一种红掌快繁方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物组织培养方法，具体涉及一种红掌快繁方法。
【背景技术】
[0002]红掌(Anthurium adndraeanum)为天南星科花烛属多年生常绿草本植物，可作盆花和切花使用，是当今世界最受欢迎的名贵花丼之一，具有很高的观赏价值和经济价值。
[0003]红掌是重要的热带切花，佛焰花序，其佛焰花苞硕大，肥厚具蜡质，色泽有红、粉、白、绿、双色等。其色泽鲜艳，造形奇特，应用范围广，经济价值高，是目前全球发展快、需求量较大的高档热带切花和盆栽花丼。在红掌原产地热带雨林，红掌可用种子繁殖，但进入开花时间长。分株繁殖是红掌以前繁殖的主要方式。红掌植株基部长出吸芽，产生根系后可分株，每年可分3-4株，繁殖系数较低，很难满足规模化生产所需的种苗。现在红掌种苗生产主要通过组织培养进行种苗的快速繁殖，也就是红掌的克隆技术。这样可以在比较短的时间内生产整齐一致的优质种苗，供应生产的需要。通过组织培养技术生产红掌种苗主要有再生体系的建立、增殖培养、壮苗生根、移栽和温室育苗等技术环节。
[0004]目前国内外对红掌组织培养的研宄报道主要是以叶片、叶柄、茎段等器官进行愈伤组织诱导，然后再诱导愈伤组织分化不定芽，通过这种途径获得的不定芽在增殖过程中由于培养基的配方缺陷，容易出现变异，影响了种苗原有的优良遗传性状，且成苗率低。
【发明内容】
[0005]本发明针对目前的问题，提供一种红掌快繁方法。
[0006]为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是:一种红掌快繁方法，包括以下步骤:
Cl)培养基制备:选择WPM培养基作为基本培养基，6-苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2.4-D、赤霉素、激动素(KT)和3-吲哚乙酸(IAA)作为调控激素分别制备三种培养基:
愈伤诱导培养基 A:WPM+6-BA 0.2-0.4mg/L+2.4-D 0.4-0.7mg/L+ 赤霉素 2.2-2.5mg/
L，
继代培养基 B:WPM+6-BA 0.5-1.0mg/L+ KT 0.6?lmg/L，
生根培养基C:WPM +NAA0.1-0.4mg/L+IAA0.2-0.4mg/L+活性炭质量比(λ 1%?0.3%， 培养基A和B中均附加4%蔗糖和1%琼脂，培养基C附加6%蔗糖和1.5%琼脂，用
1.2-1.5mol/L 的 NaOH 和 HCl 调节 pH 值至 6.0，并将培养基 A、B 和 C 在 0.1-0.2MPa，130~135°C下灭菌 15~20min ；
(2)外植体的消毒:选用红掌刚萌发的嫩叶作为外植体，在已经消毒的超净工作台上用无菌水冲洗3~4次，后用75%酒精浸泡60s，再用有效氯浓度为l%NaC10溶液浸泡材料10?20min，最后用无菌水清洗经过消毒处理的种子4?5次；
(3)外植体的诱导:将步骤(2)消毒的红掌外植体接种在愈伤诱导培养基A上，接种瓶内每瓶放1~3个外植体；
(4)继代芽的分化:将步骤(3)中初分化完成的外植体转接入继代培养基B中；
(5)继代芽的生根:将高度为2.0cm左右、健壮的继代单芽转接入生根培养基C中。
[0007]优选地，所述的愈伤诱导培养基A:WPM+6-BA 0.3mg/L+2.4-D 0.5mg/L+赤霉素
2.4mg/Lo
[0008]优选地，所述的继代培养基B:WPM+6-BA 0.8mg/L+ KT 0.8mg/L。
[0009]优选地，所述的生根培养基C:WPM +NAA0.2mg/L+IAA0.3mg/L+活性炭质量比
0.
[0010]优选地，还包括步骤(6)炼苗及移栽:把接种瓶瓶口打开在培养室内散射光下炼苗5~7天，光照时间为12h/d，光照强度为1500~1700Lux，培养室温度为25~27°C ;之后取出瓶内的组培苗，用自来水洗净根部的琼脂，再用蒸馏水稀释成800倍的百菌清浸泡组培苗根部10~15min，移栽至以蛭石和珍珠岩为混合基质的培养皿中，将营养皿放到人工气候箱中，光照周期14h/d，光照强度为1700~1900Lux，白天25~27°C，晚上13~15°C，保持湿度50-60%,隔三天浇一次1/10~1/8 WPM母液，20~30天后移栽到大棚中。
[0011]本发明的有益效果是:本发明针对现有技术的缺点，改进了培养基配方，主要是将现有技术中的基础培养基修改为WPM，同时相应调整激素的浓度，上述改变，不仅降低了成本，最重要的是降低了变异率，提高了愈伤组织的诱导率和生根率，保证了最终的高成苗率。
【具体实施方式】
[0012]下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
[0013]本发明实施例包括:
实施例1
一种红掌快繁方法，包括以下步骤:
(1)培养基制备:选择WPM培养基作为基本培养基，6-苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2.4-D、赤霉素、激动素(KT)和3-吲哚乙酸(IAA)作为调控激素分别制备三种培养基:
愈伤诱导培养基 A:WPM+6-BA 0.2mg/L+2.4-D 0.4mg/L+ 赤霉素 2.2mg/L，
继代培养基 B:WPM+6-BA 0.5mg/L+ KT 0.6mg/L，
生根培养基C:WPM +NAA0.lmg/L+IAA0.2mg/L+活性炭质量比0.1%，
培养基A和B中均附加4%蔗糖和1%琼脂，培养基C附加6%蔗糖和1.5%琼脂，用
1.2mol/L的NaOH和HCl调节pH值至6.0，并将培养基A、B和C在0.1MPa, 130~135°C下灭菌 15min ；
(2)外植体的消毒:选用红掌刚萌发的嫩叶作为外植体，在已经消毒的超净工作台上用无菌水冲洗3次，后用75%酒精浸泡60s，再用有效氯浓度为l%NaC10溶液浸泡材料lOmin，最后用无菌水清洗经过消毒处理的种子4次；
(3)外植体的诱导:将步骤(2)消毒的红掌外植体接种在愈伤诱导培养基A上，接种瓶内每瓶放I个外植体； (4)继代芽的分化:将步骤(3)中初分化完成的外植体转接入继代培养基B中；
(5)继代芽的生根:将高度为2.0cm左右、健壮的继代单芽转接入生根培养基C中；
(6)炼苗及移栽:把接种瓶瓶口打开在培养室内散射光下炼苗5天，光照时间为12h/d，光照强度为1500LUX，培养室温度为25°C ;之后取出瓶内的组培苗，用自来水洗净根部的琼月旨，再用蒸馏水稀释成800倍的百菌清浸泡组培苗根部lOmin，移栽至以蛭石和珍珠岩为混合基质的培养皿中，将营养皿放到人工气候箱中，光照周期14h/d，光照强度为1700LUX，白天25°C，晚上1°C，保持湿度50%，隔三天浇一次1/10 WPM母液，20天后移栽到大棚中。
[0014]实施例2
红掌快繁方法，包括以下步骤:
Cl)培养基制备:选择WPM培养基作为基本培养基，6-苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2.4-D、赤霉素、激动素(KT)和3-吲哚乙酸(IAA)作为调控激素分别制备三种培养基:
愈伤诱导培养基 A:WPM+6-BA0.4mg/L+2.4-D 0.7mg/L+ 赤霉素 2.5mg/L，