本发明涉及一种仔猪饲料添加剂。
背景技术：
生猪生产性能发挥受到诸多因素影响，其中品种因素占约20％，饲料及日常管理占约50％，生长环境则占约30％，饲养环境对猪生产性能发挥有很大的影响。集约化的生产模式侧重于降低养殖成本，提高养殖利润，而猪常处于亚健康状态，对生产性能和机体健康产生不利影响，导致发病率及死亡率上升，生产性能和养殖效益下降等诸多问题。研究表明，在集约化生产过程中仔猪处于应激状态(kerr,gilesetal.2005)，应激可以破坏猪机体的氧化还原稳态，随着机体氧化还原稳态的破坏，体内的活性氧(ros)含量增加，从而激活多种炎症通路并对器官造成损害，而这一损害在仔猪阶段尤为突出。(candek-potokar,ursicetal.1998,
胰腺是与能量代谢密切相关的器官之一。它的功能是中和胃酸，消化糖，蛋白质和脂肪。其内分泌的主要成分是胰岛素和胰高血糖素，其次是生长激素释放激素，肠血管活性肽，胃泌素等(meier,ockengaetal.2006)。胰岛素的作用是促进肝糖原和肌糖原的合成，促进葡萄糖进入肌肉和脂肪组织，激活葡萄糖激酶产生葡萄糖-6-磷酸；并抑制糖原异生，如胰岛素缺乏，进入组织细胞葡萄糖减少。肝糖原分解和异生增强；肝脏释放到血液中的葡萄糖大大增加，血糖水平升高，超过肾糖阈值并从尿液中排出，表现为糖尿病，胰腺炎(ferry,cerrietal.1999,ghasemi,haerietal.2013)。
cas凋亡蛋白酶是含半胱氨酸的天门冬氨酸特异蛋白酶，它是一组对底物天门冬氨酸部位有特异水解作用、活性中心含半胱氨酸的蛋白酶。目前已发现该蛋白酶家族共有13个(caspase1～13)，其中起凋亡启动子作用的有caspase8、9、10，起凋亡效应子作用的有caspase3、6、7。cas一般以没有活性的酶原形式存在，它主要通过两个途径被激活，一是受体激活途经，即调亡信号(如tnf-α等)与细胞表面的相应受体结合而被激活；二是线粒体激活途径，在调亡信号作用下，线粒体膜损伤，释放细胞色素c进入胞浆与腺嘌呤核苷三磷酸(adenosinetriphosphate，atp)和cas9等反应，最后激活cas3。
pdx-1(胰腺十二指肠同源盒-1)，也称为胰岛素启动子因子1，是胰腺发育所必需的转录因子，其调控β细胞成熟和十二指肠分化。(shi-heliu,sanjeetpateletal.2011).pdx-1胰腺多基因调控网络的中心基因。它调节胰岛素及其相关基因(如葡萄糖激酶和葡萄糖转运蛋白2)的表达，促进胰岛素分泌并维持β细胞的正常功能。(li,caoetal.2005)。它诱导如肝细胞(非胰岛素分泌细胞)的细胞成为胰岛素分泌细胞(gerrish,gannonetal.2000).它与胰岛素mrna启动子结合并调节胰岛素基因表达，而pdx-1的核异位是促进胰岛素分泌的关键。应激性炎症激活jnk通路，jnk通过激活pdx-1核输出信号诱导pdx-1从细胞核转运至细胞质，导致细胞核中pdx-1的表达降低(dan,kajimotoetal.2003,dan,kanetoetal.2006).
目前生猪养殖过程中，猪胰腺caspase8mrna表达量过高导致胰腺细胞凋亡是限制仔猪生产性能提高的重要因素。
技术实现要素：
本发明的目的是为了解决仔猪养殖过程胰腺细胞凋亡影响生长的技术问题，提供了一种减少仔猪胰细胞凋亡的饲料添加剂。
一种减少仔猪胰细胞凋亡的饲料添加剂按重量份数由10份的黄连、9份的柴胡、8份的厚朴、8份的佩兰、7份的大青叶、7份的芒消、6份的吴茱萸、5份的大枣和4份的生姜组成。
所述饲料添加剂的制备方法如下：将10重量份的黄连、9重量份的柴胡、8重量份的厚朴、8重量份的佩兰、7重量份的大青叶、7重量份的芒消、6重量份的吴茱萸、5重量份的大枣和4重量份的生姜在60～70℃条件下烘至恒重、粉碎、过40目筛，即得减少仔猪胰细胞凋亡的饲料添加剂。
将本发明的添加剂按重量百分比0.5％的比例添加到仔猪料中搅拌均匀，即可直接饲喂。
黄连：清泻肝火，使肝火得清，亦善清泻胃热，胃火降则其气自和，两清肝胃，标本兼顾；
柴胡：有和解表里，疏肝升阳之功效；
厚朴：燥湿消痰，下气除满；
佩兰：有芳香化湿，醒脾开胃，发表解暑的作用；
大青叶：清热解毒，凉血消斑；
芒消：泻热，润燥，软坚；
吴茱萸：味辛苦而性热，归肝、脾、胃、肾经，既能温胃暖肝以祛寒，又善和胃降逆；大枣甘平，以益脾气；
生姜以调脾胃，并能调和诸药。
本发明采用诸药配伍，温中与降逆并施，寓补益于温降之中，共奏温中补虚。减少了仔猪胰细胞凋亡。同时中草药具有来源天然、功能多样、无残留、无毒副作用的特点，制备方法简单易行、安全可靠。本发明具有简单实用，便于推广的特点，可促进仔猪生长，大幅度提高生猪养殖场整体经济效益。
具体实施方式
本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。
具体实施方式一：本实施方式一种减少仔猪胰细胞凋亡的饲料添加剂按重量份数由10份的黄连、9份的柴胡、8份的厚朴、8份的佩兰、7份的大青叶、7份的芒消、6份的吴茱萸、5份的大枣和4份的生姜组成。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是所述饲料添加剂的制备方法如下：将10重量份的黄连、9重量份的柴胡、8重量份的厚朴、8重量份的佩兰、7重量份的大青叶、7重量份的芒消、6重量份的吴茱萸、5重量份的大枣和4重量份的生姜在60～70℃条件下烘至恒重、粉碎、过40目筛，即得减少仔猪胰细胞凋亡的饲料添加剂。
采用下述实验验证本发明效果：
1.试验设计
将体况相近、健康状况良好、平均体重7.70㎏仔猪分成两组，每组20头，开展对比试验，其中试验组以按重量百分比0.5％的比例添加到仔猪料中；对照组不添加本试验的添加剂，在养殖环境一致的条件下，饲养30天。
2.饲养管理
每栏配有1个水泥料槽和5个乳头式饮水器，保障猪自由采食和饮水。试验期间，猪舍环境由人工维持，舍内温度、湿度、光照和卫生学指标均符合国家标准(gb/t17824.3-2008)。消毒、免疫等其他管理按照常规进行。出现重度腹泻或者疾病及时治疗或淘汰。
3.测定指标及方法
试验第30天20:00时，停止喂料，统计每栏30天内总采食量。于第31天清晨，对猪群进行空腹称重。计算得平均日增重(adg)、平均日采食量(adfi)和料肉比(adfi/adg,f/g)。
于第31天清晨对采集过血的试验猪进行屠宰，取胰腺组织小块，用锡箔纸包裹，立即放入液氮中冻存，后续放入-80℃冰箱冻存，待测。
根据新基因的测序结果，利用分子生物学软件primerpremier5、primer3.0、oligo6.71软件设计引物，并用blast工具进行引物特异性分析。运用聚合酶链式扩增反应(rt-pcr)检测其组织特异性，引物由上海生工基因技术有限公司合成。
4.数据处理
试验数据用spss(v19.0)软件统计并进行单因素方差分析(one-wayanalysisofvariance,anova)分析，实验结果用平均数±标准误(x±se)表示。统计差异显著性定义为p<0.05，极显著定义为p<0.01。
5.结果
表1对仔猪生产性能的影响
注：同行肩标小写字母不同表示差异显著(p<0.05)，字母相同表示差异不显著(p>0.05)。
表2仔猪胰腺mrna表达量的影响
注：同行肩标小写字母不同表示差异显著(p<0.05)，字母相同表示差异不显著(p>0.05)。
对试验结果加以分析：
(1)试验组adfi、adg、终重平均值分别为683g、560g、23.30kg，分别较对照组的656g、487g、21.38kg提高4.12％、14.99％、8.98％，试验组f/g平均值为1.21，较对照组的1.35降低11.57％，以上指标差异均达到显著水平(p＜0.05)，表明本添加剂可以显著促进仔猪的生长。
(2)试验组caspase8mrna表达量平均值为2.21，较对照组的3.66降低了65.61％，差异达到显著水平(p＜0.01)，表明本添加剂可以极显著减少仔猪胰腺细胞凋亡。