一种日本囊对虾虾苗耐氨氮性能的等级划分与优选方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及水产养殖业中一种高质量日本囊对虾的筛选方法，具体为日本囊对虾 虾苗耐氨氮性能的等级划分与优选方法，属于农业水产养殖中虾类水产生物养殖技术领 域。
【背景技术】
[0002] 日本囊又名日本对奸，俗称"竹节4下"、"花奸"等， 隶属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、对虾科，系广泛分布于我国长江口以南海域的土著种， 是我国传统海水养殖虾类品种和出口创汇的重要水产品。因其体色艳丽、肉鲜味美、营养经 济价值高，且具生长迅速、抗逆性强、适宜活虾长途干运等特点，我国自上世纪八十年代中 期开展全人工养殖以来，养殖地域逐渐拓展，产业规模不断扩大，现已与凡纳滨对虾、中国 明对虾和斑节明对虾一道成为当前我国四大主养海水虾类。据统计，2013年中国大陆地区 日本囊对虾养殖面积达1.8925万公顷，年养殖产量为4.5949万吨。
[0003] 氨氮既是评价养殖水质优劣程度的重要监测指标，也是影响进而威胁水产养殖动 物正常存活、生长和繁衍的重要无机污染物。随着集约化养殖技术的发展，特别是设施化高 密度养殖的开展，水体承载已远超过养殖水生态调节能力范围；同时，伴随养殖尾水无处理 排放、养殖池塘有机质类淤积等，致使养殖水体氮含量常处于超标状态。已有研究表明，氨 氮对日本囊对虾幼体具明显致毒作用，水环境中过高的氨氮质量浓度常会引发日本囊对虾 鳃组织排氨作用的受阻和耗氧量的增加、血淋巴蛋白和血蓝蛋白浓度显著降低、免疫活性 以及对WSSV抗病力的显著下降等一系列氨毒生理反应，且其血氨含量随氨氮攻毒时间的延 长而上升并造成爆发性死亡。因此，开展该虾仔虾耐氨氮性能的等级筛选与定向选择研究 也就显得十分必要。
[0004] 形态表型受遗传因子和环境因子的共同影响。据报道，分布于西太平洋海域的日 本囊对虾具很高的遗传多样性，可根据其头胸甲侧面斜纹的延伸特征将其分型为形态变异 I型和Π 型；微卫星标记法研究发现，取自浙江、福建、广东和海南等四个省份的6个地理居 群野生日本囊对虾均具丰富的遗传多样性，且遗传变异贡献率的93.06 %源自群体内；主布 于东海和南海北部的形态变异I型，其稚虾的耐高温性能弱于主布于南海水域的形态变异 Π 型，且在室内同池饲养条件下，形态变异I型的群体生长性能优于Π 型，但性成熟时间却 晚于Π 型;对取自福建厦门的野生群体和养成于海南而种苗源自福建厦门的人工养成群体 间形态差异进行比较研究，发现两者在形态比例特征上已出现了较大程度的偏离。无疑，日 本囊对虾群体内丰富的遗传多样性可为其表型的强环境可塑性提供证据支持，而其表型的 强环境可塑性则可为具不同抗逆性能的群体分型研究提供线索和标记，这就为从表型水平 划分日本囊对奸仔奸的抗逆等级提供了启示。
[0005] 由此证明，通过对日本囊对4下外部形态的测定和计算，建立起外形与氨氮抗性的 内外关联方法是可行并得到事实支持的。而目前，本领域还没有针对氨氮对日本囊对虾质 量好坏的影响做出过评价，更没用针对抗氨氮的日本囊对虾的筛选方法的报道。
【发明内容】
[0006] 本发明针对现有技术的空白与不足，提供一种将氨氮列为仔虾抗逆胁迫因子，并 根据氨氮耐受性能的强弱来评价日本囊对虾虾苗质量的好坏，从而获得日本囊对虾虾苗耐 氨氮性能的等级划分与优选方法：
[0007] 本发明采用的技术解决方案是:一种日本囊对虾虾苗耐氨氮性能的等级划分与优 选方法，包括以下步骤：
[0008] (1)从各日本囊对虾育苗池中每池随机抽取虾苗30尾或以上，在解剖镜下测定各 池每尾待测虾苗如下形态比例指标:注:额剑长/全长C 2;头胸甲长/全长C4;第二腹节长/全 长C6;尾节长/全长C 1();额剑长/头胸甲长(：13;眼径/头胸甲长&4;头胸甲高/头胸甲长C 15;腹 节高/第一腹节长Ci6;尾节高/尾节长Ci7;
[0009] (2)将步骤（1)测定的(^^、(^、(^、(^、(^、(^、(^和⑶对应值代入到如下计算公 式即耐氨氮选择模型中：P= ( - 374237 · 401C2+60262 · 529C4 -482 · 009C6 -5837 · 357C10+ 2728 · 598C13+161295 · 154Ci4+6521.543Ci5+575.301Ci6+7363.539Ci7 - 15438.198)/( - 373239.473C2+59971.405C4-204.015C6-5345.370Ci〇+2773.543Ci3+160584.988Ci4+ 6394.044C 15+566.017C16+7468.213Cn -15349.352);将每尾虾苗获得的P值进行平均获得 每池虾苗的平均P值；
[0010] (3)将虾苗质量划分为以100分满分的6个等级，91-100分第一等级，81-90分第二 等级，61-80分第三等级，41-60分第四等级，21-40分第五等级，0-20分第六等级；第六至一 等级依次对应的P值的区间范围为：（1.00370，1.00372]，（ 1.00372，1.00374]，（1.00374， 1.00376]，（1.00376,1.00378]，（1.00378,1.00380]，（1.00380,1.00382];将步骤（2)计算 出来的平均P值对应到上述P值区间，从而判断出每池虾苗耐氨氮能力的等级；
[0011] (4)按上述（1)至(3)步骤，抽测并计算各育苗池中的待养殖虾苗，并依计算结果， 将P值得分最高的育苗池中的虾苗判为耐氨氮能力强的优质虾苗，并要求所选优质虾苗的 耐氨氮等级达到第一或第二等级。
[0012 ]本发明步骤(1)所述的奸苗为放养前苗种，规格为5mm~20mm(仔奸的体长）。
[0013]本发明的优点和优异效果:本发明通过测定每个育苗池中30及以上尾数虾苗的如 下平均值:额剑长/全长c2;头胸甲长/全长C4;第二腹节长/全长C6;尾节长/全长C 1Q;额剑长/ 头胸甲长&3;眼径/头胸甲长C14;头胸甲高/头胸甲长C 15;腹节高/第一腹节长C16;尾节高/尾 节长C17;然后直接代入到耐氨氮选择模型为：P = ( -374237.401C2+60262.529C4 - 482.009C6-5837.357Ci〇+2728.598Ci3 + 161295.154Ci4+6521,543Ci5+575.301Ci6+ 7363.539Ci7 -15438.198)/( - 373239.473C2+59971.405C4 -204.015C6 -5345.370Ci〇+ 2773 · 543Ci3+160584 · 988Ci4+6394 · 044Ci5+566 · 017Ci6+7468 · 213Ci7-15349 · 352);然后获 得虾苗对应的P值大小，再通过将虾苗质量划分为以100分满分的6个等级，91-100分第一等 级，81-90分第二等级，61-80分第三等级，41-60分第四等级，21-40分第五等级，0-20分第六 等级；第六至一等级依次对应的P值的区间范围为：（1.00370，1.00372]，（ 1.00372， 1.00374],(1.00374,1.00376],(1.00376,1.00378],(1.00378,1.00380],(1.00380, 1.00382];进而轻松判断奸苗所属的等级，从而得到奸苗抗氨氮能力的大小，为奸苗选择具 体投放环境，如适合氨氮含量小的海洋，还是相对氨氮含量大的池塘养殖环境作出有力判 断，提高奸苗成活率和产量。
【附图说明】
[0014] 图1实验测定样本形态比例指标的主成分散布图；
[0015] 注:①+: A实验群体;②?: B实验群体;③Λ : C实验群体;④〇:D实验群体;⑤*: E实 验群体;其中，A、B、C、D实验群体分别为氨氮攻毒0-2411、24-4811、48-7211、72-9611的死亡个 体，E实验群体为氨氮攻毒96h时的存活个体。
[0016] 图2淘汰群与选留群实验样本的典型判别函数判别得分散布图；
[0017] 注：判别函数 1/判别函数2 得分P = (- 374237 · 401C2+60262 · 529C4-482 · 009C6 - 5837.357Ci〇+2728.598Ci3+161295.154Ci4+6521.543Ci5+575.301Ci6+7363.539Ci7-15438.198)/( - 373239.473C2+59971.405C4 - 204.015C6 - 5345.370Ciq+2773.543Ci3+ 160584 · 988Ci4+6394 · 044Ci5+566 · 017Ci6+7468 · 213Cn -15349 · 352)。
【具体实施方式】
[0018] 下面通过具体实施例进一步详细描述本发明，但本发明不仅仅局限于以下实施 例。
[0019] 实施例
[0020] 本发明的一种日本囊对虾虾苗耐氨氮性能的等级划分与优选方法，包括以下步 骤：
[0021] (1)从各日本囊对虾育苗池中每池随机抽取虾苗30尾或以上，在解剖镜下测定各 池每尾待测虾苗如下形态比例指标:注:额剑长/全长C 2;头胸甲长/全长C4;第二腹节长/全 长C6;尾节长/全长C 1();额剑长/头胸甲长(：13;眼径/头胸甲长&4;头胸甲高/头胸甲长C 15;腹 节高/第一腹节长Cl6 ;尾节高/尾节长Cl7 ;
[0022] (2)将步骤（1)测定的C2、C4、C6、C1Q、C 13、Cm、C15、(：16和&7对应值代入到如下计算公 式：耐氨氮选择模型为：P= ( - 374237 · 401C2+60262 · 529C4 -482 · 009C6 -5837 · 357C10+ 2728 · 598Ci3+161295 · 154Ci4+6521.543Ci5+575.301Ci6+7363.539Ci7 - 15438.198)/( - 373239.473C2+59971.405C4-204.015C6-5345.370Ci〇+2773.543Ci3+160584.988Ci4+ 6394 · 044Ci5+566 · 017Ci6+7468 · 213Cn -15349 · 352);以同一池体中的虾苗为一个群体，将 同一池体中每尾虾苗获得的P值进行加和求平均，获得每池虾苗的平均P值；
[0023] (3)将虾苗质量划分为以100分满分的6个等级，91-100分第一等级，81-90分第二 等级，61-80分第三等级，41-60分第四等级，21-40分第五等级，0-20分第六等级；第六至一 等级依次对应的P值的区间范围为：（1.00370，1.00372]，（ 1.00372，1.00374]，（1.00374， 1.00376]，（1.00376,1.00378]，（1.00378,1.00380]，（1.00380,1.00382];将步骤（2)计算 出来的平均P值对应到上述P值区间，从而判断出虾苗耐氨氮能力的等级；
[0024] (4)按上述（1)至(3)步骤，抽测并计算各育苗池中的待养殖虾苗，并