一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法

文档序号:31509652发布日期:2022-09-14 10:56阅读:63来源:国知局

1.本发明涉及食用菌栽培灭菌技术领域,具体涉及一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法。


背景技术:

2.食用菌栽培灭菌一般通过物理、化学或药物的手段将微生物全部杀死。食用菌栽培材料及空气、水和用具上到处都有微生物存在。当培养一种真菌时,培养基、器皿或用具必须经过灭菌后才能使用,否则会使培养物被其他真菌或微生物侵染而影响实际栽培。灭菌的方法很多,最常用的方法有以下几种。
3.1、干热灭菌。
4.由于一般玻璃用具,培养皿、吸管等将灭菌材料,用报纸包好后,放入烘箱中,使温度逐渐升至150-160℃保持2 小时后,关闭电源,使缓慢冷却。
5.2、湿热灭菌。
6.湿热灭菌就是利用蒸汽杀菌。它不需要像干热灭菌时那样高的温度,因为加热杀菌是使微生物的蛋白质凝固。而蛋白质凝固时与含水量、温度等有关,含水量大时使其凝固所需要的温度低,反之、含水量小使其凝固时所需要的温度高,温热灭菌又分常压和高压两种。

常压法,常压灭菌是用蒸汽锅(或普通锅)蒸的方法。温度达到100℃起,一般需要4
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6小时;温度不超过100℃时,根据灭菌量的多少,一般保持在8-24小时,即可达到无菌效果。在没在高压灭菌设备或在高温灭菌易破坏的培养基情况下多采用此法,另常压灭菌还有间歇灭菌法。此法比较麻烦, 通常必须进行三次,每次一小时,因为第一次蒸后,其中营养细胞被杀死,而其芽胞还保持着活力,所以蒸后培养基放入温箱中24小时,待其芽胞萌发后,再蒸第二样再经24小时,蒸第三次,这样才能灭菌彻底。

高压法,此法乃是利用高压蒸汽杀菌锅进行灭菌,当用蒸汽灭菌时,如锅内增加压力,则温度亦随之增高,例如压力0.56公斤/平方厘米=0.55帕斯卡,温度为112.6℃;如压力1公斤/平方厘米= 0.98帕斯卡,温度可达120-121℃;通常理想灭菌干120℃,20分钟能达到目的,115℃,30分钟也就可以了。
7.3.药物灭菌。
8.所用药品种类其多,

70%酒精,用于冷却烧红后的接种针,操作前手或用具的表面杀菌,载玻片,盖玻片的浸泡等。

新洁尔灭、市售一般为 5%溶液,用时稀释至万分之-到千分之一,用于工作环境和器皿表面的灭菌。

0.1%升汞液:用于材料表面的杀菌,用具或废弃的培养物实验后的处理。

福尔马林( 40%由醛溶液):用于空间的熏蒸灭菌,加热或加高锰酸钾使放尽甲醛气体,注意将空间密闭并维持24小时。

紫外线灭菌,用于接种室等的空气灭菌。
9.现有技术中的食用菌栽培料主要有生料、熟料和发酵料三种,为了防止栽培料被杂菌污染,对栽培料进行各种抑菌或杀菌的处理:如现有技术中常用的常压蒸汽灭菌,但是这种方法虽然能够达到杀菌的目的,但是存在着灭菌时间长,能源消耗大,封闭接种稍不注意就会受到污染的弊端;又如间歇灭菌虽然灭菌彻底,但是耗时较长,不适宜对大量栽培料
的处理;又如巴氏发酵消毒法,这种方式处理栽培料的时间长,栽培料的营养损失严重,并且该方法仅仅限于平菇、秀珍菇、姬菇、鸡腿菇等一些适应性强的种类;又如采用广谱性杀菌剂对栽培料进行拌和处理,但是这种处理方式的稳定性和可靠性受到诸多因素的影响,如现有技术中针对平菇生产,采用多菌灵对栽培料进行拌和处理,多菌灵的作用原理是通过药物抑制杂菌孢子的萌发和生长,但是随着温度的升高,如外界温度升高或发菌阶段温度升高时,由于袋内微生物活动加剧,降低了多菌灵的抑菌效果,往往也会造成污染而导致平菇的生长受到影响,国内施用多菌灵拌和平菇栽培料后还出现大面积的污染现象屡见不鲜,此外,平菇菌体内会富集一定量的多菌灵,尤其是在多菌灵使用浓度高时,这种多菌灵在菌体内的富集会给食用者的身体健康带来隐患。


技术实现要素:

10.针对现有技术的不足,本发明的目的是提供一种不需要昂贵的灭菌设备,灭菌方法简单,不需要使用有害的化学药物,无有害化学药物残留,灭菌效果好,生产成本低的简便有效的菌物栽培料灭菌方法。
11.为了实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,包括以下步骤:(1)大棚搭建:选取一块平整干净的地块,在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚,棚高2.8~3.2米;(2)菌物栽培料的配制:将木屑、玉米芯粉碎好,按照玉米芯14~16%、麦麸7~9%、豆粕4~6%、石膏0.8~1.2%、石灰0.8~1.2%,余量为木屑的比例混合各组分,加水拌匀使物料湿度达到64~66%,即得菌物栽培料;(3)调节ph:在步骤(2)所述的菌物栽培料中加入酸碱来调节酸碱度,以满足不同食药用菌栽培所需ph,得到ph调节的菌物栽培料;(4)菌物栽培料的处理:将步骤(3)所述的ph调节的菌物栽培料放入步骤(1)的大棚内,在ph调节的菌物栽培料中拌入2%~4%的甜玉米粉和0.3%~0.5%的氨基酸后,以10~15厘米的厚度铺开ph调节的菌物栽培料,待杂菌孢子萌发,23~25小时后将菌物栽培料堆成高度在1米以上的物料堆;(5)生石灰热封闭:在物料的周围布置用以放置生石灰和水的容器,先在容器中加入生石灰,待灭菌时,加入水,使容器内的生石灰和水反应放出大量的热及含有大量热能的水蒸气,将大棚密闭7~10天;(6)接种菌种:待棚内的热量散发完,操作人员全方位消毒时,进入大棚中将菌物栽培料装袋,得到菌袋;待菌袋中物料温度低于35℃时,接种菌种;(7)发菌、出菇:将接种好菌种的菌包移至发菌棚中,进行发菌管理;待菌丝长满菌袋后转至出菇房,进行出菇管理;同时对发菌及出菇过程中菌物栽培料的污染情况进行统计分析。
12.进一步地,所述步骤(1)中在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚时,棚底由多层耐热性薄膜制成,以免棚底破损导致密封效果差;大棚的棚底面积根据菌物栽培料的量决定。
13.进一步地,所述步骤(2)中将木屑、玉米芯粉碎至300~500目,按照玉米芯15~16%、麦麸8~9%、豆粕5~6%、石膏1~1.2%、石灰1~1.2%,余量为木屑的比例混合各组分,加
水拌匀使物料湿度达到64~66%,即得菌物栽培料。
14.进一步地,所述步骤(2)中所述菌物栽培料中还包括0.4~0.6%的葡萄籽。
15.进一步地,所述步骤(2)中所述菌物栽培料中还包括0.5~0.6%的葡萄籽。
16.进一步地,所述步骤(3)中的酸度调节剂为磷酸或柠檬酸,碱性调节剂为 磷酸氢二钠、碳酸氢钠或碳酸氢钾。
17.进一步地,所述步骤(4)中将步骤(3)所述的ph调节的菌物栽培料放入步骤(1)的大棚内,在ph调节的菌物栽培料中拌入2%~4%的甜玉米粉和0.3%~0.5%的氨基酸后,以10~15厘米的厚度铺开ph调节的菌物栽培料,在菌物栽培料的上表面喷洒杂菌萌发促进液,待杂菌孢子萌发,23~25小时后将菌物栽培料堆成高度在1米以上的物料堆;所述杂菌萌发促进液由以下重量份的组分组成:水100份、氯化钙0.6~0.8份、可溶性糖4~6份、可溶性淀粉5~7份、氯化钠0.3~0.5份。
18.进一步地,所述杂菌萌发促进液由以下重量份的组分组成:水100份、氯化钙0.7~0.8份、可溶性糖5~6份、可溶性淀粉6~7份、氯化钠0.4~0.5份。
19.进一步地,所述步骤(5)中在物料的周围布置用以放置生石灰和水的容器,先在容器中加入一半容积的生石灰,待灭菌时,加入水,使容器内的生石灰和水反应放出大量的热及含有大量热能的水蒸气,将大棚密闭8~10天;生石灰的用量以大棚的体积计,每立方米大棚匹配1~3公斤的生石灰。
20.进一步地,所述步骤(6)中待棚内的热量散发完,操作人员全方位消毒时,进入大棚中将菌物栽培料装袋,得到菌袋;待菌袋中物料温度在25~28℃时,接种菌种。
21.本发明一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,高压灭菌法不但对设备的要求高,而且在使用过程中如使用不当容易出现爆炸等危险性情况,且设备采购费昂贵,不易于大规模生产使用,常压灭菌方法,对设备的要求较低,但是在灭菌过程损耗的电能或燃料大,不利于集约成本,本发明中使用的简易大棚及生石灰组合的湿热灭菌方法,不仅灭菌效果好,且无设备采购压力,生石灰容易获得,且成本不高;杂菌污染主要以木屑中的鬼伞菌,玉米芯中的黄曲霉、绿霉菌为主,本发明方法步骤(4)中,先在菌物栽培料中拌入适量甜玉米粉、氨基酸,再铺开物料有利于杂菌孢子萌发,在杂菌孢子萌发最旺时进行碱性湿热高温灭菌效果好;灭菌后的大棚为无菌环境,可以作为接种的良好环境,无须另找无菌室接种菌种,操作简便,便于推广应用。
22.本发明一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,菌物栽培料中还包括粉末状的葡萄籽,粉末状的葡萄籽质地蓬松,且富含氨基酸及各种矿物质,加入葡萄籽不会带来新的杂菌,杂菌污染还是以木屑中的鬼伞菌,玉米芯中的黄曲霉、绿霉菌为主,加入葡萄籽后,步骤(4)中拌入适量甜玉米粉和氨基酸且铺开物料时,鬼伞菌、黄曲霉、绿霉菌等杂菌的萌发效果更好,进行碱性湿热高温灭菌效果也更好;为进一步提升鬼伞菌、黄曲霉、绿霉菌等杂菌的萌发效果,还在菌物栽培料的上表面喷洒杂菌萌发促进液,杂菌萌发促进液以可溶性糖、可溶性淀粉为主,氯化钙、氯化钠为辅,提供杂菌萌发所需的营养需求,在甜玉米粉、氨基酸以及杂菌萌发促进液的共同作用下,有效促使杂菌萌发,进一步提升碱性湿热高温灭菌效果。
23.说明书附图图1为实施例1-6所用大棚的结构示意图;图中,1为大棚本体,2为可开合的门,3为
用以放置生石灰和水的容器。
具体实施方式
24.下面的实施例可以帮助本领域的技术人员更全面地理解本发明,但不可以以任何方式限制本发明。
25.本发明一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,若是大棚搭建的地方是田地,可以在大棚搭建的地方挖用以放置石灰的土坑,之后再进行搭棚,就不用搭载用以放置生石灰和水的容器;步骤(5)中用以放置生石灰和水的容器由耐热耐强碱的材料制成。
26.本发明一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,如图1所示,下述实施例1-6所用大棚包括大棚本体1,所述大棚本体1上设置有可开合的门2,其内设置有用以放置生石灰和水的容器3。
27.本发明一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,下述实施例1-6及对比例1-2中,调节ph步骤中将菌物栽培料的ph调节至6.8-7.2,接种的菌菇为杏鲍菇;可接种的菌菇不限杏鲍菇,若是接种的别的菌菇,则需要相应调整菌物栽培料的ph值。
28.本发明一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,下述实施例中杂菌萌发促进液中的可溶性糖为葡萄糖,可溶性淀粉为可溶性红薯淀粉,但可溶性糖、可溶性淀粉的种类不限于葡萄糖、可溶性红薯淀粉。
29.本发明一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,菌物栽培料各组分中的“%”均指重量百分比;75%酒精中的“%”是指体积比。
30.下面进一步例举实施例以详细说明本发明。应理解,以下实施例只用于对本发明进行进一步说明,不能理解为对本发明保护范围的限制,本领域的技术人员根据本发明的上述内容作出的一些非本质的改进和调整均属于本发明的保护范围。下述示例具体的工艺参数等也仅是合适范围中的一个示例,即本领域技术人员可以通过本文的说明做合适的范围内选择,而并非要限定于下文示例的具体数值。
31.实施例1一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,包括以下步骤:(1)大棚搭建:选取一块8m*20m且平整干净的地块,在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚,棚高2.8米;在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚时,棚底由多层耐热性薄膜制成,以免棚底破损导致密封效果差;(2)菌物栽培料的配制:将木屑、玉米芯粉碎至300目,按照玉米芯14%、麦麸7%、豆粕4%、石膏0.8%、石灰0.8%、葡萄籽0.4%,余量为木屑的比例混合各组分,加水拌匀使物料湿度达到64%,即得菌物栽培料;菌物栽培料的重量控制在20

;(3)调节ph:在步骤(2)所述的菌物栽培料中加入酸碱来调节酸碱度,以满足不同食药用菌栽培所需ph,得到ph调节的菌物栽培料;酸度调节剂为磷酸或柠檬酸,碱性调节剂为 磷酸氢二钠、碳酸氢钠或碳酸氢钾;(4)菌物栽培料的处理:将步骤(3)所述的ph调节的菌物栽培料放入步骤(1)的大棚内,在ph调节的菌物栽培料中拌入2%的甜玉米粉和0.3%的氨基酸后,以10厘米的厚度铺开ph调节的菌物栽培料,在菌物栽培料的上表面喷洒杂菌萌发促进液,待杂菌孢子萌发,23小时后将菌物栽培料堆成高度在1米以上的物料堆;所述杂菌萌发促进液由以下重量份的
组分组成:水100份、氯化钙0.6份、可溶性糖4份、可溶性淀粉5份、氯化钠0.3份;所述杂菌萌发促进液的用量是,能够将菌物栽培料的上表面打湿即可;(5)生石灰热封闭:在物料的周围布置4个用以放置生石灰和水的容器,容器体积为0.5立方米,先在容器中加入容器一半容积的生石灰,待灭菌时,加入水,使容器内的生石灰和水反应放出大量的热及含有大量热能的水蒸气,将大棚密闭7天;生石灰的用量以大棚的体积计,每立方米大棚匹配1公斤的生石灰;(6)接种菌种:待棚内的热量散发完,操作人员对自己的衣物进行全方位消毒,同时用75%酒精消毒手后,进入大棚中将菌物栽培料装袋,得到菌袋;待菌袋中物料温度在25℃时,接种菌种;(7)发菌、出菇:将接种好菌种的菌包移至发菌棚中,进行发菌管理;待菌丝长满菌袋后转至出菇房,进行出菇管理;同时对发菌及出菇过程中菌物栽培料的污染情况进行统计分析。
32.实施例2一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,包括以下步骤:(1)大棚搭建:选取一块8m*20m且平整干净的地块,在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚,棚高3.2米;在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚时,棚底由多层耐热性薄膜制成,以免棚底破损导致密封效果差;(2)菌物栽培料的配制:将木屑、玉米芯粉碎至500目,按照玉米芯16%、麦麸9%、豆粕6%、石膏1.2%、石灰1.2%、葡萄籽0.6%,余量为木屑的比例混合各组分,加水拌匀使物料湿度达到66%,即得菌物栽培料;菌物栽培料的重量控制在20

;(3)调节ph:在步骤(2)所述的菌物栽培料中加入酸碱来调节酸碱度,以满足不同食药用菌栽培所需ph,得到ph调节的菌物栽培料;酸度调节剂为磷酸或柠檬酸,碱性调节剂为 磷酸氢二钠、碳酸氢钠或碳酸氢钾;(4)菌物栽培料的处理:将步骤(3)所述的ph调节的菌物栽培料放入步骤(1)的大棚内,在ph调节的菌物栽培料中拌入4%的甜玉米粉和0.5%的氨基酸后,以15厘米的厚度铺开ph调节的菌物栽培料,在菌物栽培料的上表面喷洒杂菌萌发促进液,待杂菌孢子萌发,25小时后将菌物栽培料堆成高度在1米以上的物料堆;所述杂菌萌发促进液由以下重量份的组分组成:水100份、氯化钙0.8份、可溶性糖6份、可溶性淀粉7份、氯化钠0.5份;所述杂菌萌发促进液的用量是,能够将菌物栽培料的上表面打湿即可;(5)生石灰热封闭:在物料的周围布置6个用以放置生石灰和水的容器,容器体积为0.5立方米,先在容器中加入容器一半容积的生石灰,待灭菌时,加入水,使容器内的生石灰和水反应放出大量的热及含有大量热能的水蒸气,将大棚密闭10天;生石灰的用量以大棚的体积计,每立方米大棚匹配3公斤的生石灰;(6)接种菌种:待棚内的热量散发完,操作人员对自己的衣物进行全方位消毒,同时用75%酒精消毒手后,进入大棚中将菌物栽培料装袋,得到菌袋;待菌袋中物料温度在35℃时,接种菌种;(7)发菌、出菇:将接种好菌种的菌包移至发菌棚中,进行发菌管理;待菌丝长满菌袋后转至出菇房,进行出菇管理;同时对发菌及出菇过程中菌物栽培料的污染情况进行统计分析。
33.实施例3一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,包括以下步骤:(1)大棚搭建:选取一块8m*20m且平整干净的地块,在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚,棚高3米;在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚时,棚底由多层耐热性薄膜制成,以免棚底破损导致密封效果差;(2)菌物栽培料的配制:将木屑、玉米芯粉碎至400目,按照玉米芯15%、麦麸8%、豆粕5%、石膏1%、石灰1%、葡萄籽0.4%,余量为木屑的比例混合各组分,加水拌匀使物料湿度达到65%,即得菌物栽培料;菌物栽培料的重量控制在20

;(3)调节ph:在步骤(2)所述的菌物栽培料中加入酸碱来调节酸碱度,以满足不同食药用菌栽培所需ph,得到ph调节的菌物栽培料;酸度调节剂为磷酸或柠檬酸,碱性调节剂为 磷酸氢二钠、碳酸氢钠或碳酸氢钾;(4)菌物栽培料的处理:将步骤(3)所述的ph调节的菌物栽培料放入步骤(1)的大棚内,在ph调节的菌物栽培料中拌入3%的甜玉米粉和0.4%的氨基酸后,以12厘米的厚度铺开ph调节的菌物栽培料,在菌物栽培料的上表面喷洒杂菌萌发促进液,待杂菌孢子萌发,24小时后将菌物栽培料堆成高度在1米以上的物料堆;所述杂菌萌发促进液由以下重量份的组分组成:水100份、氯化钙0.7份、可溶性糖5份、可溶性淀粉6份、氯化钠0.4份;所述杂菌萌发促进液的用量是,能够将菌物栽培料的上表面打湿即可;(5)生石灰热封闭:在物料的周围布置5个用以放置生石灰和水的容器,容器体积为0.5立方米,先在容器中加入容器一半容积的生石灰,待灭菌时,加入水,使容器内的生石灰和水反应放出大量的热及含有大量热能的水蒸气,将大棚密闭8天;生石灰的用量以大棚的体积计,每立方米大棚匹配2公斤的生石灰;(6)接种菌种:待棚内的热量散发完,操作人员对自己的衣物进行全方位消毒,同时用75%酒精消毒手后,进入大棚中将菌物栽培料装袋,得到菌袋;待菌袋中物料温度在28℃时,接种菌种;(7)发菌、出菇:将接种好菌种的菌包移至发菌棚中,进行发菌管理;待菌丝长满菌袋后转至出菇房,进行出菇管理;同时对发菌及出菇过程中菌物栽培料的污染情况进行统计分析。
34.实施例4一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,包括以下步骤:(1)大棚搭建:选取一块8m*20m且平整干净的地块,在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚,棚高3米;在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚时,棚底由多层耐热性薄膜制成,以免棚底破损导致密封效果差;(2)菌物栽培料的配制:将木屑、玉米芯粉碎至400目,按照玉米芯15%、麦麸8%、豆粕5%、石膏1%、石灰1%,余量为木屑的比例混合各组分,加水拌匀使物料湿度达到65%,即得菌物栽培料;菌物栽培料的重量控制在20

;(3)调节ph:在步骤(2)所述的菌物栽培料中加入酸碱来调节酸碱度,以满足不同食药用菌栽培所需ph,得到ph调节的菌物栽培料;酸度调节剂为磷酸或柠檬酸,碱性调节剂为 磷酸氢二钠、碳酸氢钠或碳酸氢钾;(4)菌物栽培料的处理:将步骤(3)所述的ph调节的菌物栽培料放入步骤(1)的大
棚内,在ph调节的菌物栽培料中拌入3%的甜玉米粉和0.4%的氨基酸后,以12厘米的厚度铺开ph调节的菌物栽培料,在菌物栽培料的上表面喷洒杂菌萌发促进液,待杂菌孢子萌发,24小时后将菌物栽培料堆成高度在1米以上的物料堆;所述杂菌萌发促进液由以下重量份的组分组成:水100份、氯化钙0.7份、可溶性糖5份、可溶性淀粉6份、氯化钠0.4份;所述杂菌萌发促进液的用量是,能够将菌物栽培料的上表面打湿即可;(5)生石灰热封闭:在物料的周围布置5个用以放置生石灰和水的容器,容器体积为0.5立方米,先在容器中加入容器一半容积的生石灰,待灭菌时,加入水,使容器内的生石灰和水反应放出大量的热及含有大量热能的水蒸气,将大棚密闭8天;生石灰的用量以大棚的体积计,每立方米大棚匹配2公斤的生石灰;(6)接种菌种:待棚内的热量散发完,操作人员对自己的衣物进行全方位消毒,同时用75%酒精消毒手后,进入大棚中将菌物栽培料装袋,得到菌袋;待菌袋中物料温度在28℃时,接种菌种;(7)发菌、出菇:将接种好菌种的菌包移至发菌棚中,进行发菌管理;待菌丝长满菌袋后转至出菇房,进行出菇管理;同时对发菌及出菇过程中菌物栽培料的污染情况进行统计分析。
35.实施例5一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,包括以下步骤:(1)大棚搭建:选取一块8m*20m且平整干净的地块,在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚,棚高3米;在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚时,棚底由多层耐热性薄膜制成,以免棚底破损导致密封效果差;(2)菌物栽培料的配制:将木屑、玉米芯粉碎至400目,按照玉米芯15%、麦麸8%、豆粕5%、石膏1%、石灰1%、葡萄籽0.4%,余量为木屑的比例混合各组分,加水拌匀使物料湿度达到65%,即得菌物栽培料;菌物栽培料的重量控制在20

;(3)调节ph:在步骤(2)所述的菌物栽培料中加入酸碱来调节酸碱度,以满足不同食药用菌栽培所需ph,得到ph调节的菌物栽培料;酸度调节剂为磷酸或柠檬酸,碱性调节剂为 磷酸氢二钠、碳酸氢钠或碳酸氢钾;(4)菌物栽培料的处理:将步骤(3)所述的ph调节的菌物栽培料放入步骤(1)的大棚内,在ph调节的菌物栽培料中拌入3%的甜玉米粉和0.4%的氨基酸后,以12厘米的厚度铺开ph调节的菌物栽培料,待杂菌孢子萌发,24小时后将菌物栽培料堆成高度在1米以上的物料堆;(5)生石灰热封闭:在物料的周围布置5个用以放置生石灰和水的容器,容器体积为0.5立方米,先在容器中加入容器一半容积的生石灰,待灭菌时,加入水,使容器内的生石灰和水反应放出大量的热及含有大量热能的水蒸气,将大棚密闭8天;生石灰的用量以大棚的体积计,每立方米大棚匹配2公斤的生石灰;(6)接种菌种:待棚内的热量散发完,操作人员对自己的衣物进行全方位消毒,同时用75%酒精消毒手后,进入大棚中将菌物栽培料装袋,得到菌袋;待菌袋中物料温度在28℃时,接种菌种;(7)发菌、出菇:将接种好菌种的菌包移至发菌棚中,进行发菌管理;待菌丝长满菌袋后转至出菇房,进行出菇管理;同时对发菌及出菇过程中菌物栽培料的污染情况进行统
计分析。
36.实施例6一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,包括以下步骤:(1)大棚搭建:选取一块8m*20m且平整干净的地块,在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚,棚高3米;在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚时,棚底由多层耐热性薄膜制成,以免棚底破损导致密封效果差;(2)菌物栽培料的配制:将木屑、玉米芯粉碎至400目,按照玉米芯15%、麦麸8%、豆粕5%、石膏1%、石灰1%,余量为木屑的比例混合各组分,加水拌匀使物料湿度达到65%,即得菌物栽培料;菌物栽培料的重量控制在20

;(3)调节ph:在步骤(2)所述的菌物栽培料中加入酸碱来调节酸碱度,以满足不同食药用菌栽培所需ph,得到ph调节的菌物栽培料;酸度调节剂为磷酸或柠檬酸,碱性调节剂为 磷酸氢二钠、碳酸氢钠或碳酸氢钾;(4)菌物栽培料的处理:将步骤(3)所述的ph调节的菌物栽培料放入步骤(1)的大棚内,在ph调节的菌物栽培料中拌入3%的甜玉米粉和0.4%的氨基酸后,以12厘米的厚度铺开ph调节的菌物栽培料,待杂菌孢子萌发,24小时后将菌物栽培料堆成高度在1米以上的物料堆;(5)生石灰热封闭:在物料的周围布置5个用以放置生石灰和水的容器,容器体积为0.5立方米,先在容器中加入容器一半容积的生石灰,待灭菌时,加入水,使容器内的生石灰和水反应放出大量的热及含有大量热能的水蒸气,将大棚密闭8天;生石灰的用量以大棚的体积计,每立方米大棚匹配2公斤的生石灰;(6)接种菌种:待棚内的热量散发完,操作人员对自己的衣物进行全方位消毒,同时用75%酒精消毒手后,进入大棚中将菌物栽培料装袋,得到菌袋;待菌袋中物料温度在28℃时,接种菌种;(7)发菌、出菇:将接种好菌种的菌包移至发菌棚中,进行发菌管理;待菌丝长满菌袋后转至出菇房,进行出菇管理;同时对发菌及出菇过程中菌物栽培料的污染情况进行统计分析。
37.对比例1一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,包括以下步骤:(1)大棚搭建:选取一块8m*20m且平整干净的地块,在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚,棚高3米;在地块上搭建封闭的耐热性薄膜大棚时,棚底由多层耐热性薄膜制成,以免棚底破损导致密封效果差;(2)菌物栽培料的配制:将木屑、玉米芯粉碎至400目,按照玉米芯15%、麦麸8%、豆粕5%、石膏1%、石灰1%,余量为木屑的比例混合各组分,加水拌匀使物料湿度达到65%,即得菌物栽培料;菌物栽培料的重量控制在20

;(3)调节ph:在步骤(2)所述的菌物栽培料中加入酸碱来调节酸碱度,以满足不同食药用菌栽培所需ph,得到ph调节的菌物栽培料;酸度调节剂为磷酸或柠檬酸,碱性调节剂为 磷酸氢二钠、碳酸氢钠或碳酸氢钾;(4)菌物栽培料的处理:将步骤(3)所述的ph调节的菌物栽培料放入步骤(1)的大棚内,将菌物栽培料堆成高度在1米以上的物料堆;
(5)生石灰热封闭:在物料的周围布置5个用以放置生石灰和水的容器,容器体积为0.5立方米,先在容器中加入容器一半容积的生石灰,待灭菌时,加入水,使容器内的生石灰和水反应放出大量的热及含有大量热能的水蒸气,将大棚密闭8天;生石灰的用量以大棚的体积计,每立方米大棚匹配2公斤的生石灰;(6)接种菌种:待棚内的热量散发完,操作人员对自己的衣物进行全方位消毒,同时用75%酒精消毒手后,进入大棚中将菌物栽培料装袋,得到菌袋;待菌袋中物料温度在28℃时,接种菌种;(7)发菌、出菇:将接种好菌种的菌包移至发菌棚中,进行发菌管理;待菌丝长满菌袋后转至出菇房,进行出菇管理;同时对发菌及出菇过程中菌物栽培料的污染情况进行统计分析。
38.对比例2(高压灭菌处理组)一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,步骤如下:1.选取一块平整干净的地块用于拌料。
39.2.将木屑、玉米芯等粉碎好,按照木屑70%、玉米芯15%、麦麸8%、豆粕5%、石膏1%、石灰1%比例混合后,加水拌匀使物料湿度达到65%左右。
40.3.根据不同的食药用菌栽培ph要求加入一定的酸碱来调节酸碱度。
41.4.将物料拌匀后装入可高压栽培袋,放入高压灭菌锅,121℃灭菌30分钟。
42.5.取出冷却到35℃以下,转移到无菌操作室。
43.6.操作人员75%酒精消毒手,更换干净的衣物,同时用75%酒精消毒后,进行接种菌种。
44.7.将接种好的菌包移至发菌棚中进行发菌管理,待菌丝长满袋后转至出菇房进行出菇管理。
45.8.对发菌及出菇过程的栽培物料污染情况进行统计分析。
46.对比例3(常压灭菌处理组)1. 选取一块平整干净的地块用于拌料。
47.2.将木屑、玉米芯等粉碎好,按照木屑70%、玉米芯15%、麦麸8%、豆粕5%、石膏1%、石灰1%比例混合后,加水拌匀使物料湿度达到65%左右。
48.3.根据不同的食药用菌栽培ph要求加入一定的酸碱来调节酸碱度。
49.4.将物料拌匀后装入可耐高温栽培袋,放入蒸炉,常压灭菌8-16小时,该过程可以用电或者煤炭进行加热。
50.5.取出冷却到35℃以下,转移到无菌操作室进行接种。
51.6.操作人员75%酒精消毒手,更换干净的衣物,同时用75%酒精消毒后,进行接种菌种。
52.7.将接种好的菌包移至发菌棚中进行发菌管理,待菌丝长满袋后转至出菇房进行出菇管理。
53.8.对发菌及出菇过程的栽培物料污染情况进行统计分析。
54.空白对照组:按照木屑70%、玉米芯15%、麦麸8%、豆粕5%、石膏1%、石灰1%比例混合后,加水拌匀使物料湿度达到65%左右,得到栽培物料;未对栽培物料进行灭菌处理。
55.上述实施例1-6以及对比例1-3中的发菌及出菇过程的栽培物料污染情况统计结
果如下表1所示;表1项目杂菌感染率(%)菌丝生长状况实施例1(棚式生石灰灭菌)0.04+++实施例2(棚式生石灰灭菌)0.05+++实施例3(棚式生石灰灭菌)0.03+++实施例4(棚式生石灰灭菌)0.23+++实施例5(棚式生石灰灭菌)0.32+++实施例6(棚式生石灰灭菌)0.61+++对比例1(棚式生石灰灭菌)34.9+对比例2(高压灭菌处理组)1.12++对比例3(常压灭菌处理组)1.56++空白对照组(未灭菌处理)98.87—+表示有食用菌菌丝生长,但生长状况差;++表示食用菌菌丝正常生长;+++表示食用菌菌丝生长良好;—表示未观察到接种的食用菌菌丝;由上述实验结果可知,在保证接种环境,及高压灭菌锅的良好状态下,高压灭菌和常压灭菌效果相当,基本能够较好的消灭杂菌的感染,本发明的棚式灭菌法在几种灭菌方法中污染率最低,效果最好。
56.本发明一种简便有效的菌物栽培料灭菌方法,使用简易大棚及生石灰组合的湿热灭菌方法,不仅灭菌效果好,且无设备采购压力,生石灰容易获得,且成本不高;杂菌污染主要以木屑中的鬼伞菌,玉米芯中的黄曲霉、绿霉菌为主,本发明方法步骤(4)中拌入适量甜玉米粉和氨基酸且铺开物料有利于杂菌孢子萌发,在杂菌孢子萌发最旺时进行碱性湿热高温灭菌效果好;灭菌后的大棚为无菌环境,可以作为接种的良好环境,无须另找无菌室接种菌种,操作简便,便于推广应用;菌物栽培料中还包括粉末状的葡萄籽,粉末状的葡萄籽质地蓬松,且富含氨基酸及各种矿物质,加入葡萄籽不会带来新的杂菌,杂菌污染还是以木屑中的鬼伞菌,玉米芯中的黄曲霉、绿霉菌为主,加入葡萄籽后,步骤(4)中铺开物料时,鬼伞菌、黄曲霉、绿霉菌等杂菌的萌发效果更好,进行碱性湿热高温灭菌效果也更好;为进一步提升鬼伞菌、黄曲霉、绿霉菌等杂菌的萌发效果,还在菌物栽培料的上表面喷洒杂菌萌发促进液,杂菌萌发促进液以可溶性糖、可溶性淀粉为主,氯化钙、氯化钠为辅,提供杂菌萌发所需的营养需求,在甜玉米粉、氨基酸以及杂菌萌发促进液的共同作用下,有效促使杂菌萌发,进一步提升碱性湿热高温灭菌效果。
57.虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之做一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
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