
[0100]
⑷
、再补加纯化水至1000ml，搅拌混匀，静置，过滤，即得。
[0101]
取喷雾剂并喷雾于食品的表面，用于食品的清洗。
[0102]
用途同实施例1。
[0103]
实施例8本发明天然组合物的喷雾剂b的制备方法及用途
[0104]
⑴
、称取山楂核干馏油7g、山楂核干馏液15g、十二烷基硫酸钠80g、甘油160g、苯甲酸钠8g、薄荷油8ml、羧甲基纤维素96g，备用；
[0105]
⑵
、取纯化水适量，加入羧甲基纤维素96g，浸泡12小时，待其完全溶胀，备用。
[0106]
⑶
、依次将山楂核提取物、薄荷油、十二烷基硫酸钠、甘油、苯甲酸钠、加入步骤2项溶液中，边加边搅拌，搅拌均匀。
[0107]
⑷
、再补加纯化水至1000ml，搅拌混匀，静置，过滤，即得。
[0108]
取喷雾剂并喷雾于食品的表面，用于食品的清洗。
[0109]
用途同实施例1。
[0110]
实施例9
[0111]
实施例9为8种溶液，各溶液的浓度分别为实施例1-8的溶液的浓度的10％。
[0112]
用途同实施例1。
[0113]
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。