N6-(2-羟乙基）腺苷与氯虫苯甲酰胺的复配药剂的制作方法

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羟乙基）腺苷与氯虫苯甲酰胺的复配药剂
技术领域
1.本发明涉及杀虫药剂领域，尤其涉及n6
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羟乙基）腺苷与氯虫苯甲酰胺的复配药剂。


背景技术：

2.氯虫苯甲酰胺（chlorantraniliprole）是第一个具有新型邻酰胺苯甲酰胺类化学结构的广谱杀虫剂，对昆虫高效，而对哺乳动物低毒，具有高度选择性的特点。2008年由美国杜邦公司研制创制并成功商品化，因其高效低毒的特点，广受市场青睐。根据浙江省植保部门应用在水稻田防治稻纵卷叶螟，每亩用10毫升，用背负式手动喷雾器喷二桶，常规喷雾。七天后杀虫效果达到94.2%，保叶效果达到90.0%；十四天后杀虫效果达到86.0%，保叶效果达到83.9%。氯虫苯甲酰胺可有效防治几乎所有重要的鳞翅目害虫和部分其他害虫，也可有效防治对其他杀虫剂产生抗性的害虫。其具有优良的速效性和持效性，表现出更好的作物保护效果。但是2011年之后，由于用药次数和用药合理性的差别，不同地区、不同年份的小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性有所不同，部分地区小菜蛾已对氯虫苯甲酰胺产生高水平抗药性。据报道在海南、广州、浙江等地区小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性出现不同程度的增高，抗性指数50~100倍不等，已达到高抗性水平。目前温州地区的农户基本很少，甚至不再使用氯虫苯甲酰胺进行防治。目前氯虫苯甲酰胺与赤霉素的复配已应用于田间。药剂复配研究已成为化学农药减药增效，延缓抗性的必要手段。


技术实现要素：

3.为解决上述问题，提供一种提高氯虫苯甲酰胺药效，降低施药使用量的n6
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羟乙基）腺苷与氯虫苯甲酰胺的复配药剂。
4.为实现上述目的，本发明通过下述技术方案得以解决：n6
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羟乙基）腺苷与氯虫苯甲酰胺的复配药剂，包括氯虫苯甲酰胺以及n6
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羟乙基）腺苷。
5.进一步地，氯虫苯甲酰胺的浓度为0.808 mg/l。
6.进一步地，n6
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羟乙基）腺苷浓度为600 mg/l。
7.本发明的有益之处在于：氯虫苯甲酰胺对小菜蛾幼虫均有较好的杀虫效果，而蝉花虫草提取分离活性物质hea（n6
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羟乙基）腺苷）对小菜蛾幼虫也具有一定的杀虫作用，但远没有市面上杀虫药剂高效，通过复配增效实验可见，hea能有效增加氯虫苯甲酰胺半致死浓度的作用效果，hea与氯虫苯甲酰胺增效作用可能与其本身的作用原理有一定关系。由于氯虫苯甲酰胺的化学结构具有其他任何杀虫剂不具备的全新杀虫原理，能高效激活昆虫鱼尼丁（肌肉）受体过度释放细胞内钙库中的钙离子，导致昆虫瘫痪死亡。而hea是一种钙离子拮抗剂能选择性阻滞钙离子经细胞膜上的钙离子通道流入细胞内，降低细胞内钙离子浓度。两者之间的增效机理可能与细胞内钙离子不断流失有一定关联。通过氯虫苯甲酰胺与hea二者混配可以延缓害虫抗药性的产生。两者混配后可以起到显著的增效作用。
附图说明
8.图1为24h小菜蛾二龄幼虫各处理药剂校正死亡率的示意图。
9.图2为48 h小菜蛾二龄幼虫各处理药剂校正死亡率示意图。
具体实施方式
10.下面将结合本发明实施例中的附图1
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2，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
11.试验材料如下：小菜蛾2龄幼虫，200克/升氯虫苯甲酰胺（美国杜邦公司），5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（中国农科院植保所廊坊农药中试厂），hea（亚热带作物研究所植物保护研究所分离提取），dmso（二甲基亚砜，购置于sigma公司）采用浸叶法进行毒力测定。设置hea、氯虫苯甲酰胺药剂和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐5个浓度梯度，计算毒力回归方程，计算lc50值。根据毒力回归方程分别将200克/升氯虫苯甲酰胺和5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐配置成半致死浓度0.808 mg/l和0.9875 mg/l，hea先溶于1%dmso配置成0.6mg/ml浓度，以0.6mg/ml浓度的质量hea溶于lc50浓度的氯虫苯甲酰胺和lc50的浓度甲氨基阿维菌素苯甲酸盐配置成复配药剂，置于烧杯中备用。将新鲜无污染的甘蓝叶片分别在各供试药液中浸渍约10s，取出自然晾干后，放入培养皿内，然后移入2龄小菜蛾幼虫并置于养虫室内恒温饲养。每处理重复3次，每重复30头试虫，以1%dmso清水处理为对照。于24h、48h检查试虫死亡情况，用毛笔尖触碰幼虫身体，以试虫没有反应为死亡。计算死亡率、校正死亡率，用dps软件进行数据处理，求毒力回归方程及lc 50。数据统计采用spss venison 17软件进行，以duncan法进行多组样本间差异显著性分析，graphpad prism 8.0软件进行图表制作。
12.低温对小菜蛾幼虫龄期的影响
饲养温度卵1龄2龄3龄4龄蛹成虫25℃3.2
±
0.072.2
±
0.101.2
±
0.100.8
±
0.090.9
±
0.102.5
±
0.104.5
±
0.204℃6.5
±
0.094.1
±
0.083.2
±
0.071.5
±
0.11.4
±
0.24.1
±
0.24.7
±
0.10
表 1 不同温度人工饲料饲养小菜蛾幼虫和蛹的历期（d ）由表1可以看出，低温条件下，小菜蛾生长周期增长，且不影响其正常发育。25℃条件下，小菜蛾幼虫完成从1龄到成虫产卵大约需要7~10天，而低温条件下需要20天左右。因此可以通过不同龄期的幼虫进行低温保存，获得实验所需的虫口数量以备后续实验处理。相对于萝卜苗小菜蛾饲养法，人工饲料喂养大大节约了人力，物力和空间。
13.三种药剂对小菜蛾2龄幼虫室内毒力测定供试药剂毒力回归方程相关系数lc50（mg/l）95%置信区间（mg/l）heay=
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16.716+8.1447x0.973904463.7145344.2400~624.6570氯虫苯甲酰胺y=
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5.2742+2.9684x0.99080.808340.65471~1.5478甲维盐y=
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5.0120+2.1203x0.98780.98750.7143~1.4275表 2 三种药剂对小菜蛾二龄幼虫毒力测定结果（48 h）由表2可知，200克/升的氯虫苯甲酰胺药剂和5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐毒力回归方程分别为y=
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5.2742+2.9684x和y=
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5.0120+2.1203x，半致死剂量浓度为0.80834 mg/l和0.9875 mg/l。hea的毒力回归方程y=
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16.716+8.1447x，半致死剂量浓度为463.7145，可
知hea 600mg/l为最佳杀虫浓度，且在95%置信区间范围内。因此选择hea 600 mg/l浓度与lc50浓度的氯虫苯甲酰胺药剂和lc50浓度的甲氨基阿维菌素苯甲酸盐进行药剂复配实验。
14.图1和图2为hea对氯虫苯甲酰胺增效作用室内毒力测定。
15.由图1可知，hea（0.6mg/ml）、lc50 氯虫苯甲酰胺、lc50 氯虫苯甲酰胺+hea（0.6mg/ml）、lc50甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和lc50甲氨基阿维菌素苯甲酸盐+hea（0.6mg/ml）组药后24小时校正死亡率分别是35.08%、38.59%、38.59%、31.58%、29.82%，lc50甲氨基阿维菌素苯甲酸盐+hea（0.6mg/ml）组校正死亡率显著低于其它处理组（p<0.05），且其它四组处理之间无显著差异。药后24h无显著增效作用。
16.由图2可知，hea（0.6mg/ml）、lc50 氯虫苯甲酰胺、lc50 氯虫苯甲酰胺+hea（0.6mg/ml）、lc50甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和lc50甲氨基阿维菌素苯甲酸盐+hea（0.6mg/ml）组药后48小时校正死亡率分别是49.12%，71.68%，82.45%，71.92%，52.63%。lc50 氯虫苯甲酰胺+hea（0.6mg/ml）复配药剂组显著高于两者的单剂hea（0.6mg/ml）组和lc50 氯虫苯甲酰胺组（p<0.05），且lc50甲氨基阿维菌素苯甲酸盐+hea（0.6mg/ml）复配药剂组却显著低于单剂lc50甲氨基阿维菌素苯甲酸盐组（p<0.05），与hea（0.6mg/ml）组无显著差异。
17.氯虫苯甲酰胺与甲氨基阿维菌素苯甲酸盐对小菜蛾幼虫均有较好的杀虫效果，而蝉花虫草提取分离活性物质hea对小菜蛾幼虫也具有一定的杀虫作用，但远没有市面上杀虫药剂高效，通过复配增效实验可见，hea能有效增加氯虫苯甲酰胺半致死浓度的作用效果，但与甲氨基阿维菌素苯甲酸盐进行复配不仅没有增效，反而出现毒力减弱现象。可见并不是所有鳞翅目杀虫药剂都能与hea进行复配增效。而hea与氯虫苯甲酰胺增效作用可能与其本身的作用原理有一定关系。由于氯虫苯甲酰胺的化学结构具有其他任何杀虫剂不具备的全新杀虫原理，能高效激活昆虫鱼尼丁（肌肉）受体[8,9]。过度释放细胞内钙库中的钙离子，导致昆虫瘫痪死亡[10]。而hea是一种钙离子拮抗剂能选择性阻滞钙离子经细胞膜上的钙离子通道流入细胞内，降低细胞内钙离子浓度。两者之间的增效机理可能与细胞内钙离子不断流失有一定关联。
[0018]
通过氯虫苯甲酰胺与hea二者混配可以延缓害虫抗药性的产生。本研究选择小菜蛾这种广泛发生的世界性害虫为靶标，通过室内毒力测定的方法研究了氯虫苯甲酰胺与hea混配的增效作用，发现两者混配后可以起到显著的增效作用。
[0019]
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其它的具体形式实现本发明，因此无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。