本发明属于水果保鲜技术领域，具体涉及一种芦柑保鲜剂组合物及其制备方法。
背景技术
福建永春芦柑是永春县一带传统的名优特产之一，在国内外市场上享有盛誉。国外水果商称之为“东方佳果”。芦柑果实成熟期为10-11月，处于较高温气候季节，因而果实易遭受采后病菌的侵染，造成果实腐烂和品质下降。芦柑果实采后和贮藏运输中，主要由意大利青霉(penicilliumitalicum)和指状青霉(penicilliumdigitatum)引起的青霉病和绿霉病。并且扩展青霉(penicilliumexpansum)也能导致青霉病害，其侵染果实中分泌的展青霉素是一种神经性真菌毒素，会产生潜在的食品安全问题，它们共同造成严重的芦柑果实采后腐烂，会导致严重的农业经济损失而阻碍柑橘产业的发展。
目前，主要通过化学杀菌剂如抑霉唑、赛苯咪唑、邻苯基苯酚钠、咯菌腈、嘧霉胺、百可得和咪鲜胺等进行芦柑果实保鲜，化学杀菌剂的长久使用会造成病原菌耐药性增强，产生诸多的环境及社会问题，不符合当今绿色发展和生态文明建设的主题，因此开展环保型的保鲜产品势在必行。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种芦柑保鲜剂组合物。
本发明的另一目的在于提供上述芦柑保鲜剂组合物的制备方法
本发明的技术方案如下：
一种芦柑保鲜剂组合物，由如下重量百分比的组分组成：
其中，溶剂由2.5～3.5％碳酸钠溶液和0.4～0.6％羧甲基壳聚糖溶液以0.8～1.2∶2.5～3.5的体积比组成；上述胜红蓟精油采用干燥的胜红蓟的茎叶粉末和水通过超声波辅助水蒸气蒸馏法制备。
在本发明的一个优选实施方案中，所述胜红蓟精油与无水乙醇的重量比为1∶3。
进一步优选的，由如下重量百分比的组分组成：
在本发明的一个优选实施方案中，所述溶剂由3％碳酸钠溶液和0.5％羧甲基壳聚糖溶液以1∶3的体积比组成。
在本发明的一个优选实施方案中，所述吐温为吐温-80。
上述芦柑保鲜剂组合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)将胜红蓟精油溶于无水乙醇中，搅拌，漩涡震荡至均匀状态，获得油相；
(2)将吐温加入到上述油相中，搅拌，漩涡震荡至均匀状态；
(3)将碳酸钠溶液与羟甲基壳聚糖溶液混合后，超声处理15～25min，获得溶剂，上述超声处理的功率为180～220w，频率为38～42khz；
(4)将上述溶剂加入到步骤(2)所得的物料中，混合均匀，即得所述芦柑保鲜剂组合物。
在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(3)中超声处理的时间为20min，超声处理的功率为200w，频率为40khz。
本发明的有益效果是：
1、本发明的芦柑保鲜剂组合物，能显著抑制意大利青霉、指状青霉和扩展青霉的生长，用此保鲜剂对芦柑浸果处理，显著降低芦柑在贮存过程中的失水率和腐烂率。
2、本发明的芦柑保鲜剂组合物的配方成分简单、配制工艺简单，天然环保无毒，符合当前绿色、环保和生态文明建设的理念，具有良好的开发和应用前景。
附图说明
图1为本发明实施例1制得的芦柑保鲜剂组合物对芦柑保鲜过程中失重率的影响图。其中，失重率为3次重复实验的平均值±标准偏差；图中同一天柱状图后面的不同小写字母表示duncan多重比较于0.05水平差异显著(p＜0.05)。
图2为本发明实施例1制得的芦柑保鲜剂组合物对芦柑保鲜过程中腐烂率的影响图。其中，腐烂率为3次重复实验的平均值±标准偏差；图中同一天柱状图后面的不同小写字母表示duncan多重比较于0.05水平差异显著(p＜0.05)。
具体实施方式
以下通过具体实施方式结合附图对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
下述实施例中的胜红蓟精油采用超声波辅助水蒸气蒸馏法制备，取干燥的胜红蓟的茎叶粉末(40目)100g，按料液比1∶20加入2000ml的水，超声功率200w(40khz)，于25℃处理20min，加入磁子搅拌器，将粉末混合均匀，连接挥发油测定器与回流冷凝管，置电热套中缓缓加，并保持微沸，提取4h，收集挥发油测定器中分层后的上层液，将上层萃取液用无水硫酸钠脱水，得浅黄色的胜红蓟精油。胜红蓟精油用棕色密闭玻璃容器收集，封口，置于4℃备用。
实施例1
芦柑保鲜剂组合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)按如下比例称取各组分：
所述溶剂由3％碳酸钠溶液和0.5％羧甲基壳聚糖溶液以1∶3的体积比组成；
(2)将胜红蓟精油溶于无水乙醇中，搅拌，漩涡震荡至均匀状态，获得油相；
(3)将吐温-80加入到上述油相中，搅拌，漩涡震荡至均匀状态；
(4)将3％碳酸钠溶液和0.5％羧甲基壳聚糖溶液以1∶3的体积比混合后，超声处理20min，获得溶剂，上述超声处理的功率为200w，频率为40khz；
(5)将上述溶剂加入到步骤(3)所得的物料中，混合均匀，即得所述芦柑保鲜剂组合物。
实验一、不同浓度芦柑保鲜剂组合物离体抑菌活性
以意大利青霉、指状青霉和扩展青霉作为供试菌种，用实施例1制备的芦柑保鲜剂组合物对芦柑病菌的抑制效果。
试验方法采用菌丝生长速率法。在无菌条件下，将准确称量的保鲜剂(即实施例1的芦柑保鲜剂组合物)与灭菌的pda培养基混合后，倒入培养皿内，制成不同浓度的带药平板，以加入无菌水培养基作为对照组。用无菌打孔器在培养5天的病原菌的平板上取直径6mm的菌饼，转移到所有平板中央，于28℃生化培养箱培养，接种后分别于5d后测定菌生长的直径。每个处理3个平板，试验重复3次。按如下公式计算抑制率：
菌丝生长抑制率＝(对照组菌落生长直径-实验组菌落生长直径)/(对照组菌落生长直径-菌饼直径)×100％
表1不同浓度芦柑保鲜剂组合物对意大利青霉、指状青霉和扩展青霉离体抑菌活性
注：抑制率为3次重复实验的平均值±标准偏差；表格中每一列数字后面的不同小写字母表示duncan多重比较于0.05水平差异显著(p＜0.05)。
表1实验结果表明，不同浓度保鲜剂对意大利青霉、扩展青霉和指状青霉离体抑菌效果差异均显著(p＜0.05)，且浓度越高，杀菌效果越好。
实验二、不同浓度芦柑保鲜剂组合物活体抑菌活性
无菌条件下，用接种针在芦柑果实腰部刺伤一个直径为4mm，深度为3mm的伤口，同时接入混合菌孢子悬浮液(106cfu/ml意大利青霉、指状青霉和扩展青霉孢子悬浮液按1∶1∶1的比例混合)和芦柑保鲜剂组合物(实施例1所得)，对照接种蒸馏水与混合菌孢子悬浮液。接种后，将各果实置于托盘，并用保鲜膜将托盘口封好，并置于28℃培养箱培养，5d后用十字交叉法测量果实病斑直径，按如下公式计算抑制率，每组处理6个果实，每个处理重复3次。
抑制率(％)＝(对照组病斑平均直径-处理组病斑平均直径)/对照组病斑平均直径×100％。
表2不同浓度的芦柑保鲜剂组合物对意大利青霉、指状青霉和扩展青霉活体抑菌活性
注：抑制率为3次重复实验的平均值±标准偏差；表格中每一列数字后面的不同小写字母表示duncan多重比较于0.05水平差异显著(p＜0.05)。
表2实验结果表明，随着保鲜剂浓度的增加，芦柑果实上病菌直径逐渐减少，与对照相比差异均显著(p＜0.05)，对芦柑意大利青霉、指状青霉和扩展青霉病菌的防治效果增强，且不同浓度处理组的杀菌效果差异显著(p＜0.05)。
实验三、芦柑保鲜剂组合物对芦柑保鲜效果
采摘成熟后的芦柑果实，挑选大小均匀、无病虫害、成熟度一致、表面无机械损伤的果实，用清水清洗，自然晾干，将芦柑果实表面浸泡在浓度为20mg/ml的复合微乳液保鲜剂中2min，自然晾干，对照则不进行任何处理，果实处理好后装入聚乙烯塑料薄膜袋，于25℃，相对湿度85％保存，每组处理50个果实，重复处理3次。
失重率：所有果实在保鲜前称重得到m0，保鲜期间每隔一定时间称重得到mt，按下式计算相对失重率。
失重率＝(m0-mt)/m0×100％
腐烂率＝腐烂个数/总果数
图1实验结果表明，随着保鲜天数的延长，果实的失重率逐渐升高，保鲜剂处理组与对照相比，不同天数均能显著降低芦柑果实的失重率(p＜0.05)。说明胜红蓟精油复合微乳液的芦柑保鲜剂能起到有效的保鲜作用，减缓果实水分的散失。
图2实验结果表明，随着保鲜天数的延长，果实的腐烂率逐渐升高，保鲜剂处理组与对照相比，不同天数均能显著降低芦柑果实的腐烂率(p＜0.05)。说明胜红蓟精油复合微乳液的芦柑保鲜剂能防止真菌病害侵染芦柑果实，延长芦柑果实的储藏时间。
以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围。