曼地亚红豆杉快速繁育方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物苗木的繁育方法，具体涉及的是曼地亚红豆杉快速繁育方法。
【背景技术】
[0002] 红豆杉（Taxus chinensis)又名紫杉、赤柏松，属红豆杉科红豆杉属常绿乔木，是 第四纪冰川遗留下来的世界珍稀濒危古老树种，至今已有250万年的历史。该属植物全世 界共11种，产于北半球，我国仅有4品种及1变种。这种珍稀树种在自然条件下生长速度缓 慢，再生能力差，所以很长时间以来，世界范围内还没有形成大规摸的红豆杉原料林基地。
[0003] 曼地亚红豆杉（Taxus media)是红豆杉中的一种，1996年从加拿大引种到中国， 其树中含有二萜类化合物紫杉醇（Taxo 1，商品名pacIitaxe 1)，是对晚期卵巢癌、乳腺癌、 非小细胞肺癌等多种癌症均有显著的疗效的天然化合物之一，被誉为"晚期癌症患者的最 后一道防线"，是一种极具发展前途的新药。曼地亚红豆杉中的紫杉醇含量是所有红豆杉树 种中最高的。目前紫杉醇合法来源的原料十分短缺，全世界紫杉醇产量尚不能满足需求量 的 10% 〇
[0004] 曼地亚红豆杉生长速度快、侧根发达，是天然林保护工程、退耕还林工程等国家重 点生态建设工程首选的经济型树种之一。曼地亚红豆杉资源非常稀少，自然更新较慢。目 前在我国还没有一套高效的、科技含量高、同时又便于推广的曼地亚红豆杉繁育体系。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种取材小、繁育时间短、成活率高、成本低、容易推广的曼 地亚红豆杉快速繁育方法。
[0006] 本发明实现其目的的技术方案是：
[0007] -种曼地亚红豆杉快速繁育方法，包括以下步骤：
[0008] (1)育苗设施及育苗床的准备：搭建小拱棚，在拱棚内修砌育苗床，将河沙平铺在 育苗床上，厚度为0. 8~1. 2厘米，喷洒农药闷棚消毒。塑料小拱棚长度为5. 5~6. 5米、 宽度为2. 4~2. 8米，棚高为1. 7米；小拱棚南北向中部预留一走道，走道宽0. 4米，走道两 边为育苗床，苗床长为6米，宽I. 1米，高0. 1米。小拱棚最佳方向为南北方向，南北两端中 部各有一通风口，育苗床用砖体砌成，以便于操作和美观。
[0009] 可采用易获得、成本低的楠竹片搭建，要求楠竹片宽4厘米以上，东西向楠竹片长 5. 4米，每棚11片，用以作拱，每60厘米处搭建一片；南北向楠竹片每棚3片，长6米，用以 连接，连接时可用细铁丝捆扎；小拱棚搭建完成后，将8丝以上厚度的无滴大棚膜覆盖在小 拱棚上，要求大棚膜长9米，宽6米，东西向两边用泥土压紧，压实，南北向大棚膜各下垂1.5 米，作为通风口，可根据需要卷起或放下；建棚和覆膜完成后，将河沙（干净无污染，粗细均 可）平铺在苗床上，厚度为1厘米，并用多菌灵500倍或敌克松700倍液将沙层消毒，消毒液 用量为每棚50公斤，均匀喷洒，放下拱棚两头的大棚膜关闭小拱棚通风口 72小时后备用；
[0010] (2)配制适合曼地亚红豆杉生长的营养液一"生长剂" 1号~12号，配方如下：
[0011] "生长剂"1号：ΝΑΑ(α萘乙酸）300~360mg，6 -BA(6-苄基氨基嘌呤）0. 3~ 0· 55mg，蔗糖（C12H22O11) 2000~2250mg，蒸馏水加至1000 ml ;配制要点：先用少量的95%的 酒精溶解NAA，形成少量溶液，6 - BA用Imol ·!/的少量HCl溶解后，倒入NAA溶液，再加入 蒸馏水（配制过程中切记要先倒入溶液再加蒸馏水）；配制完毕后，用酸度计测量其pH值， 该溶液的pH值应为6. 0,若偏酸可用Imol · L-1NaOH来调节，若偏碱可用Imol · L-1HCl来调 -K- T ；
[0012] "生长剂"2号：IBA(3 -吲哚丁酸）1200~1350mg，医用滑石粉900~IlOOg;配 制要点：先用少量的95%的酒精溶解IBA，再将溶液加入医用滑石粉中，均匀混合并阴干后 即成；
[0013] "生长剂" 3号=KH2PO4 (磷酸二氢钾）300~370mg，蒸馏水加至1000 ml ;
[0014] "生长剂" 4号：NH4NO3 (硝酸铵）1100~1250mg，蒸馏水加至1000 ml ;
[0015] "生长剂" 5号：Η3Β03 (硼酸）30~40mg，蒸馏水加至1000 ml ;
[0016] "生长剂"6 号：KN03(硝酸钾）1700 ~1845mg，MgS04 ·7Η20(硫酸镁）300 ~390mg， 蒸馏水加至1000ml ;
[0017] "生长剂" 7 号：CuSO4 · 5H20 (硫酸铜）10 ~30mg，MnSO4 · 4H20 (硫酸锰）13. 5 ~ 27. 5mg，蒸馏水加至1000 ml ;
[0018] "生长剂"8号：ZnSO4 · 7H20(硫酸锌）150~225mg，蒸馏水加至1000 ml ;
[0019] "生长剂"9号：Vit. B6(盐酸吡哆辛）100~150mg，肌醇100~140mg，烟酸1~ I. 8mg，蒸馏水加至1000 ml ;
[0020] "生长剂" 10 号：CaCl2 · 2H20 (氯化钙）1400 ~1600mg，蒸馏水加至 1000 ml ;
[0021] "生长剂" 11号：FeSO4 · 7H20(硫酸铁）500~650mg，蒸馏水加至1000 ml ;
[0022] "生长剂" 12 号：Gly (甘氨酸）3 ~3. 5mg，C2H22O11 (蔗糖）2250 ~2600mg，蒸馏水 加至 1000 ml ;
[0023] (3)育苗床的湿度调节：
[0024] 打开消毒后的小拱棚，交换棚内空气，调节育苗床湿度，保持河沙含水量在40% ; 苗床含水量大于40%时增加通风时间，直到达到要求时为准，苗床含水量小于40%时对苗 床进行浇水到苗床含水量达到40 %时为准；平整沙床，要求松软透气；
[0025] (4)繁育材料的准备：
[0026] 用消毒后的剪刀将曼地亚红豆杉的枝条从母树上剪下，用杀菌剂对枝条消毒后水 洗，母树枝条的年龄及枝条剪取部位不限；
[0027] 在阴凉通风的环境下用消毒后的刀片切取水洗后的枝条，插穗切取长度为 0. 5cm-5cm，茎段切口为平口，下切口至切口以上三分之一的地方将叶片去除；
[0028] (5)接种：
[0029] 将切好的茎段的下切口在"生长剂" 1号液中迅速浸蘸1秒钟，浸蘸深度为茎段的 三分之一；然后在"生长剂"2号粉剂中速蘸1秒钟；
[0030] 将浸蘸后的茎段立即接种在已平整的育苗床上，蘸营养液的一端插入河沙中，接 种深度为茎段的三分之一，接种密度为要求叶片不重叠；
[0031] 接种完毕后，用多菌灵600倍液喷雾叶面及育苗床；
[0032] (6)接种后的管理：
[0033] 光照控制：
[0034] 在4月一 11月份接种，白天要进行遮光处理，光照较强时可用75%遮光网遮光， 必要时可用2层遮光网（接种材料上有部分叶片，适当的光照可进行光合作用，产生部分养 料）；遮光网拉在小拱棚棚顶60厘米处为宜；
[0035] 其余时间接种，可根据实际情况进行适当遮光或不遮光；
[0036] 温度控制：
[0037] 曼地亚红豆杉的插穗进入生根活动的最低温度为8°C，最适温度为12 - 24°C，超 过32°C其生根活动显著下降；在5 - 11月份，小拱棚内白天温度控制在16 - 24°C，夜间控 制在10-22°C ;在12月一次年4月份，小拱棚内白天温度控制在12°C _24°C，夜间控制在 8°C -16°C ;小拱棚内温度过高时（高于24°C )可采用背负式电动喷雾器进行间歇喷雾，每 2小时喷雾一次，并增加棚口通风时间，直到小拱棚内温度降至16-24°C之间时为止。温度 过低时（低于l〇°C )，苗床不再喷雾，尽量关闭通风口（但要注意间歇式通风），有增温条件 的可开启加温设备。
[0038] 水分管理：
[0039] 在5 - 11月份育苗，苗床湿度保持在含水量40 %，小拱棚内空气湿度保持在95 % 以上；在12月一次年4月份育苗，苗床湿度保持在含水量40%，小拱棚内空气湿度保持在 85% -95% ;在全年生产中叶面白天要求保持雾状水，夜间不要求；
[0040] 可采用背负式电动喷雾器进行间歇喷雾来控制插穗叶面水分及育苗床水分。在一 天中日照强度和温度有时变得非常高，应增加喷雾次数，以满足插穗在高温下对水分的需 求，这一方面要保证插穗在生根前不失水分，同时也要保证苗床不会因喷水次数增加而产 生积水现象；
[0041] 通风管理：
[0042] 气温过高时打开棚口，并配合喷雾降温，气温过低时关上棚口，根据实际情况间歇 式通风；通风可交换小拱棚内外空气，增加氧气及二氧化碳，有利于加强插穗的光合作用， 并可减少病虫害的发生；
[0043] 养分管理：
[0044] 育苗过程中，每天用前述配制的营养液对插穗进行喷雾，每天用一种营养液，从 "生长剂"3号至"生长剂" 12号依次轮流使用，施用时间为每天的最后一次喷雾时间，即当 天不再喷水雾之后喷营养液，喷营养液时以叶片不滴液为宜；一共进行4轮营养液喷雾，共 计40天，即从"生长剂" 3号至"生长剂" 12号每天使用一种进行喷雾，第1天用"生长剂" 3 号进行喷雾，第2天用"生长剂" 4号，依次类推，到第10天用"生长剂" 12号，此为一轮，从 第11天又用"生长剂" 3号喷雾，第12天用"生长剂" 4号，依此类推；
[0045] 病害防治：
[0046] 接种完成后每周进行一次杀菌消毒，在下午停喷水雾后喷杀菌剂，一般在下午停 喷水雾后喷1次800倍多菌灵药液，以便防止腐烂病的发生，及时清除落叶和死去的插穗；
[0047] (7)炼苗及出圃：
[0048] 前述营养液喷雾进行40天后，停止营养液喷雾，进行炼苗；本发明在5月一 11月 份育苗，