本发明属于农业产品技术领域，尤其涉及一种发酵饲料及加工方法，尤其涉及一种油菜秸秆发酵饲料的制备方法及发酵饲料。
背景技术：
据统计，自2006年以来，我国粮食产量逐年递增，同时农作物秸秆的产量也在逐年升高，我国农作物秸秆年产量已超过10亿吨，居世界首位。其中以粮食秸秆为主，占据秸秆总量的80％左右。据农业农村部统计，全国秸秆综合利用率约为80％左右，主要应用在秸秆还田、畜禽饲料、生物质能源和轻工业原料等方面，但仍有部分秸秆被直接焚烧或废弃。油菜是我国主要的油料作物之一，在我国种植分布广泛。油菜秸秆是油菜籽收割后剩余的茎秆部分，年产量高，富含粗蛋白，粗纤维和粗脂肪等营养物质，是十分理想的饲料资源。
油菜秸秆纤维素含量高，而蛋白质和脂肪含量较低，通常作为牛羊等反刍动物的粗饲料添加使用，但未经处理的秸秆适口性差，畜禽利用率低。因此找到合适的调制方法处理秸秆，改善其适口性和贮存方式至关重要。目前我国油菜秸秆饲料化的方法主要有粉碎、氨化、青贮和微贮等，但都有其局限性。微生物发酵秸秆可改善其营养价值，提高饲料粗蛋白含量，降低纤维含量，改善秸秆的适口性，从而达到降低饲料成本和提高养殖效益的目的。微生物发酵秸秆过程中起主要作用的是其分泌的各种功能酶如纤维素酶和木质素酶等，同时还有部分微生物可以通过菌丝生长破坏纤维素结构，促进酶的分解作用。秸秆经微生物发酵处理后，酸香味浓郁，秸秆软化，有助于提高动物的采食量，降低饲养成本；且微生物生长过程中产生的菌体蛋白和消化酶等产物有利于饲料在瘤胃中的消化吸收。目前，微生物发酵饲料在我国畜牧业已得到一定的应用，人们对微生物发酵饲料、畜产品质量的认识和重视程度的加强以及生物技术的迅速发展，将会进一步促进微生物发酵油菜秸秆技术的成熟，推动发酵油菜秸秆在畜禽养殖中的应用。
目前我国油菜秸秆饲料化的方法主要有物理处理法(蒸煮和膨化)、化学处理法(酸碱法和氨化)、青贮和微贮等，但物理法对机械设备要求高，导致生产成本较高，不易推广使用。化学处理法成本太高，且易造成环境污染。青贮和微贮需要在油菜还未成熟时整株收割，经济成本太高，且未对资源有效利用。
技术实现要素：
为了解决背景技术中存在的上述技术问题，本发明提供了一种既可降低秸秆废弃或焚烧带来的环境污染、又可提高油菜秸秆营养价值，降低饲养成本以及提高养殖效益的油菜秸秆发酵饲料的制备方法及发酵饲料。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种油菜秸秆发酵饲料的制备方法，所述油菜秸秆发酵饲料的制备方法包括以下步骤：
1)待油菜收获后，晾晒并切割粉碎，得到粉碎后的油菜秸秆；
2)将葡萄糖与尿素溶于水中，均匀喷洒于步骤1)所得到的粉碎后的油菜秸秆上，搅拌拌匀；所述油菜秸秆、葡萄糖以及尿素的重量比是(30-50)∶(2-6)∶(0.5-1.5)；所述油菜秸秆与水的重量体积比(kg/l)是(30-50)∶(50-70)；
3)将纤维素酶与漆酶按照(0.5-3)∶(1-5)的比例溶于水中，均匀喷洒在经步骤2)处理后的油菜秸秆上，每公斤油菜秸秆添加酶制剂不低于30g；
4)在步骤3)处理后的油菜秸秆上喷洒益生菌发酵剂，所述益生菌发酵剂由绿色木霉、产朊假丝酵母以及戊糖片球菌组成，所述喷洒浓度是80-120ml/kg；
5)将油菜秸秆装入发酵桶中，并进行高密度压实，压实后的油菜秸秆的密度是300±20kg/m3，用拉伸膜包裹，放置于平坦、干燥的室内，室温下自然发酵20天，即可完成油菜秸秆发酵饲料制作。
作为优选，本发明所采用的油菜秸秆、葡萄糖以及尿素的重量比是30∶6∶1.5；所述油菜秸秆与水的重量体积比(kg/l)是30∶58。
作为优选，本发明所采用的步骤3)中纤维素酶与漆酶的体积比是1∶2。
作为优选，本发明所采用的步骤4)中益生菌发酵剂的制备方法是：将益生菌接种于配好的培养液中，用发酵罐扩大培养，培养完成后，将绿色木霉，产朊假丝酵母和戊糖片球菌菌液按(4-6)∶(2-3)∶(2-3)混匀。
作为优选，本发明所采用的步骤4)中绿色木霉，产朊假丝酵母和戊糖片球菌菌液的体积比是2∶1∶1。
作为优选，本发明所采用的步骤5)中拉伸膜的厚度是3-4层。
作为优选，本发明所采用的油菜秸秆的含水量为8-10％。
作为优选，本发明所采用的步骤1)中切割粉碎的具体实现方式是先用切割机将油菜秸秆切成5-6cm的长段，再用粉碎机粉将油菜秸秆碎成1-2cm小段。
一种基于如前述的油菜秸秆发酵饲料的制备方法制备得到的油菜秸秆发酵饲料。
本发明的优点是：
本发明通过了一种油菜秸秆发酵饲料的制备方法及发酵饲料，该方法针对现有技术中油菜秸秆干物质含量高，氮源与碳源含量不足，气温低，易霉变的技术问题，采用微生物发酵处理，采用四种措施来提高发酵效果。一是添加一定水分来提高含水量，改善发酵环境；二是适量添加碳源与氮源，添加一定量的葡萄糖与尿素；三是添加纤维素酶与漆酶，有效降解油菜秸秆的纤维素与木质素；四是接种益生菌，接种一定比例的绿色木霉、产朊假丝酵母、戊糖片球菌，以降解纤维素，提高菌体蛋白含量，加快乳酸产生速度，抑制其他有氧霉菌、腐败菌的活动，采用这些措施后，发酵效果十分明显。本发明的操作简单、绿色安全、成本低廉，既可降低秸秆废弃或焚烧带来的环境污染，又可提高油菜秸秆营养价值，能够明显提高养殖效益。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明所提供的技术方案作进一步详细说明：
本发明提供了一种油菜秸秆发酵饲料的制备方法，包括如下步骤：
1)机械粉碎：油菜收获后，用转运车运回晒场上，晾晒，先用切割机切成5-6cm的长段，再用粉碎机粉碎成1-2cm小段，装袋备用。
2)添加剂掺混：将葡萄糖与尿素溶于水中，均匀喷洒与粉碎后的油菜秸秆上，搅拌拌匀，具体配比为油菜秸秆∶水∶葡萄糖∶尿素＝(30-50)∶(50-70)∶(2-6)：(0.5-1.5)；
3)外源酶添加：将纤维素酶与漆酶按照1∶2的比例溶于一定水中，均匀喷洒在油菜秸秆上，每公斤秸秆添加酶制剂30克。
4)喷洒益生菌：用喷雾器向搅拌好的油菜秸秆喷洒益生菌发酵剂，发酵剂由绿色木霉，产朊假丝酵母和戊糖片球菌组成，将益生菌接种于配好的培养液中，用发酵罐扩大培养，培养完成后，将绿色木霉，产朊假丝酵母和戊糖片球菌发酵液按2∶1∶1混匀，喷洒浓度为80-120ml/kg，用喷雾器向拌匀的油菜秸秆中均匀喷洒添加剂混合菌液，每吨饲料喷洒80-120l，即绿色木霉，产朊假丝酵母和戊糖片球菌菌液添加量分别为40-60l/t、20-30l/t、20-30l/t；优选的一种发酵油菜秸秆饲料，油菜秸秆30kg，水58l，葡萄糖6kg，尿素1.5kg，纤维素酶10g，漆酶20g，用喷雾器向掺混好的油菜秸秆喷洒混合菌液，绿色木霉菌液6l，产朊假丝酵母菌液3l，戊糖片球菌菌液3l。
5)密封发酵：将喷洒了菌液的混合配置好的油菜秸秆人工装入发酵桶，并进行高密度压实，密度为300±20kg/m3，用拉伸膜将装好通的原料包裹起来，一般包裹厚度为3-4层，放置于平坦、干燥的室内，室温下自然发酵20天，即可完成油菜秸秆发酵饲料制作。
油菜秸秆于江苏省海门市收割采购，含水量为8-10％。
漆酶和纤维素酶均购于上海源叶生物科技有限公司。绿色木霉，产朊假丝酵母和戊糖片球菌冻干粉均购置于中国工业微生物菌种保藏管理中心，所用菌种培养基试剂均购于国药集团化学试剂有限公司，并于江苏省海门市山羊研发中心扩大培养，发酵罐购于浙江金华至宏科技有限公司。其中，菌种培养基配制方法为：蛋白胨11g/l，硫酸钠13g/l，葡萄糖6g/l，磷酸二氢钾10.5g/l，用于绿色木霉扩大培养；葡萄糖40g/l，酵母粉5g/l，七水硫酸镁0.25g/l，磷酸二氢钾0.5g/l，蛋白胨10g/l，用于产阮假丝酵母扩大培养；酪朊水解物10g/l，酵母粉5g/l，柠檬酸二铵2g/l，醋酸钠25g/l，硫酸锰0.15g/l，硫酸镁0.58g/l，葡萄糖20g/l，吐温801ml/l，磷酸二氢钾6g/l，七水硫酸亚铁0.03/l，蒸馏水1l，冰醋酸调至ph5.4，用于戊糖片球菌扩大培养。
1、试验材料与方法
1.1试验时间与地点
实验于2018年8月10日-11月15日在江苏省海门市三厂镇金盛羊业发展有限公司进行。
1.2试验材料
发酵油菜秸秆试验：油菜秸秆购于江苏省海门市，油菜收获后晒干，用粉碎机粉碎。绿色木霉，产朊假丝酵母和戊糖片球菌冻干粉均购置于中国工业微生物菌种保藏管理中心，所用菌种培养基试剂均购于国药集团化学试剂有限公司，并于江苏省海门市山羊研发中心扩大培养，发酵罐购于浙江金华至宏科技有限公司。
发酵油菜秸秆肉羊育肥试验：试验挑选四月龄波杂母羊30只作为研究对象，试验组每组15只羊，每组分两栏饲喂，取综合评价最高的发酵油菜秸秆开展饲喂实验，试验前圈舍进行全面清洗消毒，清洗食槽。试验预饲7天，正式期60天，期间保持自由采食。
1.3实验设计
发酵油菜秸秆配方设计：以油菜秸秆为主要原料，添加酶制剂(纤维素酶与漆酶的体积比是1∶2)、氮源、碳源、益生菌发酵处理，本试验共设计3组配方，各添加剂按梯度添加，具体设计如下表。
表1-1发酵油菜秸秆配方设计
发酵油菜秸秆肉羊育肥试验：试验将30只4月龄波杂山羊分成2组，每组15只，预饲期7天，试验周期60天，试验时间为2018年9月15日到11月14日。试验组粗饲料以发酵油菜秸秆为主要粗料，对照组以大豆秸秆为主要粗料，试验为自由采食。
表1-2育肥试验日粮配方
1.4饲养管理
试验于江苏省海门市金盛羊业发展有限公司进行。预饲期7天，正饲期60天。试验按照该厂常规管理进行，试验开始前对羊舍的地面、墙壁和羊栏等进行彻底消毒，预饲期间对湖羊体检、驱虫和健胃等处理。试验羊采用分栏饲养，自由采食，分别于每天08:30和16:00饲喂，自由饮水，试验期间保证羊舍通风良好，自然光照。
1.5测定指标
发酵油菜秸秆感官测定：开启后从色泽、气味、质地、ph值和霉变等方面对发酵饲料品质进行评定，具体等级见下表1-3，并测定其常规营养成分。
表1-3发酵油菜秸秆试验质量检测鉴定标准
发酵油菜秸秆肉羊育肥试验：测定肉羊始重、末重、平均日增重、平均日采食、料肉比。
1.6数据处理
利用excel统计数据，spss软件进行单因素方差分析，并进行差异显著性检验。
结果与分析
2.1发酵油菜秸秆感官评定与常规营养成分分析
感官评定三组配方酸香味与质地存在一定差异，1号配方颜色、酸味、气味、质地均为中等ph值略低于标准，综合评价为中等，2号配方颜色与气味为优等但ph值低于标准，因而综合评价为中上，3号配方中感官测定均为优等，且ph值达到标准，综合评价为优等。
表2-1发酵油菜秸秆感官评价
发酵油菜秸秆常规营养成分测定
常规营养成分测定表明，3号配方粗蛋白显著高于其他两组(p＜0.05)，adf和ndf含量显著低于其他两组(p＜0.05)，表明3号配方营养成分含量高，且纤维素低，发酵效果最为显著。因而饲喂试验采用3号配方发酵油菜秸秆饲喂肉羊。
表2-2发酵油菜秸秆常规营养成分检测
同一列或同一行数字上标有相同字母或者无上标表示差异不显著(p＞0.05)，有不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)，下表(表2-4)同。
本发明以3号配方发酵得到的发酵油菜秸秆与未发酵油菜秸秆进行比较，结果发现：油菜秸秆发酵后氨基酸含量有所上升，其中，未发酵油菜秸秆与发酵油菜秸秆的非必需氨基酸总量分别为14.73g/kg和49.13g/kg，发酵后提高了334％。必需氨基酸含量分别为8.51g/kg和11.85g/kg，发酵后提高了140％。其中脯氨酸提高最多，为547％，油菜秸秆发酵后营养成分更加丰富。
表2-3油菜秸秆发酵前后氨基酸含量变化
2.2不同粗饲料对育肥山羊生产性能的影响
试验组羊只净增重、日增重、日采食量显著高于对照组，料重比低于对照组，饲喂实验组(发酵油菜秸秆，3号配方发酵得到的)提高山羊采食量和日增重，降低料重比，减少饲养成本，提高养殖效益。
表2-4发酵油菜秸秆于大豆秸秆喂养对比效果
同一列或同一行数字上标有相同字母或者无上标表示差异不显著(p＞0.05)，有不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)，下表(表2-5)同。
由表2-5可知日粮添加发酵油菜秸秆(以3号配方发酵所得)可显著提高饲料粗蛋白、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维消化率
表2-5发酵油菜秸秆添加比例对山羊营养物质表观消化率的影响
发明人经过大量实验，最终获取如下实施例的优选配方：
实施例1
一种发酵油菜秸秆饲料制备方法，包括以下步骤：
机械粉碎：油菜收获后，用转运车运回晒场上，晾晒，先用切割机切成5-6cm的长段，再用粉碎机粉碎成1-2cm小段，装袋备用。
添加剂掺混：将葡萄糖与尿素溶于水中，均匀喷洒与粉碎后的油菜秸秆上，搅拌拌匀，具体配比为油菜秸秆∶水∶葡萄糖∶尿素＝30∶58∶6∶1.5；
外源酶添加：将纤维素酶与漆酶按照1∶2的比例溶于一定水中，均匀喷洒在油菜秸秆上，每公斤秸秆添加酶制剂30克。
喷洒益生菌：用喷雾器向搅拌好的油菜秸秆喷洒益生菌发酵剂，发酵剂由绿色木霉，产朊假丝酵母和戊糖片球菌组成，将益生菌接种于配好的培养液中，用发酵罐扩大培养，培养完成后，将绿色木霉，产朊假丝酵母和戊糖片球菌发酵液按2∶1；1混匀，喷洒浓度为120ml/kg，用喷雾器向拌匀的油菜秸秆中均匀喷洒添加剂混合菌液，每吨饲料喷洒120l，即绿色木霉，产朊假丝酵母和戊糖片球菌菌液添加量分别为60l/t、30l/t、30l/t；
密封发酵：将喷洒了菌液的混合配置好的油菜秸秆人工装入发酵桶，并进行高密度压实，密度为300±20kg/m3，用拉伸膜将装好通的原料包裹起来，一般包裹厚度为3-4层，放置于平坦、干燥的室内，室温下自然发酵20天，即可完成油菜秸秆发酵饲料制作。