本发明属于水产饲料
技术领域：
，尤其是涉及一种用于提高水产动物免疫力和促生长的免疫增强剂。
背景技术：
：目前高密度的养殖模式、日益恶化的生态环境正不断威胁着水产养殖动物的健康生长，病害问题一直是制约水产养殖业健康发展的一个重要因素。大量抗生素及一些违禁药物的使用导致的细菌抗药性问题、药物残留问题等已引起了人们的广泛关注与焦虑。目前国内外治疗水产动物病害普遍采用的方法是“以防为主”，其根本目的是提高水产动物自身免疫能力。接种疫苗是水产养殖中预防疾病的有效措施，但是水产动物疫苗研究进展缓慢。适当的使用免疫增强剂可以提高机体的细胞和体液免疫，增强抗病能力。水产动物免疫增强剂的研究开发与应用成为热点。免疫增强剂是一种添加到饲料中，通过提高水产动物的免疫力，改善水产动物的营养状况，并能够显著增强其对病原微生物的抵抗力的物质。水产动物的生长发育受多种因素的影响，免疫增强剂能够通过提高水产动物的非特异性免疫功能来增强其抗应激、抗感染能力，提高其生产性能。另外，这类物质能增强水产动物抵抗外界病原体侵袭的能力，并减轻外界环境胁迫对养殖动物的免疫抑制作用。免疫增强剂具有性能稳定、作用广泛、安全高效等特点，成为目前解决水产动物病害的重要途径之一。公开号为cn1279028a中国专利申请公开了一种珠母贝饲料添加剂及其制法，该饲料添加剂配方组成包括马氏珠母贝氨基多糖、维生素c、维生素b1、维生素b6和土霉素。该组合物有助于增加珠母贝的营养，提高珠母贝免疫力的功效，用于珠母贝营养不良、体弱多病、免疫力低下。配方配比为：马氏珠母贝氨基多糖40-70％、维生素c9-14％、维生素b13-8％、维生素b63-8％、15-30％土霉素。但是，上述组合物对普通水产动物而言，提高免疫力和促生长的作用并不明显，且土霉素作为一种抗生素，长期添加到饲料里已经不被提倡，会造成抗生素残留问题。纵上所述，当前市场上对于提高水产动物免疫力和促进生长的产品有很大的需求。技术实现要素：本发明要解决的技术问题是提供一种用于提高水产动物免疫力和促生长的免疫增强剂；该免疫增强剂能提高水产动物非特异性免疫因子活性，有效激起机体的抗病毒机制，促进动物生长；并且免疫增强剂原料被吸收率高、化学稳定性好，对其它营养成分破坏较少，是一种绿色、安全的多糖类免疫增强剂，且使用简单方便。为解决上述技术问题，本发明一种用于提高水产动物免疫力和促生长的免疫增强剂，包括如下重量配比的组分：氨基多糖83-90份，氨基多糖铁10-15份，氨基多糖铜0.3-1.5份，氨基多糖锌1-3份，氨基多糖硒0.01-0.05份，氨基多糖钴0.03-0.08份。优选地，所述氨基多糖选自天然的高分子氨基多糖，分子量为1000000-2000000，脱乙酰度80％。作为技术方案的进一步改进，所述氨基多糖的制备方法如下：先将蟹壳烘干，再粉碎至60-80目后加水并搅拌，在常温下静置溶胀；然后加热至56-58℃，按投入蟹壳粉原料0.6％的重量百分比加入混合酶，混合酶由蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶组成，它们的摩尔比是蛋白酶：淀粉酶：纤维素酶＝0.8-1.2:1.8-2.2:4.5-5.5，调整ph＝6.5-7.5，搅拌酶解后滤得滤液和净蟹壳粉；将蟹壳粉加盐酸浸泡脱钙后，加氢氧化钠至中性后过滤、清洗、烘干得到甲壳素，再加入等摩尔量醋酸经68-72℃脱乙酰变性2-4小时，得到氨基多糖。作为技术方案的进一步改进，所述氨基多糖铁的制备方法如下：将氨基多糖加入到醋酸中溶解，加入柠檬酸亚铁，加至晶体不再析出为止，沉淀结晶，提纯，干燥，得到氨基多糖铁；优选地，氨基多糖和醋酸的重量比为0.8-1.2:8-12。作为技术方案的进一步改进，所述氨基多糖铜的制备方法如下：将氨基多糖加入到醋酸中溶解，加入cucl2，加至晶体不再析出为止，沉淀结晶，提纯，干燥，得到氨基多糖铜；优选地，所述氨基多糖和醋酸的重量比为0.8-1.2:8-12。作为技术方案的进一步改进，所述氨基多糖锌的制备方法如下：将氨基多糖加入到醋酸中溶解，加入znso4，加至晶体不再析出为止，沉淀结晶，提纯，干燥，得到氨基多糖锌。优选地，所述氨基多糖和醋酸之间的重量比为0.8-1.2:8-12。作为技术方案的进一步改进，所述氨基多糖硒的制备方法如下：将氨基多糖加入到醋酸中溶解，加入亚硒酸钠，加至晶体不再析出为止，沉淀结晶，提纯，干燥，得到氨基多糖硒。优选地，所述氨基多糖和醋酸之间的重量比为0.8-1.2:8-12。作为技术方案的进一步改进，所述氨基多糖钴的制备方法如下：将氨基多糖加入到醋酸中溶解，加入cocl2，加至晶体不再析出为止，沉淀结晶，提纯，干燥，形成氨基多糖钴。优选地，所述氨基多糖和醋酸之间的重量比为0.8-1.2:8-12。本发明的上述原料直接混合后，即可作为水产动物的免疫增强剂。本发明所记载的任何范围包括端值以及端值之间的任何数值以及端值或者端值之间的任意数值所构成的任意子范围。如无特殊说明，本发明中的各原料均可通过市售购买获得，本发明中所用的设备可采用所属领域中的常规设备或参照所属领域的现有技术进行。与现有技术相比较，本发明具有如下有益效果：1.本发明免疫增强剂选取的氨基多糖是从蟹壳中提取的一种氨基多糖，它是生物基的天然高分子，分子量为1000000-2000000，脱乙酰度高达80％，具有优良的生物兼容性，可生物降解，降解产物安全无毒，且具有抗氧化、抗毒、抗菌等特性。2.微量元素在水产动物中应用广泛，可以影响水生动物的免疫功能，促进动物生长，微量元素缺乏会使水生动物疾病抵抗力降低，免疫活性细胞功能受损，并可使机体免疫后产生的特异性抗体水平下降，从而使水生动物免疫能力降低，而适度补充微量元素则可提高水生动物的免疫功能。虽然动物饲料中已添加某些微量元素，但尚存在一定的弊端：无机盐微量元素易氧化、稳定性差、吸收率低、营养性差，而且某些微量元素如硫酸亚铁、硫酸铜、亚硒酸钠等在使用过程中搅拌不均或过量会引起水产动物中毒，导致动物生长受阻，甚至死亡。本发明创造性的将微量元素与有机主原料氨基多糖相结合，形成有机氨基多糖盐，使得氨基多糖和含有微量元素的氨基多糖盐可有机配合，且不会增加副作用离子。可提高水产动物非特异性免疫因子活性，有效激起机体的抗病毒机制，促进动物生长。3.本发明免疫增强剂产品吸收率高、化学稳定性好，对其它营养成分破坏较少，是一种绿色、安全的多糖类免疫增强剂，且使用简单方便。具体实施方式为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。本申请实施例中使用的氨基多糖的制备方法如下：先将蟹壳烘干，再粉碎至60-80目后加水并搅拌，在常温下静置溶胀；然后加热至56-58℃，按投入蟹壳粉原料0.6％的重量百分比加入混合酶，混合酶由蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶组成，它们的摩尔比是蛋白酶：淀粉酶：纤维素酶＝0.8-1.2:1.8-2.2:4.5-5.5，调整ph＝6.5-7.5，搅拌酶解后滤得滤液和净蟹壳粉；将蟹壳粉加盐酸浸泡脱钙后，加氢氧化钠至中性后过滤、清洗、烘干得到甲壳素，再加入等摩尔量醋酸经70℃脱乙酰变性2-4小时，得到氨基多糖。制得的氨基多糖是天然的高分子氨基多糖，分子量为1000000-2000000，脱乙酰度80％。实施例1用于提高水产动物免疫力和促生长的免疫增强剂组合物，包括如下重量配比的组分：将分子量为1200000，脱乙酰度为80％的氨基多糖83.4g，氨基多糖铁13g，氨基多糖铜1g，氨基多糖锌2.5g，氨基多糖硒0.05g，氨基多糖钴0.05g。将上述原料混合均匀制成一种提高水产动物免疫力和促进动物生长的免疫增强剂组合物。所述氨基多糖铁的来源是：将氨基多糖10g加入到醋酸100g中溶解，加入柠檬酸亚铁，加至晶体不再析出为止，沉淀结晶，提纯，干燥，得到氨基多糖铁。所述氨基多糖铜的来源是：将氨基多糖10g加入到醋酸100g中溶解，加入cucl2，加至晶体不再析出为止，沉淀结晶，提纯，干燥，得到氨基多糖铜。所述氨基多糖锌的来源是：将氨基多糖10g加入到醋酸100g中溶解，加入znso4，加至晶体不再析出为止，沉淀结晶，提纯，干燥，得到氨基多糖锌。所述氨基多糖硒的来源是：将氨基多糖10g加入到醋酸100g中溶解，加入亚硒酸钠，加至晶体不再析出为止，沉淀结晶，提纯，干燥，得到氨基多糖硒。所述氨基多糖钴的来源是：将氨基多糖10g加入到醋酸100g中溶解，加入cocl2，加至晶体不再析出为止，沉淀结晶，提纯，干燥，形成氨基多糖钴。取水产饲料100kg(选自广东海大集团南美白对虾饲料2号料)，将上述制得的免疫增强剂组合物500g喷洒于饲料上，喷洒均匀后，晾干后即可制得饵料1-1。实施例2重复实施例1，不同之处仅在于，免疫增强剂组合物，包括如下重量配比的组分：将分子量为1500000，脱乙酰度为80％的氨基多糖87.42g，氨基多糖铁10g，氨基多糖铜0.5g，氨基多糖锌2g，氨基多糖硒0.05g，氨基多糖钴0.03g。取水产饲料100kg(选自扬州宏大饲料32蛋白幼蟹料)，将上述制得的免疫增强剂组合物500g喷洒于饲料上，喷洒均匀后，晾干后即可制得饵料1-2。实施例3重复实施例1，不同之处仅在于，免疫增强剂组合物，包括如下重量配比的组分将分子量为1800000，脱乙酰度为80％的氨基多糖85.4g，氨基多糖铁10g，氨基多糖铜1.5g，氨基多糖锌3g，氨基多糖硒0.05g，氨基多糖钴0.05g。取水产饲料100kg(选自大连日昇海参饲料幼参料)，将上述制得的免疫增强剂组合物500g喷洒于饲料上，喷洒均匀后，晾干后即可制得饵料1-3。实施例4重复实施例1，不同之处仅在于，免疫增强剂组合物，包括如下重量配比的组分将分子量为1600000，脱乙酰度为80％的氨基多糖84.41g，氨基多糖铁12.5g，氨基多糖铜0.5g，氨基多糖锌2.5g，氨基多糖硒0.03g，氨基多糖钴0.06g。取水产饲料100kg(选自广东海大集团南美白对虾饲料2号料)，将上述制得的免疫增强剂组合物500g喷洒于饲料上，喷洒均匀后，晾干后即可制得饵料1-4。对比例1重复实施例1，不同之处仅在于，免疫增强剂组合物，包括如下重量配比的组分：将分子量为1200000，脱乙酰度为80％的氨基多糖100g。(本对比例中只包括氨基多糖，不含有氨基多糖盐，总量100份)。取水产饲料100kg(选自广东海大集团南美白对虾饲料2号料)，将上述制得的免疫增强剂溶液500g喷洒于水产饲料上，喷洒均匀后，晾干后即可制得饵料2-1。对比例2重复实施例2，不同之处仅在于，免疫增强剂组合物，包括如下重量配比的组分：将分子量为1500000，脱乙酰度为80％的氨基多糖100g。(本对比例中只包括氨基多糖，不含有氨基多糖盐，总量100份)。取水产饲料100kg(选自扬州宏大饲料32蛋白幼蟹料)，将上述制得的免疫增强剂溶液500g喷洒于水产饲料上，喷洒均匀后，晾干后即可制得饵料2-2。对比例3重复实施例3，不同之处仅在于，免疫增强剂组合物，包括如下重量配比的组分：将分子量为1800000，脱乙酰度为80％的氨基多糖100g。(对比例中只包括氨基多糖，不含有氨基多糖盐，总量100份)。取水产饲料100kg(选自大连日昇海参饲料幼参料)，将上述制得的免疫增强剂溶液500g喷洒于水产饲料上，喷洒均匀后，晾干后即可制得饵料2-3。对比例4重复实施例4，不同之处仅在于，免疫增强剂组合物，包括如下重量配比的组分：将分子量为1600000，脱乙酰度为80％的氨基多糖100g。(对比例中只包括氨基多糖，不含有氨基多糖盐，总量100份)。取水产饲料100kg(选自广东海大集团南美白对虾饲料2号料)，将上述制得的免疫增强剂溶液500g喷洒于水产饲料上，喷洒均匀后，晾干后即可制得饵料2-4。对比例5根据中国专利申请cn1279028a的一个实施例制得如下免疫增强剂剂：包括马氏珠母贝氨基多糖70份、维生素c8份、维生素b13份、维生素b63份和土霉素16份，将上述原料混合加入200份水中，得免疫增强剂溶液。取水产饲料100kg(对虾饲料选自广东海大集团南美白对虾饲料2号料，海参饲料选自大连日昇海参饲料幼参料，河蟹饲料选自扬州宏大饲料32蛋白幼蟹料)，将上述制得的免疫增强剂溶液500g喷洒于水产饲料上，喷洒均匀后，晾干后即可制得饵料3-1(对虾)、饵料3-2(河蟹)、饵料3-3(海参)。实验报告：1、天津汉沽对虾养殖池1)对虾养殖塘，设置四个池:空白对照组、对照虾池a、对照虾池b、本发明虾池。空白对照组使用水产饲料直接投喂；对照虾池a使用对比例1饵料2-1进行投喂；对照虾池b使用对比例5饵料3-1(对虾)进行投喂；本发明虾池使用是实施例1制成的饵料1-1进行投喂。2)投喂方式：用相应饵料投喂，早晚各一次，每日按体重的3％进行投喂。3)结果：e-1.空白对照组:投喂15天平均增重率为90.2％，成活率80.2％；投喂30天平均增重率260.8％，成活率79.5％。e-2.对照虾池a:饵料2-1投喂对照虾池a，投喂15天平均增重率为95.5％，成活率82.9％；投喂30天平均增重率286.1％，成活率82.3％。e-3.对照虾池b:饵料3-1投喂对照虾池b，投喂15天平均增重率为94.4％，成活率84.1％；投喂30天平均增重率270.5％，成活率83.6％。e-4.本发明虾池:饵料1-1投喂本发明虾池，投喂15天平均增重率为141.2％，成活率94.3％；投喂30天平均增重率320.1％，成活率93.6％。本发明虾池对虾生长状态明显优于对照池。提取各池对虾的血清，测定酚氧化酶活力、溶菌酶活力、酸性磷酸酶活力等免疫指标，投喂了添加饵料1-1的虾池，其酶活力明显优于对照组。各组酚氧化酶活力(单位：u/mg)各组溶菌酶活力(单位：u/ml)第7天第15天第21天第30天空白对照组0.19570.20670.21090.2160对照虾池a0.20690.21380.21340.2174对照虾池b0.20550.20680.21770.2157本发明虾池0.24440.30580.28760.2798各组酸性磷酸酶活力(单位：金氏单位)第7天第15天第21天第30天空白对照组4.09664.19544.15764.1238对照虾池a4.26384.24504.38064.3109对照虾池b4.20544.25784.44474.4525本发明虾池5.16127.10448.18868.81252、江苏兴化河蟹养殖塘设置四个池:空白对照组、对照河蟹池a、对照河蟹池b、本发明河蟹池。空白对照组使用水产饲料直接投喂河蟹；对照河蟹池a使用对比例2饵料2-2进行投喂；对照河蟹池b使用对比例5饵料3-2(河蟹)进行投喂；本发明河蟹池使用是实施例2制成的饵料1-2进行投喂。2)投喂方式：用相应饵料投喂，晚上投喂一次，每日按体重的3％进行投喂。3)结果：e-1.空白对照组:河蟹亩产量80kg。e-2.对照河蟹池a:河蟹亩产量87kg。e-3.对照河蟹池b:河蟹亩产量81kg。e-4.本发明河蟹池:河蟹亩产量94kg。本发明河蟹池在养殖后期，生长速度明显优于其它各池，且蟹黄和蟹膏占身体的比重高于对照组，很大程度的提升了河蟹品质。测定河蟹肝胰腺的超氧化物歧化酶活力、酸性磷酸酶活力、碱性磷酸酶活力等免疫指标，投喂了添加饵料1-2的河蟹，其酶活力明显高于其它对照组。各组超氧化物歧化酶活力(单位：u/ml)第7天第15天第21天第30天空白对照组120.7218127.3123130.0309122.1055对照河蟹池a122.3467128.1256133.2576129.0647对照河蟹池b125.0139126.1368138.2892129.2450本发明河蟹池140.5145180.9774200.8860190.9967各组酸性磷酸酶活力(单位：金氏单位)第7天第15天第21天第30天空白对照组80.655782.235685.225688.1460对照河蟹池a81.206983.463886.236489.2344对照河蟹池b83.750582.285887.286788.1647本发明河蟹池90.5478110.2389120.3568118.2995各组碱性磷酸酶活力(单位：金氏单位)第7天第15天第21天第30天空白对照组120.6744122.2467125.2468128.0886对照河蟹池a122.2769124.5738127.2754130.3554对照河蟹池b123.6435122.6548128.7667129.7447本发明河蟹池151.6338177.0859203.7407188.47893、山东蓬莱海参养殖池1)设置四个池:空白对照组、对照海参池a、对照海参池b、本发明海参池。空白对照组使用水产饲料直接投喂海参；对照海参池a使用对比例3饵料2-3进行投喂；对照海参池b使用对比例5饵料3-3(海参)进行投喂；本发明海参池使用是实施例3制成的饵料1-3进行投喂。2)投喂方式：用相应饵料投喂，晚上投喂一次，每日按体重的3％进行投喂。3)结果：e-1.空白对照组:海参亩产量60kg。e-2.对照海参池a:海参亩产量67kg。e-3.对照海参池b:海参亩产量68kg。e-4.本发明海参池:海参亩产量110kg。此外，添加本制剂的海参体腔液中酸性磷酸酶活力、碱性磷酸酶活力、超氧化物歧化酶活力等免疫指标明显高于其它海参对照池。各组酸性磷酸酶活力(单位：金氏单位)第7天第15天第21天第30天空白对照组0.55570.56560.57610.5770对照海参池a0.55790.56380.58640.5898对照海参池b0.55950.56580.57970.5697本发明海参池0.62380.80990.90680.8472各组碱性磷酸酶活力(单位：金氏单位)第7天第15天第21天第30天空白对照组0.97440.99050.97630.9845对照海参池a0.98540.99760.98970.9975对照海参池b0.97860.98850.97960.9965本发明海参池1.13381.20781.23071.2489各组超氧化物歧化酶活力(单位：u/ml)第7天第15天第21天第30天空白对照组49.646848.744349.643949.8543对照海参池a50.966750.185649.966649.9767对照海参池b50.643949.854848.754249.8540本发明海参池55.784558.854459.844060.86574、广东湛江对虾养殖池1)对虾养殖塘，设置四个池:空白对照组、对照虾池a、对照虾池b、本发明虾池。空白对照组使用水产饲料直接投喂；对照虾池a使用对比例4饵料2-4进行投喂；对照虾池b使用对比例5饵料3-1(对虾)进行投喂；本发明虾池使用是实施例4制成的饵料1-4进行投喂。2)投喂方式：用相应饵料投喂，早晚各一次，每日按体重的3％进行投喂。3)结果：e-1.空白对照组:投喂15天平均增重率为93.8％，成活率82.6％；投喂30天平均增重率274.5％，成活率80.5％。e-2.对照虾池a:饵料2-4投喂对照虾池a，投喂15天平均增重率为100.7％，成活率82.9％；投喂30天平均增重率296.4％，成活率82.1％。e-3.对照虾池b:饵料3-1投喂对照虾池b，投喂15天平均增重率为99.9％，成活率83.1％；投喂30天平均增重率290.5％，成活率80.2％。e-4.本发明虾池:饵料1-4投喂本发明虾池，投喂15天平均增重率为152.8％，成活率93.9％；投喂30天平均增重率345.8％，成活率92.8％。提取各池对虾的血清，测定酚氧化酶活力、酸性磷酸酶活力、超氧化物歧化酶活力等免疫指标，投喂了添加本制剂的虾池，其酶活力明显优于其它对照池。各组酚氧化酶活力(单位：u/mg)第7天第15天第21天第30天空白对照组1.76431.77231.78031.7855对照虾池a1.77671.78061.79381.7947对照虾池b1.79091.80781.78721.7860本发明虾池2.57662.79742.89702.9955各组酸性磷酸酶活力(单位：金氏单位)第7天第15天第21天第30天空白对照组4.09994.19754.15464.1638对照虾池a4.16384.24544.38744.2144对照虾池b4.16544.27544.24544.1525本发明虾池5.16128.10446.18864.8125各组超氧化物歧化酶活力(单位：u/ml)第7天第15天第21天第30天空白对照组84.674387.750086.987687.4571对照虾池a86.865488.754389.865888.8764对照虾池b85.754389.876388.542289.8900本发明虾池95.1652110.1865120.1324124.7555综上所述：本发明提供的免疫增强剂可有效提高了水产动物免疫力，使养殖动物在各种条件变化时应激反应不明显，并能促进水产动物健康生长，提高了水产动物的成活率，并且无副作用，生产工艺简单，对人们的身体不产生任何影响，具有很广阔的市场前景。显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。当前第1页12