一种闽楠组培快繁方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种闽楠组培快繁方法。
【背景技术】
[0002]闽楠Aotfraei)为樟科楠属常绿乔木，为我国特有的园林绿化树种和优良的珍贵用材树种，其木材切削面光滑美观，是建筑、家具、雕刻和精密木模等的珍贵材料。在古老的建筑中，如世界自然和文化保护遗产一一武夷山自然保护区白岩崖壁中的闽楠船棺，其建造年代距今己有3000多年，仍保存完好不朽；北京十三陵中有两人合抱的楠木柱，经久不腐，足以见得楠木的名贵和不朽的特性。但是由于自身生物学特性、人为砍伐以及自然环境等综合因素作用，致使闽楠资源接近枯竭，已成为我国II级珍稀颜危树种，现仅有福建、江西、湖南、湖北西部、浙江南部、广东北部、贵州东部和广西等省区海拔在200?100m的山地常绿阔叶林中有零星分布。闽楠种子和幼苗的存活经历较大的环境压力，在高湿度生境中的母树树冠下的种子不仅易受到土壤病原菌的感染，同样容易遭受动物所捕食，从而导致野外的闽楠种子发芽率和幼苗存活率较低。
[0003]楠木材质有香气，质地柔和，结构致密，切面光滑美丽，不变形，是高档家具家装上等珍贵材料。随着我国经济的不断发展和人们的生活水平不断提高，近年以致今后较长的时期内，中高档品质的装饰装修材料和家具的需求量将会越来越大。目前，国内市场上楠木缺口很大，供应量非常少。因此，合理地开发利用闽楠资源，必将产生良好的生态效益、经济效益和社会效益。目前，未见国外学者对闽楠进行研宄报道，国内在种子萌发、生物量等方面有一些零散的研宄，对其无性繁殖技术研宄更是鲜见报道。因此，为促进闽楠繁衍生息，建立闽楠无性繁殖体系是很有必要的，同时对于闽楠良种快繁和规模生产发展也具有重要的现实意义。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供出一种闽楠组培快繁方法，本发明以带芽茎段为外植体，经过诱导培养、继代培养、生根以及炼苗移栽等过程成功地获得了闽楠离体再生植株，建立了闽楠的离体快速繁殖技术体系，从而实现了本发明的目的。
[0005]本发明的一种闽楠组培快繁方法，包括以下的步骤:
(I)诱导培养:采集闽楠优株根部当年生幼嫩萌芽条，剪取所需要的茎段作为外植体。将外植体先用洗洁精浸泡I?3h，同时用软毛刷刷洗表面的柔毛，再用自来水冲洗3?5h，茎剪成1.0?1.5cm、带I?2个腋芽的茎段。在超净工作台上，用70%?80%乙醇溶液中消毒10?30s，再用0.1%升汞浸泡7?20min，无菌水冲洗7?8次，接种至诱导培养基中进行不定芽诱导。接种后置于每天光照10?14小时，光照强度为2000?30001χ，置于培养温度为25?28°C的条件下培养直至形成不定芽。
[0006](2)继代培养:将步骤(I)培养后长出的嫩芽从基部剪下并转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在25?28°C条件下全暗培养I?3天，然后置于每天光照11?15小时，光照强度为2000?30001x，置于培养温度为25?28°C的条件下培养，每20天继代
—次°
[0007](3)生根培养:将步骤(I)或(2)的芽苗长至1.5?2.5cm高时，切割成单芽并接种到生根培养基上进行诱导生根，接种后置于每天光照14?16小时，光照强度为3000?50001x，培养温度为25?28°C的条件下培养至生根。
[0008](4)炼苗移栽:将长至3?4cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖半打开在培养室中炼苗I?3天后，培养瓶瓶盖全打开在室外于自然光照下炼苗2?4天后将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入由泥炭土:黄泥土 = I:1混合成的基质中并移栽定植于大田中，移栽I个月内保持空气湿度80%以上。
[0009]上述步骤(I)所述的诱导培养基为:MS+2.0?8.0mg/L 6-BA+1.0?4.0mg/LNAA+15 ?30g/L 蔗糖 +3.5 ?6.0g/L 琼脂，pH 为 5.4 ?5.8。
[0010]上述步骤(2)所述的增殖培养基为:MS+0.1?1.0mg/L NAA+2.0?6.0mg/L6-BA+15 ?30g/L 蔗糖 +3.5 ?6.0g/L 琼脂，pH 为 5.4 ?5.8。
[0011]上述步骤(3)所述的生根培养基为:1/2MS+1.0?3.0mg/L IBA+1.0?2.0mg/LABTi+15 ?30g/L 蔗糖 +3.5 ?6.0g/L 琼脂，pH 为 5.4 ?5.8。
[0012]本发明的优点是:闽楠(/7Aode Aoaraei)为樟科楠属常绿乔木，为我国特有的园林绿化树种和优良的珍贵用材树种，是建筑、家具、雕刻和精密木模等的珍贵材料。由于各种原因，闽楠现已处于濒危状态，为我国II级濒危树种。为促进闽楠繁衍生息，很有必要建立闽楠的离体快速繁殖技术体系。本发明以带芽茎段为外植体，经过诱导培养、继代培养、生根以及炼苗移栽等过程成功地获得了闽楠离体再生植株，建立了闽楠的离体快速繁殖技术体系，对于闽楠良种快繁和规模生产发展具有重要的现实意义。
【具体实施方式】
[0013]以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。
[0014]实施例1
(I)诱导培养:采集闽楠优株根部当年生幼嫩萌芽条，剪取所需要的茎段作为外植体。将外植体先用洗洁精浸泡2h，同时用软毛刷刷洗表面的柔毛，再用自来水冲洗4h，茎剪成
1.0?1.5cm、带I?2个腋芽的茎段。在超净工作台上，用70%乙醇溶液中消毒10s，再用
0.1%升汞浸泡12min，无菌水冲洗7次，接种至诱导培养基中进行不定芽诱导。接种后置于每天光照13小时，光照强度为20001χ，置于培养温度为25°C的条件下培养直至形成不定芽，诱导率为67.8%，所述的诱导培养基为:MS+5.5mg/L 6-BA+l.5mg/L NAA+23g/L蔗糖+4.1g/L 琼脂，pH 为 5.6。
[0015](2)继代培养:将步骤(I)培养后长出的嫩芽从基部剪下并转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在25°C条件下全暗培养I天，然后置于每天光照13小时，光照强度为20001x,置于培养温度为25°C的条件下培养，每20天继代一次，增殖率为45%。所述的增殖培养基为:MS+0.lmg/L NAA+3.6mg/L 6_BA+26g/