茶多酚诱导水稻幼苗抗盐的新用途及浸种液、抗盐方法与流程

1.本发明创造属于茶多酚新用途领域，尤其是涉及茶多酚诱导水稻幼苗抗盐的新用途及浸种液、抗盐方法。


背景技术：

2.茶多酚(tea
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polyphenols)是茶叶中提取的酚类化合物，属植物源农药，不仅环保，不易使病菌产生抗药性，而且植物源农药还具有种植广泛，取材容易，成本较低等特点。目前国内外对于茶多酚的研究主要以茶多酚的药理、病理、毒理学以及茶多酚的抑菌和美容作用为主，但对于茶多酚作为对抗和减少水稻盐胁迫造成的减产的作用研究鲜有报道。


技术实现要素：

3.有鉴于此，本发明创造旨在克服现有技术中的缺陷，提出茶多酚诱导水稻幼苗抗盐的新用途及浸种液、抗盐方法。
4.为达到上述目的，本发明创造的技术方案是这样实现的：
5.本发明提供了茶多酚诱导水稻幼苗抗盐的新用途。
6.本发明还提供一种应用茶多酚的水稻浸种液，其有效成分为茶多酚与水杨酸复合物，所述茶多酚与水杨酸复合物的浓度为10
‑
100mg/l。
7.优选的，所述浸种液中还含有苍耳子水提物和表面活性剂，所述苍耳子水提物的浓度为10
‑
100mg/l，所述表面活性剂的浓度为500
‑
2000mg/l。
8.优选的，所述茶多酚与水杨酸复合物的浓度为50mg/l，所述苍耳子水提物的浓度为80mg/l，所述表面活性剂的浓度为1000mg/l。
9.优选的，所述表面活性剂为吐温类表面活性剂，所述吐温类表面活性剂为吐温
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20、吐温
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40、吐温
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60、吐温
‑
65、吐温
‑
80、吐温
‑
85中的一种或是多种的组合物。
10.本发明还提供一种应用上述水稻浸种液的抗盐方法，包括如下步骤：
11.(1)将水稻种子放入75％的乙醇浸种10min，然后用蒸馏水冲洗数次；
12.(2)将清洗后的水稻种子放入上述水稻浸种液中于25～30℃浸泡24
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48小时并搅拌2
‑
5次后取出即可进行播种。
13.优选的，所述步骤(2)中水稻浸种液与水稻种子的体积比为(1
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3)：1。
14.优选的，所述步骤(2)中水稻浸种液与水稻种子的体积比为2：1。
15.相对于现有技术，本发明创造具有以下优势：
16.(1)本发明的浸种液可有效提高盐胁迫后的水稻种子的发芽率和发芽势，可以有效缓解盐胁迫对水稻种子萌发的抑制作用。
17.(2)本发明的浸种液可以有效抑制盐胁迫下的叶绿素降解、提高可溶性蛋白的含量，提高幼苗内sod活性，明显降低幼苗中丙二醛的含量，有效弥补盐胁迫的幼苗中上述指标的下降，提高盐胁迫的水稻的产量。
具体实施方式
18.除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明创造所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
19.下面结合实施例来详细说明本发明创造。
20.实施例1
21.一种水稻浸种液，茶多酚与水杨酸复合物的浓度为50mg/l，苍耳子水提物的浓度为80mg/l，表面活性剂的浓度为1000mg/l。其中茶多酚与水杨酸复合物由茶多酚与水杨酸按照质量比为1:1混合制备而成。
22.实施例2
23.一种水稻浸种液，茶多酚与水杨酸复合物的浓度为10mg/l，苍耳子水提物的浓度为50mg/l，表面活性剂的浓度为500mg/l。其中茶多酚与水杨酸复合物由茶多酚与水杨酸按照质量比为1:1混合制备而成。
24.实施例3
25.一种水稻浸种液，茶多酚与水杨酸复合物的浓度为30mg/l，苍耳子水提物的浓度为10mg/l，表面活性剂的浓度为800mg/l。其中茶多酚与水杨酸复合物由茶多酚与水杨酸按照质量比为1:1混合制备而成。
26.实施例4
27.一种水稻浸种液，茶多酚与水杨酸复合物的浓度为80mg/l，苍耳子水提物的浓度为80mg/l，表面活性剂的浓度为1000mg/l。其中茶多酚与水杨酸复合物由茶多酚与水杨酸按照质量比为1:1混合制备而成。
28.实施例5
29.一种水稻浸种液，茶多酚与水杨酸复合物的浓度为100mg/l，苍耳子水提物的浓度为100mg/l，表面活性剂的浓度为2000mg/l。其中茶多酚与水杨酸复合物由茶多酚与水杨酸按照质量比为1:1混合制备而成。
30.对比例1
31.本对比例中浸种液的组成为茶多酚与水杨酸复合物的浓度为50mg/l，表面活性剂的浓度为1000mg/l。
32.对比例2
33.本对比例中浸种液的组成为茶多酚浓度为50mg/l，苍耳子水提物的浓度为80mg/l，表面活性剂的浓度为1000mg/l。
34.对比例3
35.本对比例中浸种液的组成为水杨酸浓度为50mg/l，苍耳子水提物的浓度为80mg/l，表面活性剂的浓度为1000mg/l。
36.试验例1浸种液对盐胁迫的水稻种子萌发的影响
37.试验所用的水稻品种为金稻777，购于天津市水稻研究所；所用茶多酚购于天津市世和科技发展有限公司，纯度>95％；吐温
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60和水杨酸购于天津市北辰方正化学试剂厂；
38.苍耳子水提物的制备过程为：将经过除杂、晾干、粉碎至30～40目的苍耳子，加入6～8倍的水，在70～90℃下浸提2～4次，每次浸提时间0.5～2小时。浸提液过滤后，合并浸提
液，在60～70℃下浓缩至浸提液的重量为苍耳子重量的0.9～1.1倍，即得苍耳子提取物。
39.试验方法：
40.将籽粒饱满的水稻种子放入75％的乙醇浸种10min，然后用蒸馏水冲洗数次；摆放到平铺了3层滤纸的培养皿中，分别在培养皿中加入实施例1
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5以及对比例1
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3的水稻浸种液中于25℃浸泡24小时并搅拌3次后取出即可进行播种，同时设置清水浸泡作为对照组。
41.将阴干备用的30粒种子放置培养皿中，每个培养皿中加入10ml浓度为7.5g/l的nacl溶液；培养皿底部铺设滤纸，用锡箔纸包住培养皿，置于30℃的黑暗条件下萌发，每种处理重复3次。培养前加蒸馏水将滤纸浸湿，5
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6天加一次蒸馏水，6d观察一次,定期在体视显微镜下观察种子萌发过程中的形态变化，以胚根突破种皮长至种子长度的一半时为萌发，7d统计最终种子萌发率，每组设置三次重复。
42.本试验例通过发芽率、发芽势来评价实验组的浸种液对盐胁迫下水稻种子萌发与生长的影响。其中，发芽势ge：规定天数内发芽的种子粒数与供试种子粒数之比。发芽率gr：发芽数与种子总数之比。所有指标数据测定均为3次重复，采用wpsexcel 2016和stat软件进行显著性分析。具体结果见下表：
43.表1浸种液对盐胁迫的水稻种子萌发的影响
44.组别发芽势(％)发芽率(％)实施例193.791.0实施例288.683.3实施例386.987.1实施例489.088.7实施例591.179.3对比例161.345.6对比例258.853.7对比例355.748.2对照组35.433.7
45.试验例2浸种液对盐胁迫的水稻幼苗的影响
46.将试验例1中使用实施例1
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5以及对比例1
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3的水稻浸种液浸泡后的种子，将出芽一致的种子每20粒播种于1个4cm
×
5cm的塑料浮网上，将浮网置于250ml塑料杯中。将塑料杯放入人工气候箱中培养，培养条件为温度25℃/20℃(昼/夜),光照强度800μmol/m2/s。用hoagland(霍格兰氏)营养液培养7d，预培养两周后使用浓度为7.5g/l的nacl溶液进行为其10天的胁迫处理，待水稻幼苗生长至10cm高时，分析幼苗的叶绿素含量、可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量，具体结果见表2。
47.表2浸种液对盐胁迫的水稻幼苗的影响
[0048][0049]
从表1的数据中可以看出，本发明的浸种液可有效提高盐胁迫后的水稻种子的发芽率和发芽势，可以有效缓解盐胁迫对水稻种子萌发的抑制作用。
[0050]
从表2的数据中可以看出，本发明的浸种液可以有效抑制盐胁迫下的叶绿素降解、提高可溶性蛋白的含量，提高幼苗内sod活性，明显降低幼苗中丙二醛的含量，有效弥补盐胁迫的幼苗中上述指标的下降，提高盐胁迫的水稻的产量。
[0051]
以上所述仅为较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。