一种春笋组培繁殖的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于组织培养生产技术领域，本发明涉及一种春笋组培繁殖的方法。
【背景技术】
[0002] 春笋为多年生常绿草本植物，食用部分为初生、嫩肥、短壮的芽或鞭。竹原产中国， 类型众多，适应性强，分布极广。毛竹、早竹等散生型竹种的地下茎入土较深，竹鞭和笋芽借 土层保护，冬季不易受冻害，出笋期主要在春季。竹笋一年四季皆有，但惟有春笋、冬笋味道 最佳。烹调时无论是凉拌、煎炒还是熬汤，均鲜嫩清香，是人们喜欢的佳肴之一。
[0003] 立春后踩挖的笋，以其笋体肥大、洁白如玉、肉质鲜嫩、美味爽口被誉为"菜王"。又 被称为"山八珍"。因其种类较多，如毛竹、早竹、石竹、淡竹、刺竹、绿竹、刚竹、麻竹等，可荤 可素，做法不同，风味各异。炒、炖、煮、焖、煨等皆成佳肴，祖国各地均有很多有名的笋菜： "春笋烧謝鱼"、"春笋白拌鸡"，"南肉春笋"和"糟烩春笋"，"问政山笋"，沪菜中的"枸杞春 笋"，陕菜中的"春笋焖肉"等。
[0004] 春笋味道清淡鲜嫩，营养丰富。含有充足的水分、丰富的植物蛋白以及钙、磷、铁等 人体必需的营养成分和微量元素，特别是纤维素含量很高，常食有帮助消化、防止便秘的功 能。所以春笋是高蛋白、低脂肪、低淀粉、多粗纤维素的营养美食。
[0005] 生笋含蛋白质、氨基酸、脂肪、糖类、钙、磷、铁、胡萝卜素和维生素B1、维生素B2、 维生素C等成分。竹笋不但富含多种营养物质，而且有较高的药用价值。中医认为，竹笋味 甘、微苦，性寒，能化痰下气，清热除烦，通利二便。《名医别录》言其"主消渴，利水道，益气， 可久食"；《本草纲目拾遗》说它"利九窍，通血脉，化痰涎，消食胀"，尤独善于清化热痰。
[0006] 春笋有"利九窍、通血脉、化痰涎、消食胀"的功效，现代医学证实，吃笋有滋阴、益 血、化痰、消食、利便、明目等功效。小儿患麻瘆的时候，可喝嫩笋尖做的汤，使麻瘆出透，缩 短病期；用春笋熬粥，还对久泻形成的脱肛有很好的疗效。现代医学则认为，竹笋具有吸附 脂肪、促进食物发酵、有助消化和排泄作用，是减肥者最理想的食物之一。春笋成为人们喜 爱的食物，供不应求。春笋组培苗已经成为大宗种苗品种，但是由于生产成本在逐年的递增 人工费用，场地租金，育苗品质或培养生长周期过长等极大的阻碍种苗工厂化产业的发展， 因此开发一种新的春笋组培繁殖的技术以克服原有培养方式的缺点，确保春笋种苗产业的 进一步发展。
【发明内容】
[0007] 本发明针对上述存在的问题，本发明提供了一种春笋组培繁殖的方法，不仅能缩 短生产培养单周期和生长周期、减少生产占用面积，而且能提高育苗成活率，从而减少投资 资金，降低生产成本，提高工业化生产的利润。
[0008] 本发明的方案是通过这样实现的：
[0009] 一种春笋组培繁殖的方法，包括如下步骤：
[0010] (1)外植体的选取
[0011] 选取长为40-50cm，重量为200g以上，无病虫害的春笋为外植体；
[0012] (2)外植体的消毒处理
[0013] 将上述春笋用清水洗净后使用75%的酒精进行喷洗消毒，然后去壳，再使用75% 的酒精对春笋茎进行喷洗消毒，放入无菌超净台后再使用无菌水对春笋茎进行冲洗，然后 对距春笋茎顶部3-8cm处的笋茎进行切取，保证切取的笋茎肉薄度为l-3mm，然后使用5% 维生素C水溶液浸泡IOmin后再2%的次氯酸进行消毒3min，然后用无菌水冲洗3次；
[0014] (3)诱导愈伤组织培养
[0015] 将上述待用的外植体进行愈伤组织培养，
[0016] 所述愈伤组织培养的培养基配方为：MS+NAA(萘乙酸）0. 1~0. 2mg/L+6-BA(6-苄 基腺嗓呤）〇? 3~0? 5mg/L+BA(分裂素）0? 1~0? 2mg/L+5~8g/L琼脂+20~30g/L鹿糖， 在27~29°C下，光暗交换培养20-26天，得到愈伤组织；
[0017] ⑷分化培养
[0018] 将愈伤组织转接到分化培养基上，
[0019] 所述分化培养基的配方为：MS+NAA(萘乙酸）0. 2~0. 3mg/L+吲哚乙酸0. 3~ 0. 5mg/L+10~15g/L琼脂+30~50g/L蔗糖，在27~29°C下，光暗交换培养8-16d，愈伤组 织分化得到春笋苗；
[0020] (5)壮苗培养
[0021] 将春笋苗转接至壮苗培养基上继续培养，
[0022] 所述壮苗培养基成分为：MS+IBA(吲哚乙酸）0. 3~0. 7mg/L+BA(分裂素）0. 1~ 0? 2mg/L+NAA(萘乙酸）0? 3~0? 5mg/L+10~15g/L琼脂+30~50g/L鹿糖，在光照培养6 天，暗培养3天，交换培养18天，光照强度为2000-25001X;
[0023] (6)生根培养
[0024] 将壮苗培育后的春笋苗转接至生根培养基上培养，
[0025] 所述生根培养基配方为IBA(吲噪乙酸）2~5mg/L+NAA(萘乙酸）2~5mg/ L+2, 4-D(生长素）0? 2 ~0? 3mg/L+0. 2 ~0? 3g/L活性炭 +5 ~10g/L琼脂 +20 ~30g/L蔗 糖，光照强度为2500-45001X，在光照培养10天，暗培养8天，交换培养30天；
[0026](7)炼苗与栽培
[0027] 选取根系发达及健壮的春笋幼苗，进行炼苗培养后播种在塘泥和中沙质量比为 1:3-5的混合均匀的播种箱中进行栽培。
[0028] 本发明中，作为进一步说明，所述塘泥和中沙混合均匀后的温度为25°C~30°C， 湿度为70~80%。
[0029] 本发明中，作为进一步说明，所述塘泥和中沙混合均匀后在其之上散上一层用消 毒后的干稻草。
[0030] 本发明中，作为进一步说明，所述消毒的药品为浓度为2-3%的高锰酸钾或浓度为 25-35 %的石灰水。
[0031] 本发明的有益效果是：
[0032] 1、本发明在栽培时候，巧妙的采用塘泥配中沙的设计，使得培养基具有透气透水 的良好环境，在塘泥配中沙的基质上覆盖一层干稻草，起到保温恒温的作用，这样的设计都 能进一步提供幼苗良好的生长环境，使得幼苗快速生长，缩短生产周期，具有极大的推广价 值。
[0033] 2、本发明在壮苗培养期间，适当增加分裂素、吲哚乙酸、萘乙酸的浓度，通过实验 找到最佳的配方比（见表2)，起到能控制苗的生长长度，保证壮苗率；在生根培养基中添加 生长素，有利于根的生长，添加活性炭，有利于提高生根苗的质量，使生根苗生长健壮，根系 长，有韧性，进一步提高移栽后的成活率；在生根培养期间采用光照强度增强的方法，经过 实验发现，采用这种方法，与现有技术相比，幼苗生长时间较长、叶片有失绿情况，经过炼苗 后栽培后，要比在低光强条件下的较绿较高的幼苗移栽成活率高（见表1、3)。
【具体实施方式】
[0034] 下面通过具体实施例进一步说明本发明，以使本发明的优点和特征更易于被理 解，应该理解的是，本发明的实施例仅仅是用于本发明，而不是对本发明的限制。
[0035] 实施例1 :
[0036] 一种春笋组培繁殖的方法，包括如下步骤：
[0037] (1)外植体的选取
[0038] 选取长为40cm，重量为200g，无病虫害的春笋为外植体；
[0039] (2)外植体的消毒处理
[0040] 将上述春笋用清水洗净后使用75%的酒精进行喷洗消毒，然后去壳，再使用75% 的酒精对春笋茎进行喷洗消毒，放入无菌超净台后再使用无菌水对春笋茎进行冲洗，然后 对距春笋茎顶部3cm处的笋茎进行切取，保证切取的笋茎肉薄度为1mm，然后使用5%维生 素C水溶液浸泡IOmin后再2%的次氯酸进行消毒3min，然后用无菌水冲洗3次；
[0041] (3)诱导愈伤组织培养
[0042] 将上述待用的外植体进行愈伤组织培养，
[0043] 所述愈伤组织培养的培养基配方为：MS+NAA(萘乙酸）0.lmg/L+6-BA(6-苄基腺嘌 呤）0? 3mg/L+BA(分裂素）0?lmg/L+5g/L琼脂+20g/L蔗糖，在27°C下，光暗交换培养20天， 得到愈伤组织；
[0044] (4)分化培养
[0045] 将愈伤组织转接到分化培养基上，
[0046] 所述分化培养基的配方为：MS+NAA(萘乙酸）0. 2mg/L+吲哚乙酸0. 3mg/L+10g/L 琼脂+30g/L蔗糖，在27°C下，光暗交换培养8d，愈伤组织分化得到春笋苗；
[0047] (5)壮苗培养
[0048] 将春笋苗转接至壮苗培养基上继续培养，
[0049] 所述壮苗培养基成分为：MS+IBA(吲哚乙酸）0. 3mg/L+BA(分裂素）0.Img/ L+NAA(萘乙酸）0. 3mg/L+10g/L琼脂+30g/L蔗糖，在光照培养6天，暗培养3天，交换培养 18天，光照强度为20001x;
[0050] (6)生根培养
[0051] 将壮苗培育后的春笋苗转接至生根培养基上培养，
[0052] 所述生根培养基配方为IBA(吲哚乙酸）2mg/L+NAA(萘乙酸）2mg/L+2,4-D(生长 素）0. 2mg/L+0. 2g/L活性炭+5g/L琼脂+20g/L蔗糖，光照强度为25001x，在光照培养10 天，暗培养8天，交换培养30天；
[0053] (7)炼苗与栽培
[0054] 选取根系发达及健壮的春笋幼苗，进行炼苗培养后播种在塘泥和中沙质量比为 1:3的混合均匀的播种箱中进行栽培，在其之上散上一层用浓度为2 %的高锰酸钾消毒后 的干稻草，其中，塘泥和中沙混合均匀后的温度为25°C，湿度为70%。
[0055] 实施例2 :
[0056] -种春笋组培繁殖的方法，包括如下步骤：
[0057] (1)外植体的选取
[0058] 选取长为50cm，重量为250g，无病虫害的春笋为外植体；
[0059] (2)外植体的消毒处理
[0060] 将上述春笋用清水洗净后使用75%的酒精进行喷洗消毒，然后去壳，再使用75% 的酒精对春笋茎进行喷洗消毒，放入无菌超净台后再使用无菌水对春笋茎进行冲洗，然后 对距春笋茎顶部8cm处的笋茎进行切取，保证切取的笋茎肉薄度为3mm，然后使用5 %维生 素C水溶液浸泡IOmin后再2%的次氯酸进行消毒3min，然后用无菌水冲洗3次；
[0061] (3)诱导愈伤组织培养
[0062] 将上述待用的外植体进行愈伤组织培养，
[0063] 所述愈伤组织培养的培养基配方为：MS+NAA(萘乙酸）0.2mg/L+6-BA(6-苄基腺嘌 呤）0? 5mg/L+BA(分裂素）0? 2mg/L+8g/L琼脂+30g/L蔗糖，在29°C下，光暗交换培养26天， 得到愈