本发明属于饲料添加剂技术领域，具体涉及一种防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂、制备方法及其应用。
背景技术：
我国是世界水产养殖大国，且淡水产品产量世界第一。2005年全国水产品总产量5107.6万吨，水产品产值4016.1亿元，水产品养殖量达到3395万吨，占到水产品总产量的66.48％。随着我国淡水鱼纷纷走出国门，开拓海外市场，淡水养殖的发展空间更加广阔，水产品养殖的比重还将进一步提高，水产品养殖将成为水产品数量的增长的主要动力。根据FAO的预测，2030年中国水产品产量将达到7611.5万吨，较2005年产量还有49.02％的增长空间。我国是唯一一个水产养殖超过捕捞量的国家。虹鳟原产于美国阿拉斯加地区的山川溪流中。虹鳟系冷水性凶猛鱼类，喜栖息于水质清澈、溶氧丰富的山川溪流中，以水生昆虫及幼虫、甲壳类、小鱼虾、蝌蚪和掉入水中的陆生昆虫为食，在人工养殖条件下也能很好地摄食人工配给的颗粒饲料。虹鳟是名贵水产品，肉质肥厚、细嫩、刺少、味鲜、蛋白质、脂肪含量高，富含健脑物质(20碳5烯酸)。易于加工，是国际市场上畅销的名贵鱼食品。因此，虹鳟鱼的市场价值很大。
根据相关部门的统计表明，对我国养殖水产品造成侵害的病害种类已经在200种以上了，其中具有几十种的常见病，病毒、细菌、寄生虫和真菌是水产品病害常见的病原。在2006年，病毒性疾病占生物源性疾病的11.02％、细菌性疾病占生物源性疾病的57.63％、而真菌性疾病占生物源性疾病的4.24％、寄生虫性疾病占生物源性疾病的24.58％。在云南省曲靖市会泽县水产站虹鳟养殖基地，分析检测出水质中存在维氏气单胞菌属、枸橼酸杆菌属、温和气单胞菌等有害微生物，造成虹鳟养殖过程中出现大量死亡，造成巨大的经济损失。
抗生素的长期过量使用，已经导致许多病原生物对几乎所有的抗生素药物都具有不同程度的耐药性，是目前影响我国畜牧、水产养殖业可持续发展乃至人类健康的重大科技问题。抗菌肽是一类生物体中普遍存在并具有广谱抗微生物活性的小分子多肽，已证实是天然免疫系统的重要组成部分，在防御病原微生物中起着重要作用，被科学家誉为“天然抗生素”。抗菌肽具有多重生物学功能，除了广谱抗细菌外，还具有抗病毒、真菌和寄生虫等活性，以及具有抗肿瘤、中和毒素和免疫调节、促进血管生成和创伤修复等生物学功能，因而又被称为“抗微生物肽”。抗菌肽作为一类抗菌能力强、抗菌谱广、种类多、可供选择范围广、靶菌株不易产生抗性突变的功能多肽，在虹鳟鱼养殖产业将有着广阔的应用前景。
技术实现要素：
本发明的目的是一种防治疾病和促进生长的虹鳟鱼饲料添加剂，显著促进虹鳟鱼健康生长发育，有效提高机体免疫功能，预防和控制细菌性疾病感染，且无毒副作用。
本发明的第二个目的是提供一种防治疾病和促进生长的虹鳟鱼饲料添加剂的制备方法。
本发明的第三个目的是提供一种防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂的应用。
为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种防治疾病和促进生长的虹鳟鱼饲料添加剂，采用枯草芽孢杆菌发酵液制备得到。
进一步地，所述发酵液的制备方法如下：将枯草芽孢杆菌(GBacillus-9，菌种保藏编号CGMCC13337)接种到培养基中，37℃发酵12-18小时，得到所述发酵液，其中，培养基成分为：每1L培养基中，含氯化钠10克、蛋白胨10克、酵母提取物5克，pH为7.0。
一种防治疾病和促进生长的虹鳟鱼饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：
1)将枯草芽孢杆菌接种到培养基中，37℃发酵12-18小时，得到所述发酵液，其中，培养基成分为：每1L培养基中，含氯化钠10克、蛋白胨10克、酵母提取物5克，pH为7.0。
2)将步骤1)所得的发酵液与淀粉，室温下搅拌混合均匀。
3)将步骤2)所得混合液，进行喷雾干燥。
进一步地，发酵液与淀粉质量比为4:1-8:1。
进一步地，步骤3)中所述的喷雾干燥入口温度为170-200℃，出口温度为90-120℃。
一种饲料添加剂在制备防治疾病和促进生长的虹鳟鱼饲料中的应用，在饲料中的质量添加比例为0.5％-2.0％。
本发明的有益效果在于：本发明的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂中，枯草芽孢杆菌发酵液对水产中的维氏气单胞菌属、枸橼酸杆菌属、温和气单胞菌等有害微生物有很强的抑制作用，有效预防水产动物肠炎，烂鳃等疾病。此外，该发酵液能提高虹鳟鱼的消化功能，从而有效促进生长。本发明的防治虹鳟鱼细菌性疾病的饲料添加剂的制备方法，采用淀粉喷雾干燥，制备简单，生物利用度高，无药物残留，无毒副作用，对水体环境无污染，使用方便，安全可靠。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步说明
实施例1
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂，饲料添加剂由以下成分组成：枯草芽孢杆菌发酵液，淀粉。
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：
1)枯草芽孢杆菌的发酵，发酵液成分为：每1L培养基中，含氯化钠10克、蛋白胨10克、酵母提取物5克，发酵pH为7.0，发酵温度为37℃，发酵时间12小时。
2)将步骤1)所得的发酵液与淀粉，以质量比为8:1在室温下进行搅拌混匀。
3)将步骤2)所得混合液，进行喷雾干燥。喷雾干燥入口温度为170℃，出口温度为120℃。
本实施例的的饲料添加剂在制备防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料中的应用，所述饲料添加剂在饲料中的质量添加比例为0.5％。
实施例2
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂，饲料添加剂由以下成分组成：枯草芽孢杆菌发酵液，淀粉。
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：
1)枯草芽孢杆菌的发酵，发酵液成分为：每1L培养基中，含氯化钠10克、蛋白胨10克、酵母提取物5克，发酵pH为7.0，发酵温度为37℃，发酵时间18小时。
2)将步骤1)所得的发酵液与淀粉，以质量比为4:1在室温下进行搅拌混匀。
3)将步骤2)所得混合液，进行喷雾干燥。喷雾干燥入口温度为200℃，出口温度为90℃。
本实施例的的饲料添加剂在制备治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料中的应用，所述饲料添加剂在饲料中的质量添加比例为1.0％。
实施例3
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂，饲料添加剂由以下成分组成：枯草芽孢杆菌发酵液，淀粉。
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：
1)枯草芽孢杆菌的发酵，发酵液成分为：每1L培养基中，含氯化钠10克、蛋白胨10克、酵母提取物5克，发酵pH为7.0，发酵温度为37℃，发酵时间12小时。
2)将步骤1)所得的发酵液与淀粉，以质量比为5:1在室温下进行搅拌混匀。
3)将步骤2)所得混合液，进行喷雾干燥。喷雾干燥入口温度为170℃，出口温度为90℃。
本实施例的的饲料添加剂在制备治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料中的应用，所述饲料添加剂在饲料中的质量添加比例为2.0％。
实施例4
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂，饲料添加剂由以下成分组成：枯草芽孢杆菌发酵液，淀粉。
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：
1)枯草芽孢杆菌的发酵，发酵液成分为：每1L培养基中，含氯化钠10克、蛋白胨10克、酵母提取物5克，发酵pH为7.0，发酵温度为37℃，发酵时间18小时。
2)将步骤1)所得的发酵液与淀粉，以质量比为8:1在室温下进行搅拌混匀。
3)将步骤2)所得混合液，进行喷雾干燥。喷雾干燥入口温度为200℃，出口温度为120℃。
本实施例的的饲料添加剂在制备治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料中的应用，所述饲料添加剂在饲料中的质量添加比例为2.0％。
实施例5
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂，饲料添加剂由以下成分组成：枯草芽孢杆菌发酵液，淀粉。
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：
1)枯草芽孢杆菌的发酵，发酵液成分为：每1L培养基中，含氯化钠10克、蛋白胨10克、酵母提取物5克，发酵pH为7.0，发酵温度为37℃，发酵时间12小时。
2)将步骤1)所得的发酵液与淀粉，以质量比为4:1在室温下进行搅拌混匀。
3)将步骤2)所得混合液，进行喷雾干燥。喷雾干燥入口温度为170℃，出口温度为90℃。
本实施例的的饲料添加剂在治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料中的应用，所述饲料添加剂在饲料中的质量添加比例为0.5％。
实施例6
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂，饲料添加剂由以下成分组成：枯草芽孢杆菌发酵液，淀粉。
本实施例的防治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：
1)枯草芽孢杆菌的发酵，发酵液成分为：每1L培养基中，含氯化钠10克、蛋白胨10克、酵母提取物5克，发酵pH为7.0，发酵温度为37℃，发酵时间18小时。
2)将步骤1)所得的发酵液与淀粉，以质量比为8:1在室温下进行搅拌混匀。
3)将步骤2)所得混合液，进行喷雾干燥。喷雾干燥入口温度为200℃，出口温度为90℃。
本实施例的的饲料添加剂在制备治疾病和促进生长的虹鳟鱼的饲料中的应用，所述饲料添加剂在饲料中的质量添加比例为1.0％。
下面以感染单胞菌虹鳟病鱼为实验对象，检测实施例1～6所得的饲料添加剂的性能，具体如下：
1)供试病鱼：云南省曲靖市会泽县某虹鳟养殖基地2月龄虹鳟鱼苗，经生化检测，实验室诊断，包括筛菌，PCR扩增，DNA测序等手段已确认感染维氏气单胞菌，从病鱼中挑选3200尾，所挑选的样本个体状态差不多，分为八组，每组400尾，称量并记录初始均重。
2)使用方法：空白组使用市售饲料(通威)，按空白组方法进行每3小时喂食一次，每天喂食量为鱼体重的4％；实验例也按对照组方法进行喂食，其中实验例1是在市售饲料中按质量比例添加0.5％的实施例1制备的饲料添加剂；实验例2是在市售饲料中按质量比例添加1.0％的实施例2制备的饲料添加剂；实验例3是在市售饲料中按质量比例添加2.0％的实施例3制备的饲料添加剂；实验例4是在市售饲料中按质量比例添加2.0％的实施例4制备的饲料添加剂；实验例5是在市售饲料中按质量比例添加0.5％的实施例5制备的饲料添加剂；实验例6是在市售饲料中按质量比例添加1.0％的实施例6制备的饲料添加剂；
3)试验时间：2个月。
试验结果如表1所示：
表1试验结果统计表
本次试验结果经统计学分析发现：
1)实验例3在治疗感染维氏气单胞菌方面效果极其显著(P<0.01),本发明的饲料添加剂对维氏气单胞菌的治愈率在79％以上。
2)实验例3中的鱼苗在喂养2个月后生长增重值为10.9克，本发明的饲料添加剂对促进虹鳟鱼的生长作用效果最为明显。
3)实验例中鱼苗恢复快，进食状态好，活跃度高。
实验例3与空白组对比，病鱼的存活率提高和生长增重最为显著，说明在实验例3中饲料添加剂制备方法和添加质量分数最为合理，能够显著防治疫病，促进生长。