本发明涉及保健食品技术领域，特别是涉及海洋鱼类游离肽提取物及其制备方法和应用。
背景技术：
海洋鱼类资源丰富，海洋鱼类游离肽粗提物不仅味道鲜美，而且营养价值高、吸收利用快、安全性高。
由于现代生活节奏的加快与生活环境条件的日益恶化，以及白领一族长期使用电脑等原因，皮肤出现黄褐斑与细小裂纹人群，尤其是女性越来越多。黄褐斑是皮肤黒色素增加而形成的一种面部显褐色或黒色色素沉着损容性的皮肤病，是皮肤科疑难症之一。黑色素是酪氨酸在酪氨酸酶的作用下由无色的酪氨酸生成多巴，多巴又在酪氨酸酶的作用下变成多巴醌，再经一系列氧化过程，最后形成黑色素。正常情况下，黑色素形成以后，一部份会被分解，通过肾脏排出体外，另一部分会随着表皮的脱落而脱落。但是，若酪氨酸酶活性增强，黑色素增多，急增的黑色素又因代谢的迟缓而无法排出体外，就会淤积在脸上形成黄褐斑。
目前，临床上治疗黄褐斑多采用具有抗氧化的多酚，皂苷等生物活性成分的外用敷药，治愈率低，复发率高，疗效不明显，用药不方便。而市场上销售的祛斑美白保健品制备工艺复杂，大多是中药成分，熬制过程比较麻烦，口感不好，疗效也不甚理想。
技术实现要素：
基于此，有必要提供一种海洋鱼类游离肽提取物的制备方法。该制备方法制得的海洋鱼类游离肽提取物中，组氨酸二肽、谷胱甘肽和牛磺酸含量高，能够有效祛皱以及改善黄褐斑，且制备方法简单、高效。
一种海洋鱼类游离肽提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)将前处理后的海洋鱼绞碎；
(2)于步骤(1)绞碎后的海洋鱼中加水进行至少一次超声提取，收集提取液，浓缩、干燥，即可；其中，所述超声提取的条件为：超声频率10-20khz，超声功率：400-600w，超声时间15-30min。
在其中一个实施例中，步骤(2)中，所述超声提取的次数为两次：
a)先于所述绞碎后的海洋鱼中加水进行第一次超声，所述第一次超声的条件为：超声频率15-25khz，超声功率：450-550w，超声时间20-30min；所得提取物离心，得残渣和第一次提取液；
b)于所述残渣中再加入水，进行第二次超声，所述第二次超声的条件为：超声频率15-25khz，超声功率：450-550w，超声时间15-30min；所得提取物离心，收集第二次提取液，并与所述第一次提取液合并，即得所述提取液。
在其中一个实施例中，步骤a)或步骤b)中，所述离心采用400-600目的滤袋进行。
在其中一个实施例中，步骤(2)中，所述水的用量控制为料液比1:1.5-3。
在其中一个实施例中，所述超声提取的温度控制为20-30℃。
在其中一个实施例中，步骤(2)中，所述浓缩为真空浓缩。
在其中一个实施例中，步骤(2)中，所述干燥的方法为喷雾干燥。
在其中一个实施例中，步骤(1)中，所述前处理包括去头、去内脏、去鳃、去鳞。
在其中一个实施例中，所述海洋鱼为具有洄游特性的海洋鱼类。优选为鲣鱼、金枪鱼。
本发明还提供所述的制备方法制备得到的海洋鱼类游离肽提取物。
在其中一个实施例中，其组成包括重量占比为5.0％-8.0％(w/w)的组氨酸二肽(肌肽与鹅肌肽)、重量占比为0.7％-1.5％(w/w)的谷胱甘肽、重量占比为3.0％-6.0％(w/w)的牛磺酸。
本发明还提供所述的海洋鱼类游离肽提取物在制备具有改善黄褐斑、祛皱功效的保健品中的应用。
本发明还提供一种具有改善黄褐斑、祛皱功效的保健品，其活性成分包括所述的海洋鱼类游离肽提取物。
在其中一个实施例中，所述的保健品以质量份计，包括所述的海洋鱼类游离肽提取物60-75份、针叶樱桃25-40份。
在其中一个实施例中，所述的保健品以质量份计，包括所述的海洋鱼类游离肽提取物60-75份、针叶樱桃25-40份、三氯蔗糖1份。
在其中一个实施例中，所述针叶樱桃的维生素c含量为4％-6％(w/w)。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明的海洋鱼类游离肽提取物的制备方法，对绞碎后的海洋鱼进行超声水提，通过合理控制超声提取的条件，可以简单高效的对海洋鱼类游离态进行提取，且获得的海洋鱼类游离肽提取物中，组氨酸二肽(肌肽与鹅肌肽)、谷胱甘肽和牛磺酸含量高，肌肽具有清除自由基与激活皮肤活性因子功效，鹅肌肽具有促进黑色素排出作用，牛磺酸具有增强皮肤的抗疲劳功能，综合谷胱甘肽能够有效改善皮肤黄褐斑，修复皮肤细纹。
本发明的具有改善黄褐斑、祛皱功效的保健品，通过采用上述制备方法获得的海洋鱼类游离肽提取物，能够从改善皮肤营养、激活皮肤活性因子、抑制黑色素形成与促进黑色素排出等多途径祛除皮肤黄褐斑与修复皮肤细纹，效果显著，且产品安全、无副作用。
进一步地，将该海洋鱼类游离肽提取物与针叶樱桃进行配伍，能够提高保健品的自由基清除和抗氧化作用，优化祛除皮肤黄褐斑与修复皮肤细纹功效，且针叶樱桃还能够调整风味，改善口感，使该保健品便于服用。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明的海洋鱼类游离肽提取物及其制备方法和应用作进一步详细的说明。
实施例1
本实施例一种海洋鱼类游离肽提取物的制备方法，步骤如下：
(1)以扁舵鲣鱼为原料，前处理(去头、去内脏、去鳃、去鳞等)后，绞肉机绞碎；
(2)将绞碎后的扁舵鲣鱼与水按质量比1:2混匀，在室温(25℃)条件下，超声(超声频率：20khz，超声波器框尺寸(l×w×hmm)：550*330*360，超声功率：500w)提取20分钟，然后用三足式离心机(内置600目的布袋)离心去掉残渣，收集第一次提取液；再将残渣与水按质量比1:2混匀，在室温(25℃)条件下，超声(超声频率：20khz，超声波器框尺寸(l×w×hmm)：550*330*360，超声功率：500w)提取20分钟，然后用三足式离心机(内置600目的布袋)进行第二次离心去掉残渣，收集第二次提取液；
(3)将第一次提取液和第二次提取液合并，进行真空浓缩与喷雾干燥，得到扁舵鲣鱼游离肽提取物，其中，组氨酸二肽重量占比5.5-7.0％、谷胱甘肽重量占比0.8-1.0％、牛磺酸重量占比4.0-5.0％。
实施例2
本实施例一种具有改善黄褐斑功效的保健品，以重量份计，原料组分如下：
实施例1的扁舵鲣鱼游离肽提取物70份、针叶樱桃粉29份、三氯蔗糖1份。
该保健品的制备方法为：将所述扁舵鲣鱼游离肽提取物、针叶樱桃粉、三氯蔗糖充分混匀，即可，产品用铝铂袋包装，5.0g/袋。
功效实验：将20名黄褐斑患者分为实验组1和实验组2，每组10人，实验组1仅服用实施例1的扁舵鲣鱼游离肽提取物，实验组2服用实施例2的保健品。服用方法为：每天5.0g，用80℃温水充泡，口服。1个月后，实验组1有5人表示有效，实验组2有8人表示有效，实验组2效果较实验组1更明显，另外，患者均表示该保健品无不良气味，口感好。(评判标准：有效——患者的黄褐斑淡化或消褪，皮肤细纹减少，润泽度增加；否则为无效)
实施例3
本实施例一种海洋鱼类游离肽提取物的制备方法，步骤如下：
(1)以黄鳍金枪鱼为原料，前处理(去头、去内脏、去鳃、去鳞等)后，绞肉机绞碎；
(2)将绞碎后的黄鳍金枪鱼与水按质量比1:2混匀，在室温(25℃)条件下，超声(超声频率：20khz，超声波器框尺寸(l×w×hmm)：550*330*360，超声功率：500w)提取30分钟，然后用三足式离心机(内置600目的布袋)离心去掉残渣，收集第一次提取液；再将残渣与水按质量比1:2混匀，在室温(25℃)条件下，超声(超声频率：20khz，超声波器框尺寸(l×w×hmm)：550*330*360，超声功率：500w)提取15分钟，然后用三足式离心机(内置600目的布袋)进行第二次离心去掉残渣，收集第二次提取液；
(3)将第一次提取液和第二次提取液合并，进行真空浓缩与喷雾干燥，得到黄鳍金枪鱼游离肽提取物，其中，组氨酸二肽重量占比5.8-7.3％、谷胱甘肽重量占比0.9-1.2％、牛磺酸重量占比4.0-5.0％。
实施例4
本实施例一种具有改善黄褐斑功效的保健品，以重量份计，原料组分如下：
实施例3的黄鳍金枪鱼游离肽提取物68份、针叶樱桃粉31份、三氯蔗糖1份。
该保健品的制备方法为：将所述黄鳍金枪鱼游离肽提取物、针叶樱桃粉、三氯蔗糖充分混匀，即可，产品用铝铂袋包装，5.0g/袋。
功效实验：将20名黄褐斑患者分为实验组3和实验组4，每组10人，实验组3仅服用实施例3的黄鳍金枪鱼游离肽提取物，实验组4服用实施例4的保健品。服用方法为：每天5.0g，用80℃温水充泡，口服。1个月后，实验组3有6人表示有效，实验组4有8人表示有效，实验组4效果较实验组3更明显，另外，患者均表示该保健品无不良气味，口感好。(评判标准：有效——患者的黄褐斑淡化或消褪，皮肤细纹减少，润泽度增加；否则为无效)
实施例5
本实施例一种海洋鱼类游离肽提取物的制备方法，步骤如下：
(1)以黄鳍金枪鱼为原料，前处理(去头、去内脏、去鳃、去鳞等)后，绞肉机绞碎；
(2)将绞碎后的黄鳍金枪鱼与水按质量比1:2混匀，在室温(25℃)条件下，超声(超声频率：20khz，超声波器框尺寸(l×w×hmm)：550*330*360，超声功率：500w)提取20分钟，然后用三足式离心机(内置600目的布袋)离心去掉残渣，收集第一次提取液；再将残渣与水按质量比1:2混匀，在室温(25℃)条件下，超声(超声频率：20khz，超声波器框尺寸(l×w×hmm)：550*330*360，超声功率：500w)提取30分钟，然后用三足式离心机(内置600目的布袋)进行第二次离心去掉残渣，收集第二次提取液；
(3)将第一次提取液和第二次提取液合并，进行真空浓缩与喷雾干燥，得到黄鳍金枪鱼游离肽提取物，其中，组氨酸二肽重量占比6.0-7.5％、谷胱甘肽重量占比0.9-1.3％、牛磺酸重量占比4.5-5.5％。
实施例6
本实施例一种具有改善黄褐斑功效的保健品，以重量份计，原料组分如下：
实施例5的黄鳍金枪鱼游离肽提取物66份、针叶樱桃粉33份、三氯蔗糖1份。
该保健品的制备方法为：将所述黄鳍金枪鱼游离肽提取物、针叶樱桃粉、三氯蔗糖充分混匀，即可，产品用铝铂袋包装，5.0g/袋。
功效实验：将20名黄褐斑患者分为实验组5和实验组6，每组10人，实验组5仅服用实施例5的黄鳍金枪鱼游离肽提取物，实验组6服用实施例6的保健品。服用方法为：每天5.0g，用80℃温水充泡，口服。1个月后，实验组5有7人表示有效，实验组6有9人表示有效，实验组6效果较实验组5更明显，另外，患者均表示该保健品无不良气味，口感好。(评判标准：有效——患者的黄褐斑淡化或消褪，皮肤细纹减少，润泽度增加；否则为无效)
实施例7
本实施例一种海洋鱼类游离肽提取物的制备方法，步骤如下：
(1)以扁舵鲣鱼为原料，前处理(去头、去内脏、去鳃、去鳞等)后，绞肉机绞碎；
(2)将绞碎后的扁舵鲣鱼与水按质量比1:2混匀，在室温(25℃)条件下，超声(超声频率：20khz，超声波器框尺寸(l×w×hmm)：550*330*360，超声功率：500w)提取30分钟，然后用三足式离心机(内置600目的布袋)离心去掉残渣，收集第一次提取液；再将残渣与水按质量比1:2混匀，在室温(25℃)条件下，超声(超声频率：20khz，超声波器框尺寸(l×w×hmm)：550*330*360，超声功率：500w)提取30分钟，然后用三足式离心机(内置600目的布袋)进行第二次离心去掉残渣，收集第二次提取液；
(3)将第一次提取液和第二次提取液合并，进行真空浓缩与喷雾干燥，得到扁舵鲣鱼游离肽提取物，其中，组氨酸二肽重量占比6.0-7.5％、谷胱甘肽重量占比1.0-1.2％、牛磺酸重量占比4.8-5.5％。
实施例8
本实施例一种具有改善黄褐斑功效的保健品，以重量份计，原料组分如下：
实施例7的扁舵鲣鱼游离肽提取物62份、针叶樱桃粉37份、三氯蔗糖1份。
该保健品的制备方法为：将所述扁舵鲣鱼游离肽提取物、针叶樱桃粉、三氯蔗糖充分混匀，即可，产品用铝铂袋包装，5.0g/袋。
功效实验：将20名黄褐斑患者分为实验组7和实验组8，每组10人，实验组7仅服用实施例7的扁舵鲣鱼游离肽提取物，实验组8服用实施例8的保健品。服用方法为：每天5.0g，用80℃温水充泡，口服。1个月后，实验组7有7人表示有效，实验组8有10人表示有效，实验组8效果较实验组7更明显，另外，患者均表示该保健品无不良气味，口感好。(评判标准：有效——患者的黄褐斑淡化或消褪，皮肤细纹减少，润泽度增加；否则为无效)
实施例9
本实施例一种海洋鱼类游离肽提取物的制备方法，步骤如下：
(1)以扁舵鲣鱼为原料，前处理(去头、去内脏、去鳃、去鳞等)后，绞肉机绞碎；
(2)将绞碎后的扁舵鲣鱼与水按质量比1:2混匀，在室温(25℃)条件下，超声(超声频率：20khz，超声波器框尺寸(l×w×hmm)：550*330*360，超声功率：500w)提取30分钟，然后用三足式离心机(内置600目的布袋)离心去掉残渣，收集第一次提取液；再将残渣与水按质量比1:2混匀，在室温(25℃)条件下，超声(超声频率：20khz，超声波器框尺寸(l×w×hmm)：550*330*360，超声功率：500w)提取25分钟，然后用三足式离心机(内置600目的布袋)进行第二次离心去掉残渣，收集第二次提取液；
(3)将第一次提取液和第二次提取液合并，进行真空浓缩与喷雾干燥，得到扁舵鲣鱼游离肽提取物，其中，组氨酸二肽重量占比5.8-7.5％、谷胱甘肽重量占比1.0-1.2％、牛磺酸重量占比4.6-5.5％。
实施例10
本实施例一种具有改善黄褐斑功效的保健品，以重量份计，原料组分如下：
实施例9的扁舵鲣鱼游离肽提取物64份、针叶樱桃粉35份、三氯蔗糖1份。
该保健品的制备方法为：将所述扁舵鲣鱼游离肽提取物、针叶樱桃粉、三氯蔗糖充分混匀，即可，产品用铝铂袋包装，5.0g/袋。
功效实验：将20名黄褐斑患者分为实验组9和实验组10，每组10人，实验组9仅服用实施例9的扁舵鲣鱼游离肽提取物，实验组10服用实施例10的保健品。服用方法为：每天5.0g，用80℃温水充泡，口服。1个月后，实验组9有7人表示有效，实验组10有9人表示有效，实验组8效果较实验组7更明显，另外，患者均表示该保健品无不良气味，口感好。(评判标准：有效——患者的黄褐斑淡化或消褪，皮肤细纹减少，润泽度增加；否则为无效)
对比例1
本对比例一种海洋鱼类游离肽提取物的制备方法，其原料和制备方法同实施例去，区别在于：
步骤(2)中，超声提取的时间均为40分钟。
所制得的鲣鱼游离肽提取物中，组氨酸二肽重量占比3.5-4.5％、谷胱甘肽重量占比0.4-0.6％、牛磺酸重量占比2.5-3.5％。
对比例2
本对比例一种海洋鱼类游离肽提取物的制备方法，其原料和制备方法同实施例去，区别在于：
步骤(2)中，超声提取的频率均为40khz。
所制得的鲣鱼游离肽提取物中，组氨酸二肽重量占比3.0-4.0％、谷胱甘肽重量占比0.3-0.6％、牛磺酸重量占比2.5-3.5％。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。