利用疏花水柏枝茎干快繁的方法与流程

1.本发明属于濒危植物疏花水柏枝繁殖技术领域，具体涉及一种利用疏花水柏枝茎干快繁的方法。


背景技术：

2.疏花水柏枝(myricarialaxiflora)是柽柳科水柏枝属的一种多年生灌木，三峡库区为其核心分布区。是《长江三峡水利枢纽环境影响报告书》里提到可能受影响濒临灭绝的三峡库区特有植物，同时也是国家二级重点保护野生植物，在消落带治理方面具有重大的开发应用价值。
3.目前,关于疏花水柏枝的研究主要集中在群落结构、形态结构、种子萌发、人工繁育及光合生理生化特征等方面。目前已有科研机构开展了疏花水柏枝扦插、播种繁育等研究，但由于疏花水柏枝种子在常温下生活力极易丧失、生长繁殖季节性限制等问题，对繁育的技术条件和时间要求较高，扦插繁育存在枝干的利用效率较低，繁殖系数比较小的问题。现有的繁育技术一定程度上制约了疏花水柏枝的快繁和保护。


技术实现要素：

4.本发明提供一种利用疏花水柏枝茎干快繁的方法，其技术门槛低，出苗率高，繁殖时间短，且不受季节限制，便于大范围推广。
5.本发明的技术方案是，一种利用疏花水柏枝茎干快繁的方法，包括以下步骤：
6.s1、选取疏花水柏枝的一年生茎干作为外植体，进行消毒处理；
7.s2、将外植体置于ga3溶液中浸泡，后用保鲜膜包裹后依次进行低温处理和高温处理；
8.s3、准备培养基质，加入高锰酸钾溶液混匀，进行消毒和补水，然后由下至上依次铺设石粒、泥炭土和河沙，然后将外植体平铺在河沙上，再覆盖河沙，最后覆盖松鳞片；
9.s4、进行保温保湿养护，至长出芽苗，待芽苗半木质化后，将埋藏的外植体挖出并裁断，保证每个茎段上有一棵芽苗，最后进行大田移栽。
10.进一步地，s1中选择健壮、无病虫害的疏花水柏枝作为母株，采集其饱满的1年生地上茎干，
11.进一步地，s1中消毒处理之前，去除茎干上叶片，将茎干剪裁成20～30cm长度的茎段作为外植体。
12.进一步地，s1中消毒处理时，用0.2％质量浓度的高锰酸钾溶液中浸泡7-10min消毒，然后用无菌水冲洗10-15min。
13.进一步地，s2中ga3溶液的浓度为150-250mg/l，浸泡时间为2-3h。
14.进一步地，s2中低温处理时温度为4-6℃，时间为12-15h；高温处理时温度为30-35℃，时间为12-15小时。
15.进一步地，s3中培养基质中加入0.2-0.3％质量浓度的高锰酸钾溶液混匀，以河沙
含水率在60％-70％。
16.进一步地，s3中石粒的厚度为2-4cm，然后铺设1-2cm厚度的泥炭土，再铺设3-4cm厚度的河沙；放入外植体后再覆盖3-3.5cm厚度的河沙。
17.进一步地，s3中外植体平铺时，相互平行铺设，间隔距离为2-4cm。
18.进一步地，s4中培养时，覆盖拱形塑料膜保温，温度为20-25℃之间，喷淋无菌水保持基质湿润，以手握成团，松而不散为标准。
19.本发明具有以下有益效果：
20.1、本发明与疏花水柏枝扦插繁殖相比，虽然都是以茎干作为外植体，但本发明在前期对外植体进行了充分的处理。用0.2％质量浓度的高锰酸钾溶液中浸泡7-10min，不但能杀灭茎干表面携带的病原菌，溶液中微量元素锰还能激活种子体内酶的活性，使芽苗生长整齐健壮；将其置于ga3溶液中浸泡，提高茎干内生长素的含量，促进茎和叶的快速生长；用保鲜膜包裹后依次进行低温和高温变温激活处理，降低茎干内抑制物质的含量，打破休眠，促进茎干萌芽。
21.2、本发明通过对外植体经过消毒及诱导处理后，能够缩短其休眠时间，在18d左右即可达到移栽的标准，大幅缩短了其繁殖育苗周期，而且以茎干作为外植体，不受时间季节的限制，随时可以进行繁殖，可为三峡库区消落带的治理提供大量植物材料。。
22.3、本发明提供给的快繁方法，繁殖系数高，采用长茎段处理后，一个茎段能够萌发多个芽苗，繁殖速度快，且出苗齐整，根系旺盛发达，经分株移栽后，苗木成活率可达90％以上。
23.4、培养基质底层铺设2-4cm厚的石粒方便排水，可防止积水过多导致基质缺氧，茎干呼吸作用受到阻碍，生理功能降低；石粒上铺设1-2cm厚度的泥炭土，可以保证基质的温度维持在一个较高且稳定的范围内，同时也能为茎干生根后根系的生长提供充足的养分；茎干上下铺垫的河沙具有透气排水的效果，河沙的缝隙大小适中，兼具透气和排水的优点，且疏花水柏枝野外原生境即为江边的沙石滩上，采用河沙也模拟了疏花水柏枝最适宜的原生境基质。
24.5、直接将茎干埋在河沙下，如果茎干长时间休眠会导致茎干错失萌芽的窗口期，逐渐失去活力，最终腐烂发霉。本发明通过高锰酸钾消毒及ga3溶液浸泡，结合高低温变温激活处理，埋藏在分层基质下的茎干，被激发出了不定芽和不定根。与扦插相比从茎尖或叶腋等位置生出的有限的定芽相比，单位长度上芽的繁殖数量增多，繁殖系数增高，达到快速繁殖的目的。
附图说明
25.图1为实施例1中处理10天后的照片。
26.图2为实施例1中处理18天后的照片。
具体实施方式
27.下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。
28.实施例1：利用疏花水柏枝茎干快繁的方法
29.1)选择健壮、无病虫害的疏花水柏枝作为母株，采集其饱满的1年生地上茎干。然后对茎干进行预处理，去除茎干上叶片，将茎干剪裁成20～30cm长度的茎段。将剪后的茎段置于0.2％质量浓度的高锰酸钾溶液中浸泡8min消毒，结束后捞出用无菌水冲洗10min。
30.2)预处理结束后对茎干进行引发。将茎段至于200mg/l浓度的ga3溶液中浸泡2h。捞出后用保鲜膜包裹茎段置于5℃恒温培养箱中低温处理12h；结束后温度调至30℃高温处理12h。
31.3)整理引发床，分别向洁净的粗石粒、细河沙、泥炭土中喷淋0.2％质量浓度的高锰酸钾溶液，搅拌均匀充分消毒。保证细河沙的含水率在60％，达到“手握成团，松而不散”的标准。床底铺设厚度2cm的粗石粒，然后铺设厚度1cm的泥炭土，再铺设厚度3cm的细河沙。
32.4)将剪裁好的茎段平铺到细河沙上，茎段互相平行，间隔2cm。在平铺好的茎段上覆盖3cm的细河沙，细河沙上铺设一层松鳞片。引发床上覆盖一层拱形塑料膜保温，每隔3d检查一次，并喷淋适量无菌水保持基质湿润，引发床温度控制在20-25℃之间。处理10d及18d后茎段照片如图1和2所示，待芽苗半木质化后，将埋藏的茎段挖出并裁断，保证每个茎段上有一颗芽苗，可进行大田移栽；平均每根茎段萌发7根芽苗。
33.实施例2：
34.参照实施案例1，其他处理条件不变，将ga3溶液设置为150mg/l、250mg/l两种浓度，每隔3d检查一次，持续观测1个月，记录实验效果如下表1。
35.表1
36.编号ga3溶液浓度萌芽时间平均每茎段萌芽数量根系生长情况实施例2-1150mg/l12d7个根系生长旺盛实施例2-2250mg/l9d6个根系生长旺盛
37.实施例3：
38.参照实施案例1，其他处理条件不变，设置以下低温高温处理，每隔3d检查一次，持续观测1个月，记录实验效果如下表2。
39.表2
40.编号变温处理萌芽时间平均每茎段萌芽数量根系生长情况实施例3-1低温4℃/高温32℃9d7个根系生长旺盛实施例3-2低温4℃/高温35℃12d6个根系生长旺盛实施例3-3低温6℃/高温32℃12d6个根系生长旺盛实施例3-4低温6℃/高温35℃12d7个根系生长旺盛
41.实施例4：
42.参照实施案例1，其他处理条件不变，将河沙覆盖厚度设置2.5cm、3.5cm两个处理，每隔3d检查一次，持续观测1个月，记录实验效果如下表3。
43.表3
44.编号河沙覆盖厚度萌芽时间平均每茎段萌芽数量根系生长情况实施例4-12.5cm9d6个根系正常旺盛实施例4-23.5cm12d7个根系生长旺盛
45.对比例1：
46.参照实施案例1，其他处理条件不变，将ga3溶液设置为100mg/l、300mg/l两种浓度，另设置一空白对照清水浸泡，每隔3d检查一次，持续观测1个月，记录实验效果如下表4。
47.表4
[0048][0049]
对比例2：
[0050]
参照实施案例1，其他处理条件不变，将基质设置两个处理，一个是河沙+泥炭混匀，另一个是采用野外常规的土壤，每隔3d检查一次，持续观测1个月，记录实验效果如下：
[0051][0052]
对比例3：
[0053]
参照实施案例1，其他处理条件不变，设置以下低温高温处理，每隔3d检查一次，持续观测1个月，记录实验效果如下：
[0054][0055]
对比例4：
[0056]
参照实施案例1，其他处理条件不变，将河沙覆盖厚度设置2cm、4cm两个处理，每隔3d检查一次，持续观测1个月，记录实验效果如下：
[0057]
编号河沙覆盖厚度萌芽时间平均每茎段萌芽数量根系生长情况对比例4-12cm21d2个根系正常生长对比例4-24cm27d1个根系生长较弱
[0058]
上述的实施例仅为本发明的优选技术方案，而不应视为对于本发明的限制，本技术中的实施例及实施例中的特征在不冲突的情况下，可以相互任意组合。本发明的保护范围应以权利要求记载的技术方案，包括权利要求记载的技术方案中技术特征的等同替换方案为保护范围。即在此范围内的等同替换改进，也在本发明的保护范围之内。