一种山药虫草及其培养方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于虫草技术领域，具体涉及一种山药虫草及其培养方法。
【背景技术】
[0002] 蛹虫草为子囊菌亚门、麦角菌科、虫草属的模式种，学名为Cordyceps militaris， 又名北冬虫夏草、北虫草、虫草等，世界性分布天然资源数量很少，其药用价值与滋补功能 与冬虫夏草相似，是我国极具开发价值的药用滋补真菌，可作为冬虫夏草的替代品。中医认 为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳瘘遗精，腰膝酸痛，病后久虚， 久咳虚弱，自汗盗汗等，是唯一一种能同时平衡、调节阴阳的珍稀中药。
[0003]目前，国内外人工培养虫草的方法有以下几种：（1)采用大米、小麦等谷类农作物 与生化试剂组成的混合培养基生产虫草子实体；（2)采用桑蚕蛹、柞蚕蛹作培养载体生产 蛹虫草；（3)采用纯生化试剂组成的液体培养基生产虫草菌丝体；（4)采用农作物下脚料与 生化试剂组成的混合培养基生产虫草菌丝体。上述方法培养生产的虫草或虫草菌丝体，所 含有效成分较天然虫草缺少，药用价值与滋补作用较低。
【发明内容】
[0004] 为解决上述问题，本发明的目的在于提供一种山药虫草。
[0005] 本发明的另一目的在于提供一种山药虫草的培养方法。
[0006] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案： 一种山药虫草，以蛹虫草菌株（Cordyceps militaris)%虫1号感染山药，经人工培育 转化而成的山药与草的复合体；蛹虫草菌株泌虫1号保藏编号为CGMCC NO. 6808。
[0007] -种山药虫草的培养方法，包括以下步骤： (1) 山药虫草母种的制备： a. 分别取山药干粉15~23 g、琼脂15~23 g、葡萄糖15~23 g、硫酸镁0. 8~1. 2 g放入1000 ml蒸馏水中，加热沸腾，保持10~15 min停火，趁热装管，封口，灭菌，趁热取 出摆斜面，冷却凝固形成山药母种斜面培养基； b. 在无菌条件下，将上述的蛹虫草菌株沁虫1号(保藏编号为CGMCC NO. 6808)接种于 上述斜面培养基上，温度18~20 °C、完全黑暗的环境中培养8~10天，当菌丝发满斜面培 养基表面，即成山药虫草母种； (2) 山药虫草液体菌种制备： c. 分别取葡萄糖18~22 g、山药干粉3~5 g、蛋白胨3~5 g、磷酸二氢钾3~5 g、 硫酸镁3~5 g、维生素BI 0.01~0.03 g放入1000 ml蒸馏水中，加热沸腾，保持2~3 min停火，然后装入烧瓶中，封口，灭菌，冷却至室温，制成菌种培养液； d. 在无菌条件下在上述菌种培养液中接入步骤（1)制备的山药虫草母种，温度18~ 22 °C、自然光照环境中静止培养70~75 h，再无菌空气培养70~75 h，当小米粒状菌球 充满培养液时停止通空气，经检验无杂菌感染后即成山药虫草液体菌种； (3) 寄生载体山药的制备：将山药表面处理干净，切段扎孔，放入水与蚕蛹粉重量比为 15~25 :1的混合液中，煮沸，保持10~15 min，捞出，控去水分，装袋，封口，灭菌，即得寄 生载体山药； (4) 接种：在无菌条件下，将步骤（2)制备的山药虫草液体菌种接种到步骤（3)制备的 山药上面，接种量为山药：液体菌种=800~1000 g :200~250 ml ; (5) 染菌期培养：接种后在温度18~25 °C、空气湿度50%~55%、黑暗环境中培养10~ 12天，白色菌丝发满山药表面及内部，发菌培养结束； (6) 转色期培养：在温度20~23 °C、空气湿度60%~65%、光照180~200 Iux条件 下培养7~8天，白色菌丝转为橘黄色，转色结束； (7) 出草期培养：①从原基形成前后到草长到2 cm时，为前期培养阶段，培养条件为： 温度20~22 °C、空气湿度70%~75%、自然光照，培养时间为15~17天； ②从草长到2 cm以上直到山药虫草最后成熟为后期培养阶段，培养条件为：温度23~ 25 °C、空气湿度80%~85%、自然光照，培养时间为25~27天，当子座顶端膨大，子座色泽 变暗，并出现粉末状物时采收，即为山药虫草。
[0008] 根据上述的山药虫草的培养方法，步骤（1)所述的山药干粉的粒度为60~70目。
[0009] 根据上述的山药虫草的培养方法，步骤（3)所述的蚕蛹粉的粒度为20~50目。
[0010] 根据上述的山药虫草的培养方法，步骤（3)所述的山药切段扎孔的方法为：将山 药切成25~30 cm的段，之后用直径2 mm的铁纤扎孔，纵向并排扎行，行距为0.4~0.6 cm，孔距为2. 5~3 cm，孔深为山药直径的1/3~2/3。
[0011] 本发明具有积极有益的效果 1.本发明以蛹虫草菌株沁虫1号感染寄主山药，人工培育出了一种新式的虫草品种， 所培养出的山药虫草色泽金黄，与天然蛹虫草完全相同，且其菌核形态保持山药原状，具有 良好的观赏价值，其所食医用成分及营养成分含量高，产量品质一致性好。
[0012] 2.本发明所述的山药虫草的培育方法简单，节省劳动力成本、降低工作量，生产周 期短，平均为70~75天，山药虫草规模化生产成功率达100%，生产成本低，具有积极的经济 效益和社会效益。
[0013] 本发明所述蛹虫草（Cordyceps militaris)泌虫1号，已于2012年11月13日 保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其简称为CGMCC，地址：北京市朝 阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研宄所，该蛹虫草沁虫1号保藏编号为CGMCC NO. 6808 〇
【附图说明】
[0014] 图1为实施例1山药虫草的外形图； 图2为实施例1山药虫草的外形图； 图3为实施例1山药虫草的外形图。
【具体实施方式】
[0015] 下面结合一些具体实施例对本发明进一步说明。
[0016] 菌株的采集：2006年9月，发明人李国军于吉林省长白山哈达岭南延部野生蛹虫 草产区采集到虫草菌株，经在培养基培养出蛹虫草，经生物学特性观察、检测鉴定，无毒、含 虫草素高，确定为蛹虫草拟青霉菌株，并经多代传代培养驯化成为能感染干蚕蛹的蛹虫草 菌株沁虫1号，其保藏编号为CGMCC NO. 6808。
[0017] 实施例1 一种山药虫草，以蛹虫草菌株沁虫1号感染山药，经人工培育转化而成的山药与草的 复合体；蛹虫草菌株沁虫1号保藏编号为CGMCC NO. 6808。
[0018] 一种山药虫草的培养方法，包括以下步骤： (1) 山药虫草母种的制备： a. 分别取山药干粉（60目）15 g、琼脂15 g、葡萄糖23 g、硫酸镁0.8 g放入1000 ml 蒸馏水中，加热沸腾，保持10 min停火，趁热装入试管，封口，灭菌，趁热取出摆斜面，冷却凝 固形成山药母种斜面培养基； b. 山药虫草母种的制备：在无菌条件下，从蛹虫草菌株沁虫1号(保藏编号CGMCC NO. 6808)孕部上切取组织块，接种于该斜面培养基上，之后用棉花封口并从无菌环境中取 出，置温度20 °C、完全黑暗的环境中培养9天，当菌丝发满斜面培养基表面即成山药虫草 母种； (2) 山药虫草液体菌种制备： c. 分别取葡萄糖18 g、山药干粉4 g、蛋白胨3 g、磷酸二氢钾5 g、硫酸镁5 g、维生素 Bl 0.02 g放入1000 ml蒸馏水中，加热沸腾，保持2 min停火，然后装入1000 ml烧瓶中， 装量为700 ml，封口，灭菌，冷却至常温，制成菌种培养液； d. 在无菌条件下在菌种培养液中接入步骤（2)制备的山药虫草母种，置温度22 °C、 自然光照环境中静止培养70 h，然后再无菌空气培养75 h，当小米粒状菌球充满培养液时 停止通空气，经检验无杂菌感染后即成山药虫草液体菌种； (3) 寄生载体山药的制备：选择药用、滋补成分含量高、生长健壮、形体美观的优质山 药，将山药表面处理干净、整洁，切段扎孔，放入水与蚕蛹粉（20目）重量比为15 :1的混合液 中，煮沸保持12 min，捞出，控去水分，装袋，封口，灭菌； 切段扎孔的方法为：将山药切成28 cm的段，之后用直径2 _的铁纤扎孔，纵向并排扎 行，行距为〇? 4 cm，孔距为3 cm，孔深为山药直径的1/3 ; (4) 接种：在无菌条件下，将步骤（2)制备的山药虫草液体菌种接种到步骤（3)制备的 山药上面，接种量为山药：液体菌种=800 g :210 ml ; 上述接种方法为：在无菌环境中，用步骤（2)制备的山药液体菌种浸泡步骤（3)制备的 山药> 10 s，封口； (5) 染菌期培养：接种后在温度18 °C、空气湿度50%、黑暗环境中培养10天，白色菌丝 发满山药表面及内部，发菌培养结束； (6) 转色期培养：在温度20 °C、空气湿度60%、光照200 Iux条件下培养7天，白色菌 丝转为橘黄色，转色结束； (7) 出草期培养：①从原基形成前后到草长到2 cm时，为前期培养阶段，培养条件为： 温度22 °C、空气湿度72%、自然光照，培养时间为16天； ②从草长到2 cm以上直到山药虫草最后成熟为后期培养阶段，培养条件为：温度 24°C、空气湿度82%、自然光照，培养时间为25天，子座顶端膨大，子座色泽变暗，并出现粉 末状物时采收，即为山药虫草，外形图见图1，检测结果见表1。
[0019] 实施例2 一种山药虫草，以蛹虫草菌株沁虫1号感染山药，经人工培育转化而成的山药与草的 复合体；蛹虫草菌株沁虫1号保藏编号为CGMCC NO. 6808。
[0020] -种山药虫草的培养方法，包括以下步骤： (1) 山药虫草母种的制备： a. 分别取山药干粉（70目）20 g、琼脂20 g、葡萄糖20 g、硫酸镁I g放入1000 ml蒸 馏水中，加热沸腾，保持15 min停火，趁热装入试管，封口，灭菌，趁热取出摆斜面，冷却凝固 形