一种综合防控菠萝杂交种苗苗期病害的繁育方法与流程

本发明属于作物繁育，具体涉及综合防控菠萝杂交种苗苗期病害的繁育方法。

背景技术：

1、菠萝[ananas comosus(l.)merr.]又称为凤梨，属于凤梨科凤梨属多年生单子叶常绿草本植物，是著名热带水果之一。菠萝果实营养丰富，含有大量的果糖，葡萄糖，维生素b、c，磷，柠檬酸和蛋白酶等物质，是全球最具有经济价值的水果之一。

2、目前，全世界栽培的优良菠萝品种较少，亟待挖掘现有种质资源，利用特定性状大力开展杂交育种工作。由于菠萝种子较小，普通方法采用是在培养皿中垫滤纸，新改良方法是本技术人早前申请的专利，名称为：一种菠萝种子透气保水繁育方法，专利号：zl202210193482.1，是在培养皿中垫海绵繁育种苗。将菠萝种子放置在滤纸或者海绵上喷淋水分，控制培养条件，在适合的光照、温度下开展繁育。但现行菠萝种子繁育技术存在诸多弊病：研究发现前期菠萝果实与种子采收以及种苗繁育环节处理不当，从而致使在气候箱高温高湿环境中种苗极易感染传播病害，造成幼苗成活率降低或者很低，最终导致菠萝授粉杂交育种工作前功尽弃。因此如何做好菠萝种子整个环节的育苗工作，防控病害是提高育种工作和效率的关键步骤。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种综合防控菠萝杂交种苗苗期病害的繁育方法，通过注意前期种子获取，种子培育消毒、幼苗期病害控制等措施，从而减少和降低种苗苗期病害情况。

2、为实现上述目的，本发明提供的方案如下：

3、综合防控菠萝杂交种苗苗期病害的繁育方法，包括以下步骤：

4、(1)适时采收杂交果实与种子：授粉杂交后3～4个月果实底部表面1/3～2/3转色时安排采收，根据菠萝成熟度分批采收，以免因果实过熟腐烂造成种子滋生大量腐生菌直接影响后续种苗繁育工作。同时剔除病果、烂果，避免采收到带菌感病的种子，果实去皮后使用一体两用叉勺安全无损伤的挖取果目中的种子，尽可能减少种子机械损伤可以防止种子催芽过程中因划伤伤口变质导致感染发霉。

5、(2)洗净分拣种子：对采收到的新鲜种子及时清洗处理，以免因清洗不及时种子发酸发臭滋生大量腐生菌直接影响后续种苗繁育工作。先用清水冲洗、漂净果肉和空瘪种子，沥水后再使用干毛巾包裹种子反复轻揉将种皮上附着的透明种衣彻底擦拭干净，再次仔细挑拣去除掉空瘪、机械损伤的种子，过水、沥水后备用；

6、(3)浸种杀菌：将洗净的种子放入杀菌液中浸种消毒，消毒完成，冲洗干净，备用；

7、(4)繁育环境保持无菌操作：人工气候箱的培养环境设置为光照强度5000lx、温度27℃、湿度80％，14小时光培养和10小时暗培养，气候箱内外不定期擦拭75％酒精进行消毒处理，种苗繁育过程需规范使用超净工作台，使用前超净台需提前20～30分钟开启紫外灯进行消杀，消杀结束再喷洒75％酒精擦拭台面，开启风机，使用过程中超净台、器皿全程注意消杀保持洁净；

8、(5)选择透气保水繁育基质进行催芽育苗：将透气保水海绵平铺于培养皿a中，添加无菌水，将处理好的菠萝种子平铺于吸水海绵上，放置于人工气候箱进行催芽，注意补充无菌水；在催芽5天后每天留心观察种子萌发状况；将破口萌发的种子及时挑拣出来放入新的海绵培养皿b中；此后视海绵干湿状况每15-20天补充一次无菌水；

9、(6)防控幼苗病害：在人工气候箱开展种苗繁育，对于发现感染心腐病、黑腐病的幼苗及时使用镊子剔除干净，对同一培养皿中未感病的幼苗采用70％代森锰锌可湿性粉剂800倍药液滴施灌芯进行防控，间隔10～15天再重复施药一次；使用过的镊子及时消毒；

10、(7)及时剔除畸形苗：畸形苗不能正常生长发育且极易早夭霉烂，使用镊子剔除干净，在原畸形幼苗发霉区域添加杀菌液杀菌处理，视幼苗生长健康状况酌情加入杀菌液进行养护，使用过的镊子及时消毒；

11、(8)适时移栽穴盘：待幼苗苗龄超过40天且植株生长5～7张成熟叶片则进行移栽，使用剪刀将幼苗连同植株基部的海绵一起剪裁成一株一株海绵护根苗，随后定植于装满营养土的穴盘中，之后注意缓慢淋足定根水以穴盘底部稍微渗水为宜，最后放置于苗床上进行日常养护。

12、作为方案的优选，所述的一体两用叉勺细长且圆润的3叉齿钝尖设计，尖而不利，避免采收种子时造成机械损伤，叉勺长15.8cm、宽2.1cm尺寸方便手动挖取果目腔室内的种子。

13、作为方案的优选，所述步骤(3)杀菌液浸种16～20小时。

14、作为方案的优选，所述步骤(5)采用透气保水海绵平铺于培养皿a中，边往培养皿添加无菌水边使用洁净的不锈钢普通餐勺挤压海绵使之均衡、充分吸纳水分，可以为种子萌发、种苗着床生长提供良好的生长发育微环境与空间。再将洗净、消毒好的菠萝种子均匀平铺于吸水海绵上，盖好培养皿并进行标注，放置于人工气候箱进行催芽，此后视海绵干湿情况7～10天适时添加无菌水，同时在催芽5天以后需每天留心观察种子萌发状况；将破口萌发的种子及时挑拣出来放入新的海绵培养皿b中，与未萌发的种子分开培养进行育苗，以防萌发种苗根系缠绕、覆盖并妨碍未萌芽种子发育。

15、作为方案的优选，所述步骤(5)中还在海绵培养皿b补充无菌水的同时添加1ml～2ml改良型霍格兰氏营养液1次，所述改良型霍格兰氏营养液成分为：ca(no3)2.4h2o 900-950mg/l、kno3 500-520mg/l、nh4no3 80-85mg/l、kh2po4 130-140mg/l、mgso4 240-245mg/l、fenaedta 36-37mg/l、ki 0.8-1.0mg/l、h3bo3 6.0-6.5mg/l、mnso4.h2o 16.5-17.0mg/l、znso4.7h2o 8.5-9.0mg/l、na2moo4.2h2o 0.25mg/l、cuso4.5h2o 0.025-0.030mg/l、cocl2.6h2o 0.025-0.030mg/l，ph＝5.8；使用时取改良型霍格兰氏营养液用蒸馏水稀释100倍使用。

16、作为方案的优选，所述步骤(6)和(7)中使用过的镊子避免接触到繁育基质和其他健康幼苗，从而造成新的感染，镊子每次使用后采用酒精灯灼烧彻底消毒。

17、作为方案的优选，所述步骤(7)中，在原畸形幼苗发霉区域添加2-3ml杀菌液处理，视幼苗生长健康状况酌情加入1-2ml杀菌液进行养护。

18、作为方案的优选，本发明采用的杀菌液为50％多菌灵可湿性粉剂的500倍液或者70％甲基托布津500倍液，杀菌液注意轮换用药。

19、本发明中采用的海绵为白色5mm高密度海绵。

20、本发明具有以下有益效果：

21、1、通过本发明的综合防控方法，可有效规避菠萝杂交育种风险，种苗萌发整齐、迅速，种子催芽7～25天即可萌发完毕，种子萌芽率达90％以上。

22、2、本发明培育的幼苗生长健壮，出苗率80％以上，前后繁育周期可缩短近一个月时间。

23、3、本发明方法简便，可显著提升幼苗出苗率，缩短杂交育种时间，容易获得大批量优质、健康杂交种苗，易培育出优异、创新种质。