一种利用超微粉碎的沸石粉低成本生产特异性卵黄抗体剂及制备方法与流程

本发明属于生物饲料技术领域，涉及一种用于动物疾病预防和治疗的特异性卵黄抗体制剂配方及制备方法。

背景技术：

由于抗生素的使用而导致的药物残留，已成为制约我国水产产品国际市场竞争力的一个主要问题。IgY(卵黄抗体)具有无毒、无残留、不产生抗药性等优点，发展前景备受瞩目。此外IgY制备成本低、产出率高、提纯简便快捷，并具有耐热、稳定性好等优点，已经被广泛地制成产品来进行动物疾病的预防和治疗。例如用制成的IgY制剂来喂食海参，防治海参腐皮综合征等。

当前的IgY产品大都为冻干粉或片状、膏状制剂，但是冻干粉以及片状、膏状制剂的制备工艺复杂，成本较高，而且有效成分在制备提纯的过程中会有较大损失。基于以上考虑，我们直接将含特异性卵黄抗体的特异性带壳全蛋与超微粉碎的沸石粉结合，制成饲料添加剂，不但解决了有效成分损失的问题而且制备工艺大为简化，节约大量能源，生产成本大为降低。

技术实现要素：

发明人从节约成本出发，认真考虑了特性性卵黄抗体的提纯制备方法，并从中吸取宝贵的经验，利用超微粉碎的沸石粉与特异性带壳全蛋直接混合的方法，使产品不但在功能上完全满足要求，而且节省了卵黄抗体提纯过程中需要消耗的大量能量，降低了生产成本。

本发明所述的一种特异性卵黄抗体制剂，按照质量比，由下述组分组成：

所述的超微粉碎沸石粉在超微粉碎时，使用的助剂为碳酸钠或碳酸氢钠，助剂用量为1％-8％(w/w)，超微粉碎时间为3min-15min。

特异性带壳全蛋和超微粉碎沸石粉的质量配比为1:4-3:1。

所述的一种特异性卵黄抗体制剂的制备方法，包括如下步骤：(1)将沸石粉粉超微粉碎后，过60-200目筛子备用；

(2)将高免蛋清洗后，带壳打入容器中，搅拌；

(3)将特异性带壳全蛋液搅拌到体积膨胀，颜色变浅，呈浓稠状；(4)添加山梨酸钾、丙酸钙，搅拌均匀；

(5)将过筛后的沸石粉载体加入蛋黄液中，搅拌至均匀，形成软硬适中的团状固体；

(6)用制粒机制成软颗粒；

(7)室温下晾干；

(8)二次粉碎过筛；

(9)制成饲料添加剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

本发明从IgY发挥最佳效果以及节约能源降低成本的目的出发，改变了传统的制备IgY产品的方法，不再将IgY制成冻干粉或者提纯以后当做饲料添加剂加入到饲料当中。而是直接将含有富含特异性IgY的特异性带壳全蛋液与超微粉碎的沸石粉进行混合加工，这样不但减少了在分离、提纯以及冻干过程中IgY的损失，而且还简化了生产工艺，本产品很重要的一点就是，天然的沸石粉载体解决了以往卵黄抗体生产提纯过程中需要大量消耗能源的难题,极大的降低了成本。

表1 各种方法生产IgY制剂综合比较

从表1可以看出，在不考虑人工成本及设备折旧等因素的情况下，本方法前期投入的设备成本最低，单位能耗降到了原来的1/5甚至更多，节能效果显著，而且生产过程简单，生产方式灵活，制约因素较少，具有很强的实际应用价值。

附图说明

图1是低成本生产特异性卵黄抗体制剂的流程图；

图2是普通沸石粉扫描电镜照片；

图3是超微粉碎沸石粉扫描电镜照片；

图4是标准IgY曲线；

图5是不同时期IgY制剂的吸光值。

具体实施方式

以下结合技术方案详细叙述本发明的具体实施例。

实施例1

将沸石粉粗粉进行超微粉碎，超微粉碎时加入助剂，使用的助剂为碳酸钠，助剂用量为5％(w/w)，粉碎时间10min。

通过扫描电镜照片进行对比，可以发现沸石粉经过超微粉碎后，其表面孔隙更多，表面积变得更大，相应的其结合吸附能力更强。实验表明，相对于普通沸石粉，采用超微粉碎处理后的沸石粉载体吸附能力可增加30％-90％。

实施例2

将沸石粉经过超微粉碎处理后，过100目筛子，称取300g备用；将经过注射灭活黄海希瓦氏菌免疫后的高免蛋，去壳，取200g打入容器中，搅拌；将蛋黄液搅拌到体积膨胀，颜色变浅，呈浓稠状；添加0.5g山梨酸钾、1.5g丙酸钙，搅拌均匀；将过筛后的沸石粉加入到特异性带壳全蛋液中，搅拌至均匀，形成软硬度适中的团块状固体；然后用制粒机制成直径3mm软颗粒；室温下晾干；用粉碎机粉碎后过100目筛子，包装；制成饲料添加剂。

实施例3

将沸石粉经过超微粉碎处理后，过60目筛子，称取500g备用；将经过注射灭活灿烂弧菌免疫后的高免蛋，去壳，取350g打入容器中，搅拌；将带壳全蛋液搅拌到体积膨胀，颜色变浅，呈浓稠状；添加1.5g山梨酸钾、4.5g丙酸钙，搅拌均匀；将过筛后的沸石粉加入到带壳全蛋液中，搅拌至均匀，形成软硬度适中的团块状固体；然后用制粒机制成直径3mm软颗粒；室温下晾干；用粉碎机粉碎后过100目筛子，包装；制成饲料添加剂。

实施例4

IgY含量检测

称取制得的IgY制剂1g,加30ml包被液,超声波震荡15min,稀释100倍后，每孔加100ul包被96孔酶标板，4℃过夜。用洗涤液洗涤酶标板3次,每孔加100ul封闭液,37℃温育2h后甩干、洗涤3次,再向各孔加兔抗鸡IgG-HRP100ul,37℃反应lh；洗涤液洗涤各孔5次,每孔加100ul TMB底物缓冲液,室温下显色20min,每孔加50ul 2M硫酸终止反应,用酶标仪测OD_450/630nm。然后与标准IgY曲线对比，算出不同时期样品里的特异性IgY含量。

由图4可以看出，本产品在半年内特异性IgY含量并无明显降低并维持在较高的状态，说明本产品可在较长的时间内持续有效。