一种快速繁育长茎葡萄蕨藻苗种的方法与流程

1.本发明涉及海藻养殖技术领域，特别涉及一种快速繁育长茎葡萄蕨藻苗种的方法。


背景技术：

2.长茎葡萄蕨藻(caulerpa lentillifera)，又名海葡萄，是一种大型海洋绿藻，广泛分布于热带和亚热带海域，其富含多糖、纤维、氨基酸、蛋白质以及多种微量元素，因具有较高经济和生态价值而备受关注。
3.随着海藻栽培业的不断发展，现有对长茎葡萄蕨藻的养殖繁育技术的研究不断深入。我国在福建、海南、青岛等地区已实现了一定规模化的长茎葡萄蕨藻的人工养殖。由于长茎葡萄蕨藻的生长发育的过程中对水温、盐度、光照等环境生长因子的影响，导致长茎葡萄蕨藻的养殖要求较高。高质量、高产的长茎葡萄蕨藻苗种繁育是长茎葡萄蕨藻的人工养殖的基础，但现有对于长茎葡萄蕨藻苗种的繁殖培育技术的研究较少，在长茎葡萄蕨藻苗种培育的过程中，往往存在优良苗种扩繁培育缓慢，产量不稳定，抗逆性较低而导致苗种质量较低等问题，因此，亟需寻找一种快速繁育长茎葡萄蕨藻苗种的方法，以实现高效且稳定的长茎葡萄蕨藻苗种人工繁育，促进长茎葡萄蕨藻的人工养殖技术的更加广泛的推广和应用。


技术实现要素：

4.鉴于此，本发明提出一种快速繁育长茎葡萄蕨藻苗种的方法。
5.本发明的技术方案是这样实现的：
6.本发明提供一种快速繁育长茎葡萄蕨藻苗种的方法，包括如下步骤：
7.步骤1：取生长直立茎长度≥8cm的长茎葡萄蕨藻作为亲本种藻，放入铺设有附着基的培育池中，进行成熟培育；
8.步骤2：待亲本种藻开始释放雌雄配子时，降低光照强度至1200-1600lx，光周期10l:14d，水体温度为19-23℃的条件下，进行过渡期培育2-3d；
9.步骤3：将过渡期培育的亲本种藻转入新的培育池中，提升光照强度至 6000-8000lx，光周期12l:12d，水体温度为27-30℃，亲本种藻继续释放雌雄配子，取出亲本种藻；
10.步骤4：受精卵培育：在受精卵定植一周内，在光照强度为1000-2000lx，光周期为8l:16d的条件下培育，并向培育池中每日注入0.2-0.3kg/m2的营养水体，每日分2-3次注入；受精卵定植一周后，每隔3-4d采用营养水体与过滤海水组合更换10-15％体积的池水，并在白光光照强度为2000-3000lx，光周期为 14l:10d的条件下，每隔1-2d增加光照强度为1000-1500lx的led绿光进行短时照射，连续照射3-5d，每日照射2-4小时；保持水体盐度为35-37的条件下进行受精卵培育；
11.步骤5：待苗种长至达到4.5cm以上，即可收获。
12.进一步说明，所述过渡期培育的条件为白光光照强度1500lx，光周期 10l:14d，水
体温度为20-22℃。
13.进一步说明，步骤4中，所述营养水体是添加2-4mg/l柠檬酸、3-6mg/l硝酸铵、4-8mg/l氯化钠、8-10mg/l氯化铵、0.5-0.6mg/l吲哚丁酸、0.01-0.05mg/l 生物素的灭菌池水。
14.进一步说明，步骤4中，营养水体与过滤海水组合更换池水时，所述营养水体与过滤海水的体积比为：(1-2)：(3-7)。
15.进一步说明，步骤4中，用营养水体与过滤海水组合更换10-15％体积的池水时，控制水流≤0.2m/s。
16.进一步说明，步骤4中，在白光光照强度为2500lx，光周期为14l:10d的条件下，每隔2d增加光照强度为1500lx的led绿光进行短时照射，连续照射 5d，每日照射3小时。
17.进一步说明，所述成熟培育的条件为：水体温度27-30℃、白光光照强度 3000-4000lx，光周期12l:12d，亲本种藻的培育密度为1.2-1.5g/m2。
18.进一步说明，所述附着基由粒径为0.3-0.4mm的砂砾或维尼纶网绳铺设在池底。
19.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
20.(1)本发明在亲本种藻培育性成熟后，通过以低光照强度和低温条件下的过渡期培育驯化，有利于提高亲本种藻释放雌雄配子量，产量高，并且本发明以过渡期培育后释放的雌雄配子进行快速繁育，而且有利于增强苗种的培育水体温度变化的耐受性。
21.(2)本发明通过优化受精卵培育条件，分别在受精卵定植阶段和生长前期，利用营养水体与过滤海水进行不同的水体肥化，同时，在调控培育水体环境的基础上，采用一定强度的led绿光进行进行短时循环照射，促进长茎葡萄蕨藻苗种快速发育生长的生理响应，大大加快了长茎葡萄蕨藻苗种的繁育速率，苗种培育时间缩短至30d内，繁育产出率高，30d内的平均产量可达到1.0万株/m2以上，同时，长茎葡萄蕨藻苗种的光照的耐受性增强，有利于提高直立茎生长整齐度，实现进行规模化的高产量与高质量的人工快速繁育长茎葡萄蕨藻苗种。
具体实施方式
22.为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
23.本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
24.本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
25.实施例1-长茎葡萄蕨藻苗种的繁育方法，包括如下步骤：
26.(1)取生长直立茎长度8～9cm的长茎葡萄蕨藻作为亲本种藻，放入铺设有附着基的培育池中，控制水体温度27-29℃、白光光照强度3000lx，光周期 12l:12d，进行成熟培育；
27.(2)待亲本种藻开始释放雌雄配子时，降低白光光照强度至1200lx，光周期10l:14d，水体温度为19-21℃的条件下，进行过渡期培育3d；
28.(3)将过渡期培育的亲本种藻转入新的培育池中，提升光照强度至6000lx，光周期12l:12d，水体温度为27-29℃，亲本种藻继续释放雌雄配子，取出亲本种藻；
29.(4)受精卵培育：在受精卵定植一周内，在光照强度为1000lx，光周期为 8l:16d的条件下培育，并向培育池中每日注入0.2kg/m2的营养水体，每日分2 次注入；营养水体是添
465nm)进行短时照射，连续照射5日，每日照射3 小时；保持水体盐度为35-36的条件下进行受精卵培育。
43.对比例1
44.如实施例3的长茎葡萄蕨藻苗种的繁育方法，取消对亲本种藻的过渡期培育。步骤1中，将培育至成熟的亲本种藻转移至新的培育池中，直接以照强度至7000lx，光周期12l:12d，水体温度为27-29℃进行培育，释放雌雄配子，取出亲本种藻，控制如实施例3的相同条件下进行受精卵培育。
45.对比例2
46.如实施例3的长茎葡萄蕨藻苗种的繁育方法，在受精卵整个培育过程中，每隔2日向培育池中固定注入0.25kg/m2的营养水体，每日分3次注入；每隔3d 采用过滤海水更换13％体积的池水，控制水流0.1～0.2m/s。
47.对比例3
48.如实施例3的长茎葡萄蕨藻苗种的繁育方法，在受精卵定植一周后，控制白光光照强度为4000lx，光周期为14l:10d，未采用led绿光进行短时照射处理；其余繁育条件均与实施例3相同。
49.对比例4
50.如实施例3的长茎葡萄蕨藻苗种的繁育方法，在受精卵定植一周后，采用光照强度为1500lx的led绿光与光照强度为2500lx的白光组合照射，光周期为14l:10d；其余繁育条件均与实施例3相同。
51.实施例4-不同的长茎葡萄蕨藻苗种的繁育方法对长茎葡萄蕨藻苗种的繁育速率的影响。
52.根据上述实施例3、对比例1-4的长茎葡萄蕨藻苗种的繁育方法，选择均含有由粒径为0.3-0.4mm的砂砾铺设池底的培育池进行长茎葡萄蕨藻苗种繁育实验，取同批生长直立茎长度8～9cm的长茎葡萄蕨藻作为亲本种藻，亲本种藻的培育密度为1.3g/m2，培育池的进出水条件相同，定期观察长茎葡萄蕨藻亲本种藻的生长发育情况，(性成熟为长茎葡萄蕨藻藻体表形成网状结构，球状小枝基部长出芽管)；并统计受精卵定植生长后，第20、30d的直立茎平均长度，30d 后的长茎葡萄蕨藻苗种繁育产量，其结果如下表：
[0053][0054]
由上表可以看出，由本发明实施例3的长茎葡萄蕨藻苗种的繁育方法，苗种产量高，同时繁育生长速率明显提高，且直立茎生长长度整齐好，苗种培育时间可缩短至30d内(达到4.5cm以上)，30d内的平均产量可达到1.02万株/m2。
[0055]
对比不同实验组的长茎葡萄蕨藻苗种的生长速率可以看出，对比例2、3、4 的长茎葡萄蕨藻苗种生长速率降低，其中，对比例2进行单独地补充营养水体的方式进行水体肥化，其苗种的产量减少，并且影响苗种的生长速率。对比例3 中未采用一定强度的led绿光进行进行短时循环照射处理，其无法在30d内有效获得较高质量的长茎葡萄蕨藻苗种，其直立茎平均长度＜4.5cm，而对比例4 中虽然采用led绿光结合白光组合照射，但较长的绿光照射下，虽能够有效实现30d内收获苗种(4.5cm以上)，但其苗种的生长光照的耐受性较低，直立茎的长度整齐度较差，表明采用一定强度的led绿光进行进行短时循环照射，促进长茎葡萄蕨藻苗种快速发育生长的生理响应，有利加快了长茎葡萄蕨藻苗种的繁育速率和增强长茎葡萄蕨藻苗种的光照的耐受性，保持良好的直立茎生长的整齐度。
[0056]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。