一种文冠果抗氧化肽保健饮品及其制备方法与流程

本发明属于食品工业深加工技术领域，具体涉及一种文冠果抗氧化肽保健饮品及其制备方法。

背景技术：

自由基也称为“游离基”，是指化合物的分子在光热等外界条件下，共价键发生均裂而形成的具有不成对电子的原子或基团。自由基极其活波，可攻击生命大分子物质，如核酸、蛋白质、糖类、脂肪和生物膜等成分，造成机体的多种损伤和病变，加速机体的衰老。一般通过补充外源性抗氧化剂来提高机体抗氧化水平，防止自由基对机体的危害。

在生活中，机体主要通过膳食来获取各种营养物质补充体内代谢所需，在膳食营养方面，我们一般考虑选择具有一定清除自由基能力的食物，除了医药类特殊抗氧化剂，食物中抗氧化剂基本分为：维生素类、植物提取物类、微量元素和蛋白质多肽氨基酸类。其中多肽分子是介于氨基酸和蛋白质之间的一种化合物，其具有与氨基酸和蛋白质相迥异的功能特性，具有蛋白质或其氨基酸组成所没有的特殊功能，如抗氧化和降血压等功能，并且吸收率高，安全性好，在食品医药领域具有广阔的前景。

文冠果又称文冠木，是无患子科、落叶灌木或小乔木植物，是我国特有的一种食用油料树种。文冠果种子含油42-52％，种仁含油率高达55-70％，其去油后的脱脂粕中蛋白含量高达95％以上，有18种氨基酸，必需氨基酸齐全，且氨基酸评分较高。工业上一般采用亚临界萃取法提取文冠果籽油，得到文冠果粕一般用于饲料或其他用途，产品附加值低，资源浪费严重。

目前生物活性肽的制备方法有化学法、酶解法和生物发酵法。化学法存在成本高，化合物残留等问题，仅用于生产高价的药理级肽。生物发酵法在生产抗氧化肽方面略有欠缺，广泛用于实验室探究中。酶解法生产条件温和、反应过程易于控制，广泛地应用于生物活性肽的工业生产上。采用酶解法提取文冠果粕中的抗氧化多肽具有良好的应用前景，但是目前还未见报道。

技术实现要素：

为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种文冠果抗氧化肽保健饮品及其制备方法，制备出具有较好抗氧化性的保健饮品，制备方法简单，提高了文冠果粕的附加值，减少了生产抗氧化肽的成本。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种文冠果抗氧化肽保健饮品的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，采用碱溶酸沉法提取文冠果粕中的文冠果蛋白，经干燥后，得到文冠果蛋白粉；

步骤2，采用木瓜蛋白酶或菠萝蛋白酶对步骤1得到的文冠果蛋白粉进行酶解，得到文冠果蛋白酶解液；

步骤3，对步骤2制得的文冠果蛋白酶解液进行超滤处理，分离得到1k-10kda分子量的活性肽组分的透过液，冷冻干燥，得到文冠果多肽粉末；

步骤4，向步骤3得到的文冠果多肽粉末中加入辅料、添加剂和矫味剂，制得文冠果抗氧化肽保健饮品。

优选地，步骤1的具体步骤为：

将文冠果粕粉碎后过60-200目筛，加入文冠果粕质量15-20倍的纯净水，用2mol/l的naoh调节ph至8.0-10.0，搅拌2-3h后，在4℃条件下以6000-8000r/min的速度离心20-30min，离心后收集上清液，将上清液用2mol/l的hcl调节ph至4.5-4.6，在4℃条件下以6000-8000r/min的速度离心20-30min；用纯净水洗涤3次，加入纯净水搅拌并通过分散机使沉淀形成分散体系，并用2mol/l的naoh调节ph至7.0-7.2，真空冷冻干燥后得到文冠果蛋白粉。

优选地，步骤2的具体步骤为：

向步骤1制得的文冠果蛋白粉与水按1：(5-10)的质量比进行混合，调节混合液的ph至7.0-7.5，加入文冠果蛋白粉质量4％-6％的木瓜蛋白酶或菠萝蛋白酶，在40-55℃下酶解4-6h，在95-100℃下灭酶15-20min，离心取上清液，得到文冠果蛋白酶解液。

优选地，步骤3的具体步骤为：

在0.08-0.19mpa压力、30-45℃的条件下将步骤2得到的文冠果蛋白酶解液通过超滤膜进行分离，得到1k-10kda分子量的活性肽组分的透过液，取透过液经浓缩、冷冻干燥，得到文冠果多肽粉末。

进一步优选地，超滤膜为plac-c、plbc-c或b5-a。

优选地，步骤4的具体步骤为：

按照以下质量份数准备原料，文冠果多肽粉末2-6份、5-15份坚果油、1-3份脱脂坚果粉末、2-4份乳清分离蛋白、7-10份蜂蜜、坚果油份数100-150倍的纯净水，在40-50℃下搅拌1-2h，纱布过滤，利用混合液均质机在40-50mpa下均质2-3次，得混合乳液，再向混合乳液中加入8-15份浓缩果汁，在85-120℃条件下灭菌6-20s，灌装封盖后85-98℃水浴杀菌15-30min，冷却，制得文冠果抗氧化肽保健饮品。

进一步优选地，坚果油和脱脂坚果粉末是采用以下方法得到的：

将杏仁、花生、榛子和核桃去壳去皮后通过超微粉碎机粉碎得到混合粉末，将混合粉末放入超临界萃取罐中，采用超临界co2萃取的方法萃取得到坚果油，剩余坚果粉末过100-120目筛后得到脱脂坚果粉末。

进一步优选地，所用杏仁、花生、榛子和核桃的质量比为5:2:3:7。

进一步优选地，浓缩果汁为猕猴桃汁、梨汁、菠萝汁、葡萄汁、苹果汁、草莓汁、橙汁和蓝莓汁中的一种或几种。

本发明还公开了采用上述方法制备得到的文冠果抗氧化肽保健饮品。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

本发明公开的文冠果抗氧化肽保健饮品的制备方法，以文冠果粕为底物，通过木瓜蛋白酶或菠萝蛋白酶酶解，再经超滤技术得到1k-10kda分子量的抗氧化多肽组分，酶解条件可控、原料利用率高、蛋白回收率高，降低了生产成本，得到抗氧化多肽组分活性极强，可广泛应用于食品领域中。以制备得到的抗氧化多肽为原料制备保健饮品，工艺操作简单、生产成本低，具有广阔的市场前景。

本发明还公开了采用上述制备方法制得的文冠果抗氧化肽保健饮品，结合了其他天然物质成分，营养成分丰富，不仅具有抗氧化功能，还有多种保健功能，并且味道可口，无副作用，是一种理想的保健饮品。

附图说明

图1是不同分子量文冠果肽对dpph自由基清除率结果；

图2是不同分子量文冠果肽对abts自由基清除率结果。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。

实施例1

步骤1：将文冠果粕粉碎后过60目筛，取100g文冠果粕粉加入文冠果粕粉质量20倍的纯净水，用2mol/l的naoh调节ph至8.0，搅拌2h后，在4℃条件下以6000r/min的速度离心30min，离心后收集上清液，将上清液用2mol/l的hcl调节ph至4.5，在4℃条件下以6000r/min的速度离心30min；用纯净水洗涤3次，加入一定比例的纯净水搅拌并通过分散机使沉淀形成分散体系，并用2mol/l的naoh调节ph至7.0，真空冷冻干燥后得到文冠果蛋白粉。

步骤2：将文冠果蛋白粉与水按1：5的质量比进行混合，调节混合液的ph至7.0，加入文冠果蛋白粉质量4％的木瓜蛋白酶，在40℃下酶解4h，在100℃下灭酶15min，离心取上清液，得到文冠果蛋白酶解液。

步骤3：在0.08mpa压力、45℃的条件下将文冠果蛋白酶解液通过plac-c超滤膜进行分离，得到5kda分子量的活性肽组分的透过液，取透过液经浓缩、冷冻干燥，得到文冠果多肽粉末。

步骤4：将质量比为5:2:3:7的杏仁、花生、榛子和核桃去壳去皮后通过超微粉碎机粉碎得到混合粉末，将混合粉末放入超临界萃取罐中，采用超临界co2萃取的方法萃取得到坚果油待用，剩余坚果粉末过100目筛后得到脱脂坚果粉末待用。取文冠果多肽粉末2份、5份坚果油、1份脱脂坚果粉末、2份乳清分离蛋白、7份蜂蜜、坚果油份数100倍的纯净水，在40℃下搅拌2h，纱布过滤，利用混合液均质机在40mpa下均质2次，得混合乳液，再向混合乳液中加入8份猕猴桃汁、梨汁和菠萝汁混合成的浓缩果汁，在85℃条件下灭菌20s，灌装入玻璃瓶或塑料瓶或金属罐封盖后85℃水浴杀菌30min，采用冷却水冷却后清洗瓶身吹干后贴标，制得文冠果抗氧化肽保健饮品。

实施例2

步骤1：将文冠果粕粉碎后过100目筛，取40g文冠果粕粉加入文冠果粕粉质量18倍的纯净水，用2mol/l的naoh调节ph至9.0，搅拌3h后，在4℃条件下以7000r/min的速度离心25min，离心后收集上清液，将上清液用2mol/l的hcl调节ph至4.6，在4℃条件下以7000r/min的速度离心25min；用纯净水洗涤3次，加入一定比例的纯净水搅拌并通过分散机使沉淀形成分散体系，并用2mol/l的naoh调节ph至7.1，真空冷冻干燥后得到文冠果蛋白粉。

步骤2：将文冠果蛋白粉与水按1：7的质量比进行混合，调节混合液的ph至7.3，加入文冠果蛋白粉质量5％的菠萝蛋白酶，在45℃下酶解4h，在100℃下灭酶15min，离心取上清液，得到文冠果蛋白酶解液。

步骤3：在0.10mpa压力、38℃的条件下将文冠果蛋白酶解液通过plbc-c超滤膜进行分离，得到10kda分子量的活性肽组分的透过液，取透过液经浓缩、冷冻干燥，得到文冠果多肽粉末。

步骤4：将质量比为5:2:3:7的杏仁、花生、榛子和核桃去壳去皮后通过超微粉碎机粉碎得到混合粉末，将混合粉末放入超临界萃取罐中，采用超临界co2萃取的方法萃取得到坚果油待用，剩余坚果粉末过120目筛后得到脱脂坚果粉末待用。取文冠果多肽粉末4份、10份坚果油、2份脱脂坚果粉末、3份乳清分离蛋白、8份蜂蜜、坚果油份数120倍的纯净水，在45℃下搅拌1.5h，纱布过滤，利用混合液均质机在45mpa下均质3次，得混合乳液，再向混合乳液中加入12份葡萄汁、苹果汁、草莓汁和橙汁混合成的浓缩果汁，在120℃条件下灭菌6s，灌装入玻璃瓶或塑料瓶或金属罐封盖后98℃水浴杀菌15min，采用冷却水冷却后清洗瓶身吹干后贴标，制得文冠果抗氧化肽保健饮品。

实施例3

步骤1：将文冠果粕粉碎后过200目筛，取50g文冠果粕粉加入文冠果粕粉质量15倍的纯净水，用2mol/l的naoh调节ph至10.0，搅拌2.5h后，在4℃条件下以8000r/min的速度离心20min，离心后收集上清液，将上清液用2mol/l的hcl调节ph至4.6，在4℃条件下以8000r/min的速度离心25min；用纯净水洗涤3次，加入一定比例的纯净水搅拌并通过分散机使沉淀形成分散体系，并用2mol/l的naoh调节ph至7.2，真空冷冻干燥后得到文冠果蛋白粉。

步骤2：将文冠果蛋白粉与水按1：10的质量比进行混合，调节混合液的ph至7.5，加入文冠果蛋白粉质量4％的木瓜蛋白酶，在40℃下酶解4h，在100℃下灭酶15min，离心取上清液，得到文冠果蛋白酶解液。

步骤3：在0.19mpa压力、30℃的条件下将文冠果蛋白酶解液通过b5-a超滤膜进行分离，得到1kda分子量的活性肽组分的透过液，取透过液经浓缩、冷冻干燥，得到文冠果多肽粉末。

步骤4：将质量比为5:2:3:7的杏仁、花生、榛子和核桃去壳去皮后通过超微粉碎机粉碎得到混合粉末，将混合粉末放入超临界萃取罐中，采用超临界co2萃取的方法萃取得到坚果油待用，剩余坚果粉末过120目筛后得到脱脂坚果粉末待用。取文冠果多肽粉末6份、15份坚果油、3份脱脂坚果粉末、4份乳清分离蛋白、10份蜂蜜、坚果油份数150倍的纯净水，在50℃下搅拌2h，纱布过滤，利用混合液均质机在50mpa下均质2次，得混合乳液，再向混合乳液中加入15份蓝莓浓缩果汁，在120℃条件下灭菌6s，灌装入玻璃瓶或塑料瓶或金属罐封盖后98℃水浴杀菌15min，采用冷却水冷却后清洗瓶身吹干后贴标，制得文冠果抗氧化肽保健饮品。

实施例4

步骤1：将文冠果粕粉碎后过200目筛，取80g文冠果粕粉加入文冠果粕粉质量15倍的纯净水，用2mol/l的naoh调节ph至10.0，搅拌2.5h后，在4℃条件下以8000r/min的速度离心20min，离心后收集上清液，将上清液用2mol/l的hcl调节ph至4.6，在4℃条件下以8000r/min的速度离心25min；用纯净水洗涤3次，加入一定比例的纯净水搅拌并通过分散机使沉淀形成分散体系，并用2mol/l的naoh调节ph至7.2，真空冷冻干燥后得到文冠果蛋白粉。

步骤2：将文冠果蛋白粉与水按1：10的质量比进行混合，调节混合液的ph至7.5，加入文冠果蛋白粉质量4％的木瓜蛋白酶，在40℃下酶解4h，在100℃下灭酶15min，离心取上清液，得到文冠果蛋白酶解液。

步骤3：在0.19mpa压力、30℃的条件下将文冠果蛋白酶解液通过b5-a超滤膜进行分离，得到3kda分子量的活性肽组分的透过液，取透过液经浓缩、冷冻干燥，得到文冠果多肽粉末。

步骤4：将质量比为5:2:3:7的杏仁、花生、榛子和核桃去壳去皮后通过超微粉碎机粉碎得到混合粉末，将混合粉末放入超临界萃取罐中，采用超临界co2萃取的方法萃取得到坚果油待用，剩余坚果粉末过120目筛后得到脱脂坚果粉末待用。取文冠果多肽粉末6份、15份坚果油、3份脱脂坚果粉末、4份乳清分离蛋白、10份蜂蜜、坚果油份数150倍的纯净水，在50℃下搅拌2h，纱布过滤，利用混合液均质机在50mpa下均质2次，得混合乳液，再向混合乳液中加入15份蓝莓浓缩果汁，在120℃条件下灭菌6s，灌装入玻璃瓶或塑料瓶或金属罐封盖后98℃水浴杀菌15min，采用冷却水冷却后清洗瓶身吹干后贴标，制得文冠果抗氧化肽保健饮品。

本发明制得的文冠果抗氧化肽保健饮品对dpph自由基和abts自由基清除率实验：

如图1、2所示，为实施例1、2、3、4制备得到的含有不同分子量的文冠果抗氧化肽保健饮品对dpph自由基、abts自由基的清除率。可以发现，当分子量在1k-10kda范围内，分子量越低，文冠果抗氧化肽的自由基清除能力越强。